日粮蛋白质水平对湖羊门静脉血液生化指标的影响

徐州生物工程高等职业学校 王春梅

扬州大学动物科学与技术学院 孙龙生＊赵国琦

湖羊是我国特有的白色羔皮羊种，其羔皮出口在我国产品出口中占有很重要地位。近年来的研究表明，日粮蛋白质水平对山羊血液生化指标有一定影响，但对湖羊的相关研究较少。目前，我国饲料蛋白质资源十分缺乏，如何在满足畜禽营养需要的基础上尽可能降低日粮的蛋白质水平，一直是营养研究关注的热点。动物采食后，营养物质被消化吸收，通过各吸收组织中静脉血管的输送汇总于门静脉，因此门静脉血液能部分地反映出动物对营养物质的吸收情况（陈宇光等，2006）。本试验探讨不同蛋白质水平日粮对湖羊门静脉血液生化指标的影响，对发挥湖羊的生长潜力及提高饲料蛋白质的利用率具有重要意义。

1 材料和方法

1.1 试验动物 选取3只体况良好的湖羊，体重（35±3）kg，安装门静脉插管。

1.2 试验日粮与饲养管理 配制蛋白质 （CP）水平 分 别 为 8.4% （A）、11.2% （B）、14.0% （C），16.8%（D）的四种日粮。基础日粮组成及营养水平见表1，粗精比按7∶3配比。较高水平的蛋白质日粮（B、C、D组）由酪蛋白调节（食用级干酪素，CP=92.03%）。

1.3 试验设计 四种不同蛋白质水平日粮和三只湖羊按4×3不完全拉丁方试验设计方案，每期分别饲喂不同日粮，每期试验期为13 d，采样期为1 d。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.4 样品的采集 试验羊连续饲喂12 d，于第13 天 08∶00（喂前）、10∶00、12∶00、14∶00、16∶00 采集门静脉血液，每时间点取8 mL血样于肝素化的指形管中，摇匀，30 min内于4℃ 5000 g离心15 min，上清液置于-20℃保存待测。

1.5 样品的处理与分析

1.5.1 血浆氨态氮（NH3-N）浓度 采用酚-次氯酸钠显色法测定（王继贵，1996）。

1.5.2 血浆尿素氮（PUN）浓度 采用二乙酰-肟比色法测定（王继贵，1996）。

1.5.3 血浆肽氨基酸（PAA）浓度 采用液相色谱仪测定（Rubio，2003）。

1.6 数据统计分析 试验数据采用Excel软件进行整理，运用SPSS统计软件进行分析，差异显著性分析采用LDS法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 日粮蛋白质水平对门静脉血浆NH3-N浓度的影响 见表2。

表2 日粮蛋白质水平对门静脉血浆NH3-N浓度的影响mg/100 mL

由表2可以看出，各组NH3-N浓度均在采食2 h后达到最高值，然后逐渐下降，到16∶00降到最低。在同一时间点，NH3-N浓度开始随着蛋白质（8.4% ～14.0%）水平的上升而上升，但当蛋白质达到16.8%水平时，NH3-N浓度反而有所下降。四组NH3-N浓度平均值比较显示，C组极显著高于A组和B组 （P<0.01），D组显著高于A组和B组 （P<0.05），C组和D组间差异不显著（P>0.05）。

2.2 日粮蛋白质水平对门静脉PUN浓度的影响见表3。

表3 日粮蛋白质水平对门静脉PUN浓度的影响mg/100 mL

由表3可以看出，各组PUN浓度均呈现了先升高后下降的趋势。A、B组在采食后2 h达到最大值，C、D组在食后4 h达到最大值，在食后8 h降到与初始值相近的水平。PUN浓度的平均值随蛋白质水平的升高而升高，其中D组极显著高于A、B 组 （P<0.01），C 组 显 著 高 于 A 组 （P<0.05），C 组和 D 组差异不显著（P>0.05）。

2.3 日粮蛋白质水平对门静脉血浆PAA浓度的影响 见表4。

表4 日粮蛋白质水平对门静脉血浆PAA浓度的影响mg/100 mL

各组PAA浓度都逐渐上升，采食后4 h达到峰值，之后缓慢下降，至下次采食前达到与初始值相近的水平。PAA浓度随日粮蛋白质水平的升高而升高。组间比较显示，采食前（08∶00），C、D 组显著高于 A、B 组（P<0.05）。 食后 4 h，C 组含量最高，极显著高于 A 组（P<0.01），与B、D组差异不显著。四组PAA浓度平均值比较显示，C、D组显著高于A组（P<0.05），与B组差异不显著（P>0.05）。

3 讨论

3.1 日粮蛋白质水平对血浆NH3-N浓度的影响 反刍动物的消化道特点决定了其对氮素营养利用的复杂性，瘤胃微生物既可使饲料中的非蛋白氮转变为菌体蛋白，又可将饲料蛋白质分解。微生物发酵所产生的NH3-N能迅速通过瘤胃上皮吸收入血 （Broderick，1996），所以门静脉血液中NH3-N浓度与瘤胃液中NH3-N浓度关系密切。Seal（1996）报道，对公牛瘤胃瘘管灌注3种水平的小肽（0、0.5 g/d 和 1.0 g/d），结果发现小肽基本上不影响门静脉的血氨浓度。本试验中，四组间比较显示，C组最高，极显著高于A组和B组（P<0.01）；D 组显著高于 A 组和 B 组（P<0.05），C 组和D组差异不显著。表明日粮蛋白质水平对血氨浓度有一定的影响。

3.2 日粮蛋白质水平对PUN浓度的影响 反刍动物消化道内产生的氨除部分被微生物利用外，其余的氨经消化道上皮吸收入门静脉，随血液进入肝脏合成游离氨基酸和尿素。在动物氮平衡的情况下，90%的血液中尿素由尿排出体外，并且大多以尿素氮形式排出（方希修等，2001）。血液中的尿素浓度反映着反刍动物消耗氮的程度，随着血液中尿素氮的增加，饲料氮的损失也将增加，PUN的水平可反映动物蛋白质代谢状况，并可作为蛋白沉积的一个指标（Chikhou等，1993）。本试验中，门静脉PUN浓度受日粮蛋白质水平影响差异显著，呈现随蛋白质水平的上升而上升的趋势，与赵智华等（2009）研究中，重庆黑山羊血清尿素氮浓度随着饲粮蛋白质水平 （8.23%、10.42%和12.52%）的提高而呈上升趋势的结论一致。

3.3 日粮蛋白质水平对血浆PAA浓度的影响反刍动物中，血浆肽含量占总氨基酸的比例很大。Kolen和Webb（1982）发现在牛羊总氨基酸吸收中，肽完整吸收比例可达70%～80%。Danilson等（1987）也证实，犊牛血浆中肽含量很高（407 μmoL/dL）。 Seal和 Parker（1991）报道，牛、羊门静脉和心脏血浆中分别PAA占65%和78%。王岗 （2001）绵羊门静脉处肽氮浓度为3.17 mg/100 mL。本试验中，四种日粮条件下，门静脉PAA浓度比上述报道的偏低，其差异可能为日粮组成、试验动物、测定方法等不同所致，但还有待于进一步研究。

4 小结

日粮蛋白质水平（8.4%～16.8%）对湖羊门静脉血液生化指标有显著影响，但14.0%组和16.80%组差异不显著（P<0.05），表明 16.80%组日粮可能会引起蛋白质的浪费，以14.0%组的蛋白质水平较为适宜。

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