高效液相色谱法测定蛋糕中的栀子黄

陈艳华 于中军

高效液相色谱法测定蛋糕中的栀子黄

陈艳华 于中军

栀子甙是栀子黄的主要成分，因此以栀子甙为对照品，蛋糕中栀子黄经提取净化后，作为供试品，用高效液相色谱法测定，以保留时间定性，峰面积定量进行含量测定。

高效液相色谱法;栀子黄;栀子甙

栀子黄作为食品着色剂已经列入GB 2760-1996食品添加剂使用卫生标准，最大使用量每千克不得超过0.3 g，含量微小，故我们采用高效液相色谱法测量［1-6］，本方法精密度高，重现性好，灵敏，快速、准确且成本低可广泛使用。

1 实验仪器与试剂

1.1 仪器 岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪，高效液相色谱系统:Water’s M501泵，U6K进样器，岛津RF-535。配备全波长紫外检测器;小型粉碎机(FW100型北京中兴伟业仪器有限公司生产)，电热恒温水浴(HH·S型江苏省红旗医疗器械厂生产)高效液相色谱操作条件色谱柱:Agilent HC-C185 μ 4.6×250 mm;柱温30℃，紫外检测器 检测波长:240 nm;流动相:甲醇:水(35∶65);流速:0.8 ml/min试剂:甲醇，石油醚(60～90℃)，乙酸乙酯，三氯甲烷，以上试剂均为沈阳试剂五厂分析纯栀子甙(来源:中国药品生物制品检定所 批号: 110749-200511)。

2 实验步骤

2.1 标准溶液的配制 精密称取13.25 mg栀子甙标准品置50 ml容量瓶中，用甲醇溶解，并用甲醇稀释至刻度。过滤，精密量取5 ml滤液，置25 ml容量瓶中，即得27.5 μg/ml的栀子甙标准品。

分别吸取栀子甙标准溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0 ml于10 ml容量瓶中，加甲醇定容至10 ml，即得0，2.25，5.5，8.25，11.0 μg/ml的栀子甙系列标准溶液。

2.2 供试品的配制 精密称取21.0012 g无水蛋糕，放入250 ml的圆底烧瓶中，用100 ml石油醚加热回流30 min，放冷至室温。砂芯漏斗过滤，用石油醚洗涤残渣5次，洗液并入滤液中，减压浓缩石油醚提取液，残渣放入通风橱至无石油醚味。用甲醇提取3～5次，每次30 ml，直至提取液无栀子黄颜色，用砂芯漏斗过滤，滤液通过微孔滤膜过滤，滤液贮于冰箱备用。

2.3 含量测定 在实验条件下，分别注入栀子甙标准使用液0，4，8，12，16 μl，进行HPLC分析，然后以峰面积对栀子甙浓度作标准曲线。再注入5 μl供试品处理液，进行HPLC分析，取其峰面积与标准比较，测得样品中栀子甙含量。

3 实验结果

本实验栀子甙的检测限为3.2 μg/ml，栀子黄色素浓度在0.15～0.25 g/kg范围内，回收率为 91.3%，相对标准差(RSD)%:1.6%。参考文献

［1］沈荣光．山栀子中栀子苷、栀子黄色素的分离、纯化及栀子苷的结构鉴定．江南大学，2006．

［2］谢凤霞，邱祖民，涂盛辉，谢心亮．吸附树脂AB-8精制栀子黄色素的工艺研究．南昌大学学报(工科版)，2005，01．

［3］谢凤霞，邱祖民，涂盛辉，等．浸提法与超声波提取法提取栀子黄色素的比较．南昌大学学报(理科版)，2005，03．

［4］姚中铭．天然色素栀子黄提取、精制工艺及稳定性的研究．天津轻工业学院，2000．

［5］刘华钢，陈燕军，毛健．高效液相色谱法测定清火栀麦片中栀子苷的含量．中草药，1998，12．

［6］周飞，李霞，曹佩雪，等．HPLC法测定茵陈蒿汤颗粒液与合煎液中栀子甙含量．贵州科学，2002，03．

Determination limit of gardenia yellow in cake by HPLC

CHEN Yan-hua，YU Zhong-jun．Si ping Institute Food and Drug Control，Jilin 36000，China136000，China

Gardenia yellow Gardenia glucoside is the main component，and therefore Geniposide as the reference substance，gardenia yellow cake purified by extraction，as for the test materials，high-performance liquid chromatography in order to retain time for qualitative，peak area for quantitative determination．

HPLC;Gdenia yellow;Gdenia glycosides

136000吉林省四平市食品药品检验所