陈艳华 于中军
高效液相色谱法测定蛋糕中的栀子黄
陈艳华 于中军
栀子甙是栀子黄的主要成分,因此以栀子甙为对照品,蛋糕中栀子黄经提取净化后,作为供试品,用高效液相色谱法测定,以保留时间定性,峰面积定量进行含量测定。
高效液相色谱法;栀子黄;栀子甙
栀子黄作为食品着色剂已经列入GB 2760-1996食品添加剂使用卫生标准,最大使用量每千克不得超过0.3 g,含量微小,故我们采用高效液相色谱法测量[1-6],本方法精密度高,重现性好,灵敏,快速、准确且成本低可广泛使用。
1.1 仪器 岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪,高效液相色谱系统:Water’s M501泵,U6K进样器,岛津RF-535。配备全波长紫外检测器;小型粉碎机(FW100型北京中兴伟业仪器有限公司生产),电热恒温水浴(HH·S型江苏省红旗医疗器械厂生产)高效液相色谱操作条件色谱柱:Agilent HC-C185 μ 4.6×250 mm;柱温30℃,紫外检测器 检测波长:240 nm;流动相:甲醇:水(35∶65);流速:0.8 ml/min试剂:甲醇,石油醚(60~90℃),乙酸乙酯,三氯甲烷,以上试剂均为沈阳试剂五厂分析纯栀子甙(来源:中国药品生物制品检定所 批号: 110749-200511)。
2.1 标准溶液的配制 精密称取13.25 mg栀子甙标准品置50 ml容量瓶中,用甲醇溶解,并用甲醇稀释至刻度。过滤,精密量取5 ml滤液,置25 ml容量瓶中,即得27.5 μg/ml的栀子甙标准品。
分别吸取栀子甙标准溶液0,1.0,2.0,3.0,4.0 ml于10 ml容量瓶中,加甲醇定容至10 ml,即得0,2.25,5.5,8.25,11.0 μg/ml的栀子甙系列标准溶液。
2.2 供试品的配制 精密称取21.0012 g无水蛋糕,放入250 ml的圆底烧瓶中,用100 ml石油醚加热回流30 min,放冷至室温。砂芯漏斗过滤,用石油醚洗涤残渣5次,洗液并入滤液中,减压浓缩石油醚提取液,残渣放入通风橱至无石油醚味。用甲醇提取3~5次,每次30 ml,直至提取液无栀子黄颜色,用砂芯漏斗过滤,滤液通过微孔滤膜过滤,滤液贮于冰箱备用。
2.3 含量测定 在实验条件下,分别注入栀子甙标准使用液0,4,8,12,16 μl,进行HPLC分析,然后以峰面积对栀子甙浓度作标准曲线。再注入5 μl供试品处理液,进行HPLC分析,取其峰面积与标准比较,测得样品中栀子甙含量。
本实验栀子甙的检测限为3.2 μg/ml,栀子黄色素浓度在0.15~0.25 g/kg范围内,回收率为 91.3%,相对标准差(RSD)%:1.6%。参考文献
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[2]谢凤霞,邱祖民,涂盛辉,谢心亮.吸附树脂AB-8精制栀子黄色素的工艺研究.南昌大学学报(工科版),2005,01.
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Determination limit of gardenia yellow in cake by HPLC
CHEN Yan-hua,YU Zhong-jun.Si ping Institute Food and Drug Control,Jilin 36000,China136000,China
Gardenia yellow Gardenia glucoside is the main component,and therefore Geniposide as the reference substance,gardenia yellow cake purified by extraction,as for the test materials,high-performance liquid chromatography in order to retain time for qualitative,peak area for quantitative determination.
HPLC;Gdenia yellow;Gdenia glycosides
136000吉林省四平市食品药品检验所