066100 北京军区北戴河疗养院 周敏 杨琪 潘涛
肾穿刺活检病理诊断是目前认为确诊肾脏疾病的唯一方法,特殊染色能直观地观察到肾小球、肾小管、肾间质及血管的病理变化。六胺银染色是观察肾小球基底膜的重要方法之一,我们通过微波技术对肾小球基底膜进行六胺银染色改进,获得了比传统染色方法更好的效果,现报告如下。
1.1 材料 选择北京军区北戴河疗养院肾穿刺标本100例。
1.2 试剂与设备 3%六次甲基四胺水溶液200 mL,加入5%硝酸银水溶液10 mL,与5%硼酸水溶液10 mL相混合,试剂现用现配。医用微波炉1台。
1.3 染色方法 ①石蜡切片2 μm,常规脱蜡至水。②1%过碘酸氧化10~15 min,蒸馏水洗2 min×3次。③入塑料修复盒六胺银工作液中,放入微波炉内,取中高档位辐射5 min。④自来水洗2 min×3次。⑤0.2%氯化金调色,镜下观察到棕色变为棕黑色。⑥自来水洗2 min×3次。⑦入Masson液套染15 min。⑧1%冰醋酸分化1 min。⑨自然晾干,中性树胶封固。
肾小球基底膜呈棕黑色,弹力纤维黑色,细胞质红色,免疫复合物呈红色,胶原纤维和细胞间质呈绿色,切片组织结构清晰。
微波是一种特殊的电磁波,能提高分子运动速度,从而加快和促进染液中银与组织的结合,形成稳定的络合物。用传统方法六胺银染色需在60℃烤箱水浴60 min左右,染色温度不好掌握,切片常染色浅或过染,应用微波(光波)技术对肾小球进行六胺银染色只需5 min,大大缩短了染色时间,且着色均匀,结构清晰,具有快速、敏感、简单等优点,值得推广应用。