新生儿ABO溶血病溶血三项试验结果分析

杨 剑，刘剑荣，黄永建，喻 斌

(江西省萍乡市人民医院，江西 萍乡 337055)

新生儿溶血病一般特指母婴血型不合而引起胎儿或新生儿的免疫性溶血性疾病(haemolytie disease of newborn，简称HDN)。新生儿ABO-HDN(ABO血型不合引起的新生儿溶血病)是因母婴ABO血型不合，母亲产生的抗胎儿红细胞的免疫抗体IgG(抗A或抗B)通过胎盘进入胎儿体内，致敏胎儿红细胞在网状内皮系统被识别、清除，而导致溶血的。为了解本院溶血三项试验对新生儿ABO-HDN的诊断和防治提供的临床价值，现采用微柱凝胶法进行新生儿ABO血型及RhD血型、直接抗人球蛋白试验(DAT)、抗体释放试验、游离抗体试验。

1 资料与方法

1.1 一般资料 115例被检者为本院新生儿科2009年1月至2010年3月入院治疗的新生儿，均表现为高胆红素血症，年龄1h～22d。母亲血型均为“O”型 RhD 阳性。

1.2 试剂与仪器 人ABO血型反定型用红细胞试剂盒为上海血液生物医药有限责任公司产品，新生儿ABO、RhD血型检测卡(微柱凝胶)，血型不完全抗体检测卡，酸放散试剂盒，专用检测卡离心机和37℃孵育器均为长春博讯生物技术有限责任公司产品。

1.3 方法

1.3.1 标本和试剂处理 取被检者EDTA-K2抗凝血2ml，分离其血浆与红细胞，将红细胞用生理盐水洗涤4次，配成0.5%的红细胞悬液；同时采用压积红细胞进行酸放散处理，制备放散液。

1.3.2 血型鉴定和DAT取出新生儿ABO、RhD血型检测卡(微柱凝胶)，此卡共6孔，第6孔为直接抗人球蛋白检测孔，在检测新生儿血型时，也可进行直接抗人球蛋白试验。将配成的红细胞悬液每孔滴一滴，放专用离心机离心后观察结果。

1.3.3 游离试验和抗体释放试验 取血型不完全抗体检测卡，前3孔加被检者血浆各一滴，后3孔加新生儿红细胞悬液各一滴，将0.5%A型红细胞悬液加入1号、4号管中各一滴，0.5%B型红细胞悬液加入2号、5号管中各一滴，0.5%O型红细胞悬液加入3号、6号管中各一滴，放37℃孵育器孵育15min后于专用离心机离心后观察结果。

1.3.4 结果判读 离心后红细胞沉积在凝胶管底部者，表明红细胞未发生凝集，为阴性反应(-)；若红细胞聚集在凝胶柱的上部，表明红细胞发生凝集，为阳性反应(+)。新生儿ABO-HDN判定见表1。

表1 新生儿ABO-HDN血清学试验

2 结果

2.1 血型不完全抗体检测卡前3孔为游离抗体检查，有一孔为阳性反应即报游离试验阳性；后3孔为抗体释放试验，有一孔为阳性反应即报抗体释放试验阳性。

2.2 通过检测，其溶血三项试验表现为以下几种模式见表2。

表2 115例新生儿溶血三项检测结果

2.3 115例新生儿RhD均为阳性，其中“A”型69例，“B”型 39 例，“O”型 7 例，其血型鉴定结果与溶血三项试验结果分布见表3。

2.4 综合表2和表3，得115例送检标本中7例为O型血，不为ABO血型不合引起的HDN，占6.08%；9例确诊为ABO-HDN,占7.83%；85例为可疑ABO-HDN， 占73.9% ；14例为非ABO-HDN，占11.47%。

表3 115例新生儿血型鉴定结果与溶血三项试验结果分布情况

3 讨论

ABO-HDN多发生于O型母亲和A型或B型的婴儿，因为O型母亲血清中含有免疫性的抗A或抗B抗体，由于其效价较高，所以AB0溶血病患儿的母亲往往多数是0型[1]。本文115例患儿母亲血型均为O型，但有7例患儿也为O型，其中有1例溶血三项试验结果表现为模式二 (游离抗体试验和抗体释放试验均为阳性)，说明此患儿为红细胞ABO血型系统以外的血型不合引起的新生儿溶血病。由于本实验室条件的限制，我们没有进一步鉴定出具体哪种血型系统的母婴血型不合导致的HDN。

同时观察到，有的患儿黄疸、贫血很明显，但ABO-HDN三项检测皆为阴性。笔者认为可能有以下原因：(1)抽样时间较晚，使试验结果成假阴性，因此强调早期抽样的重要性[2]。(2)可能为其他原因造成新生儿溶血病。如：遗传性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶异常、遗传性球形红细胞症以及血红蛋白合成异常、由感染引起的红细胞获得性缺陷等等。因此，新生儿时期的溶血有很多原因，ABO-HDN检测皆为阴性时尚需根据病史做相应的检查，及早诊断和治疗。

新生儿ABO溶血症是早期新生儿高胆红素血症主要原因之一，由于新生儿胆红素代谢功能差，当胆红素大于2mg/L时或存在其他有利于胆红素通过血脑屏障因素时，脑组织被未结合胆红素黄染，形成高胆红素脑病，从而对大脑造成不可逆损害，产生后遗症，甚至临床上无核黄疸表现，但脑干听力诱发电位、闪光视觉诱发电位[3]、啼哭特性[4]及远期智商已有异常[5]。提示未结合胆红素易透过血脑屏障,损害神经细胞,对大脑皮层产生毒性作用。溶血性高胆红素血症时危险性更大[6]。因此了解和掌握ABO溶血症很重要。ABO溶血症发病率约为1.4%[7]。本实验虽然确诊为ABO-HDN比率较低，为7.83%，但可疑ABO-HDN的占到了73.9%，同时结合病人的临床表现，基本上将可疑患儿考虑为ABO-HDN，据临床反馈，将可疑患儿进行ABO-HDN患者的相同处理，治疗有效。说明在以后的工作中，本实验室报告模式三(游离抗体试验阳性)，本院临床上可以将患儿当作ABO-HDN进行治疗，降低溶血性高胆红素血症带来的危害，为患儿及早治疗。同时为预防ABO-HDN，“O”型孕妇产前血清IgG抗A(B)抗体效价检测尤为重要。一般认为母婴ABO血型不合导致的新生儿溶血病，当抗体效价≥64时，有可能造成新生儿溶血病[8]，需要加强观察。因此，笔者建议本实验室开展血清IgG抗A(B)抗体效价检测项目，以便ABO溶血病发现早,治疗及时，黄疸轻，降低了高胆红素血症发生率，从而减少了听力、智力及神经系统等后遗症。

[1]廖长征,黄衍锋,许瑞环,等.微柱凝胶技术用于新生儿溶血病诊断的效果评价[J].中国热带医学,2007,3(7):436-437.

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[7]洪庆成,严国杰.中外儿科医学文萃.天津:天津科技翻译出版公司,1993:2-2.

[8]高 峰.输血与输血技术[M].北京:人民卫生出版社,2003:99-99.