王晶娟,张贵君,杨 舒
(北京中医药大学中药学院中药鉴定教研室,北京 100102)
变应性鼻炎(AR)属中医学“鼻鼽”范畴,鼻康喷雾剂是由山豆根等中药组方而成,具有清热化湿,宣肺解表,芳香开窍等功效,主要用于治疗AR。从现代药理来看,鼻康喷雾剂具有抗炎、抗过敏和免疫调节作用。本实验从小鼠耳廓二甲苯致炎的影响、对大鼠蛋清足跖肿胀的影响和对大鼠棉球肉芽肿的影响3个经典模型探讨鼻康喷雾剂的抗炎作用。
1.1 实验动物 ICR品系小鼠,体质量18~22 g,动物许可证编号:陕医动证字08-004号,SD品系大鼠,体质量120~180 g,动物许可证编号:陕医动证字08-005号。
以上动物购买后在实验室适应性饲养2 d后用于正式实验。条件:清洁级,室温:22~25℃,相对湿度:65%,12 h明暗交替照明,自由进食、饮水。
1.2 药物与试剂 鼻康喷雾剂,规格:10 mL/瓶,(北京宏泰康达医药科技有限公司);醋酸泼尼松片,规格:5 mg/片,(浙江仙琚制药有限公司,批号:051186);0.9%氯化钠注射液,规格:500 mL/瓶,(陕西华山制药有限公司,批号:05101201);二甲苯(化学纯),规格:500mL/瓶,(西安化学试剂厂,批号:840613)。
2.1 鼻康喷雾剂对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响
2.1.1 分组与给药 ICR品系小鼠50只,雌雄各半,体质量18~22g,随机分为5组,每组10只。第1组为空白对照组,给等容量生理盐水;第2组为阳性对照组,予醋酸泼尼松片0.005 g/kg;第3组为小剂量组,鼻康喷雾剂0.35 g/kg;第4组为中剂量组,予鼻康喷雾剂0.70 g/kg;第 5组为大剂量组,予鼻康喷雾剂1.4 g/kg。灌胃给药,1次/d,连续3 d。
2.1.2 指标测定 末次给药后1 h,各组小鼠右耳涂抹二甲苯0.05 mL/只,左耳作对照,15 min后处死动物,用直径8 mm的打孔器将双耳同部位等面积切下,分别称重,以左、右耳片质量之差为肿胀度,比较各组肿胀度的差异。数据以均数±标准差(x±s)表示,用组间t检验对数据进行统计分析[1]。
2.2 鼻康喷雾剂对大鼠蛋清足跖肿胀的影响
2.2.1 分组与给药 SD大鼠50只,雌雄各半,体质量120~180 g,随机分为5组,每组10只。第1组为空白对照组,给等容量生理盐水;第2组为阳性对照组,醋酸泼尼松片0.005 g/kg;第3组为小剂量组,鼻康喷雾剂0.25 g/kg;第4组为中剂量组,鼻康喷雾剂0.5 g/kg;第5组为大剂量组,鼻康喷雾剂1.0 g/kg。灌胃给药,1次/d,连续3 d。
2.2.2 指标测定 末次给药后1 h,各组动物右后足跖皮下注射100%蛋清0.05 mL/只,分别测定致炎前和致炎后1、2、4、6 h右后足跖容积。以致炎前后容积之差值作为肿胀度,比较各组肿胀度的差异。数据以均数±标准差(x±s)表示,用组间t检验对数据进行统计分析[2]。
2.3 鼻康喷雾剂对大鼠棉球肉芽肿的影响
2.3.1 分组与给药 分组方法和给药剂量同2.2.1。灌胃给药,1次/d,连续7 d。
2.3.2 指标测定 给药前各组大鼠乙醚麻醉,无菌条件下分别于左右大腿根部皮下植入50 mg灭菌棉球,术后当日开始灌胃给药,1次/d,连续7 d。第8天处死大鼠,将棉球连同周围结缔组织一起取出,剔除脂肪组织,放入烘箱70℃烘干,称质量。将称得的质量减去棉球原质量既得肉芽肿质量,比较各组肉芽肿质量,数据以均数±标准差(x±s)表示,正态分布资料组间比较采用单因素方差分析,偏态资料组间比较采用秩和检验。
3.1 鼻康喷雾剂对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响 实验结果见表1。鼻康喷雾剂大、中、小剂量组小鼠耳廓肿胀度与空白对照组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。实验结果表明,鼻康喷雾剂可明显减轻小鼠耳廓肿胀度。
表1 鼻康喷雾剂对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响 (±s)Tab.1 The effect of NHSA on the auricular swelling in mice(±s)
表1 鼻康喷雾剂对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响 (±s)Tab.1 The effect of NHSA on the auricular swelling in mice(±s)
注:与空白对照组比较:*P<0.05,**P<0.01。
组别空白对照组阳性对照组大剂量组中剂量组小剂量组剂量20 mL/kg 0.005 g/kg 1.40 g/kg 0.70 g/kg 0.35 g/kg n 1010101010肿胀度(mg)12.05±1.524.06±1.08**3.42±3.32**5.95±2.04**10.30±1.75*
3.2 鼻康喷雾剂对大鼠蛋清足跖肿胀的影响 实验结果见表2。鼻康喷雾剂大、中、小剂量组在致炎后2 h大鼠右后足跖肿胀度明显减小,4~6 h时作用最为明显,与空白对照组比较有统计学意义 (P<0.05 或 P<0.01)。实验结果表明,鼻康喷雾剂可减轻蛋清所致的大鼠右后足跖肿胀度。
3.3 鼻康喷雾剂对大鼠棉球肉芽肿的影响 实验结果见表3。鼻康喷雾剂大、中、小剂量组大鼠肉芽肿质量与空白对照组比较明显减小(P<0.05)。实验结果表明,鼻康喷雾剂对大鼠棉球肉芽组织增生有抑制作用。
表2 鼻康喷雾剂对大鼠蛋清足跖肿胀的影响(±s)Tab.2 The effect of NHSA on rat paw edema(±s)mL
表2 鼻康喷雾剂对大鼠蛋清足跖肿胀的影响(±s)Tab.2 The effect of NHSA on rat paw edema(±s)mL
注:与空白对照组相比较:*P<0.05,**P<0.010。
组别 n剂量 致炎后右后足跖肿胀度差值空白对照组阳性对照组大剂量组中剂量组小剂量组10 mL/kg 0.005 g/kg 1.0 g/kg 0.5 g/kg 0.25 g/kg 1010101010致炎前(mL)1.32±0.121.36±0.091.43±0.131.41±0.101.38±0.161 h 0.99±0.220.91±0.340.89±0.241.01±0.191.12±0.232 h 1.10±0.290.94±0.350.75±0.19*0.77±0.18*0.91±0.204 h 1.04±0.260.71±0.31**0.66±0.22**0.72±0.17**0.78±0.20**6 h 0.80±0.200.40±0.16**0.45±0.13**0.50±0.21**0.65±0.23
表3 鼻康喷雾剂对大鼠棉球肉芽肿的影响(±s)Tab.3 The effect of NHSA on Cotton Ball Granuloma in rats(±s)
表3 鼻康喷雾剂对大鼠棉球肉芽肿的影响(±s)Tab.3 The effect of NHSA on Cotton Ball Granuloma in rats(±s)
注:与空白对照组相比较:*P<0.05。
组别空白对照组阳性对照组大剂量组中剂量组小剂量组剂量10mL/kg 0.005 g/kg 1.0 g/kg 0.5 g/kg 0.25 g/kg n 1010101010肉芽肿质量(mg/100g体质量)224.99±83.09136.74±46.61*144.61±25.82*163.78±21.49*210.42±69.60
小鼠耳廓二甲苯致炎、大鼠蛋清足跖肿胀、大鼠棉球肉芽肿的动物模型为经典的炎症模型,也是药物抗炎作用最基本的评价方法。本实验结果得出鼻康喷雾剂能够减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀度、减轻蛋清所致的大鼠右后足跖肿胀度、对大鼠棉球肉芽组织增生有抑制作用,充分说明其具有抗炎的作用。
[1] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2003:911-914.
[2] 陈 奇.中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1994:71-310.