周广生 江苏畜牧兽医职业技术学院,江苏泰州 225300
新城疫(ND)作为禽类重要疫病之一,从发现至今已有80多年的历程,给养殖业带来不可估量的经济损失,因而人们对ND的预防、控制、扑灭采取了大量的措施,但其仍然给集约化养殖带来威助。鸡新城疫发病后,抗生素、磺胺类药物无治疗作用。为了探讨中药抗鸡新城疫病毒的作用,我们依据中兽医的辩证施治理论,对中药进行筛选,选出了以贯叶连翘、香薷两味中药的方剂,进行抗鸡新城疫病毒的体外实验。
1.1.1 试验鸡胚:10日龄非免鸡胚,购自南京药械厂。
1.1.2 鸡新城疫毒株:由江苏畜牧兽医职业技术学院预防兽医教研室提供,鸡胚尿囊液的HA效价为8log2。
1.1.3 药品:中药复方制剂由贯叶连翘、香薷组成,制成含生药2g/ml的口服液,所用中药购自泰州仁济中药饮片有限公司;金刚烷胺,由江苏倍康药业公司提供,配成0.2mg/ml浓度,灭菌后备用。
具体分组情况见表1。
表1 实验分组情况
1.3.1 测定半数致死量:将尿囊液稀释不同倍数,接种非免鸡胚,得出胚胎半数致死量。经过测定,尿囊液半数致死量的稀释度为1:1000,正式试验的接种稀释度用1:500的尿囊液。
1.3.2 药物毒性试验:将中药原药液用生理盐水作倍比稀释,将原药液及不同浓度的药液分别接种于4枚10日龄鸡胚的尿囊腔中,每只0.2m L,置37℃恒温箱孵育72小时,每天观察存活情况,鸡胚全部存活的最高药物浓度为正式试验的起始浓度。同时设生理盐水对照组。
1.3.3 中药复方口服液对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用测定:按1.3.1尿囊液的稀释度和表2的药物浓度做为接种的依据。
1.3.3.1 中药组:每个鸡胚尿囊腔同时接种中药0.2m L,病毒稀释液 0.1m L。
1.3.3.2 西药组:每个鸡胚尿囊腔同时接西药0.2m L,病毒稀释液0.1m L。
1.3.3.3 生理盐水对照组:每个鸡胚尿囊腔同时接种生理盐水0.2m L,病毒稀释液0.1m L。
上述鸡胚在37℃恒温箱中孵育,每天照蛋2~3次,弃去24小时内死胚。收取72小时内活胚和24~72小时死胚尿囊液,低温保存备用。以血凝(HA)试验检测每组鸡胚尿囊液的病毒滴度。
2.1 药物毒性实验:经过2次重复试验,中药复方制剂的原药液及其不同稀释度均对鸡胚无明显致死作用。其存活情况见表2。故用原液浓度为正式试验的起始浓度。
表2 药物对鸡胚毒性实验结果(n=4)
2.2 中药复方制剂对鸡新城疫病毒增殖的影响,结果见表3。
表3 中药复方制剂对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用测定结果
3.1 鸡新城疫是由新城疫病毒感染引起的传染病,由于疫苗的广泛应用,使该病多以慢性或散发为特点。鸡新城疫发病以后,目前还无有效疗法。用中药治疗畜禽病毒性疾病,已有很多成功经验,本试验就是为临床治疗鸡新城疫提供理论依据。
3.2 中药复方制剂能明显抑制鸡新城疫病毒增殖,降低鸡胚死亡率。分析中药配方的作用,贯叶连翘具有抗抑郁、抗病毒、镇痛等作用。香薷具有发汗解表,利水消肿的作用。中药复方制剂的效果明显高于金刚烷胺。
3.3 本试验对中药复方制剂在鸡胚内抗鸡新城疫病毒的效果进行了观察,在动物上的效果如何以及作用机理有待进一步的试验研究。
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