骨乐宁胶囊早期促进骨折愈合作用的临床研究*

任守平，金鸿宾

（1.天津中医药大学附属北辰中医院骨伤科，天津 300400；2.天津医院，天津 300211）

中药治疗骨折历史悠久，积累了丰富的经验，尤其近年来随着基础学科的发展，使中药促进骨折愈合的研究上升到一个新的层次[1-3]。目前用于临床治疗骨折的中药多以活血化瘀立法施治，从中医辨证施治的角度分析，存在着一定的片面性。笔者拟定了益气养血为主、活血化瘀为辅的“骨乐宁胶囊”，初步应用于临床取得了满意的治疗效果。

1 材料与方法

1.1 病例选择 选择条件：外伤性、新鲜（24 h内）、经X线摄片确诊属单纯四肢长干骨骨折的住院患者。排除条件：年龄在13～65岁以外者；多发性骨折或有合并伤者；病理性骨折，孕产妇，患有其他如消化、代谢性疾病或肝肾功能检查有异常指征的患者。

选取符合上述条件患者48例，但因再次手术、转科及未能随诊等原因有6例脱失，统计结果计42例。其中男31例，女11例；年龄14～65岁，平均（31.2±4.3）岁。骨乐宁胶囊组（A组）23例、骨折挫伤胶囊组（B组）19例。骨折部位分布为：胫腓骨骨折（28例，占66.7%）、肱骨髁上骨折（4例）、尺桡骨远端骨折（4例）、股骨上段骨折（3例）、肱骨干骨折（3例）。

1.2 药物组方 骨乐宁胶囊：当归、黄芪、熟地黄、白芍、川芎、柴胡、赤芍等组成。由天津中医药大学附属北辰中医院制剂科制成胶囊剂型，每粒合生药0.3 g。骨折挫伤胶囊：哈尔滨华雨制药有限公司生产中成药，批号ZZ-5434-黑卫药准字（1989）第300127号。主要成分有：红花、大黄、当归、乳香、没药、血竭、地鳖虫、自然铜等。每粒含生药0.29 g。

1.3 治疗方法 首先对骨折行手法整复或C型臂机下闭合复位，以石膏、小夹板或外固定架固定。投币法随机分为两组，自入院当日起A组口服骨乐宁胶囊（5粒/次，3次/d，口服）；B组服骨折挫伤胶囊（5粒/次，3次/d，口服）。有开放伤口或固定钉孔者，适当给予抗生素预防感染治疗。

1.4 检测项目 分别于入院次日（1 d）、7、14、2、28 d抽取晨起空腹外周静脉血5 mL。3 mL用全自动生化分析仪测定血清钙、磷浓度；另2 mL以100 r/min离心取上清血清于-20℃恒温保存以待同批次检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）、骨源性碱性磷酸酶（BAP）；入院次日（骨折整复后，1 d）、7、14、28、42、56 d时X线照片。并严密观察患者服药后的反应和伤肢肿痛等症状体征的变化。

1.5 主要仪器设备 全自动生化分析仪（日本，东芝TBA－40FR），酶标仪及洗板机（中国台湾，Biorad 2550），VEGF人用ELISA法试剂盒（购自武汉博士德生物公司），BAP试剂盒（北京中生生物公司），X光机（GE-VR，500 mA）。

1.6 统计学处理 各组数据用SPSS13.0进行统计分析，采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用两独立t检验。

2 结果

2.1 一般情况的变化 服药3 d后：A组自述疼痛改善19例（占本组的82.6%，下同），肿胀减轻11例（47.8%）；B组疼痛改善16例（84.2%），肿胀减轻8例（42.1%）。治疗过程中A组患者服药后均未见不良反应，而B组有1例出现鼻衄（5.3%）。

本组患者治疗至56 d时，骨折部位均无特殊不适，X线片示断端间有连续性骨痂生成，部分病倒骨折线模糊，已达到或接近临床愈合标准，未见骨折延迟愈合或不愈合现象发生。

2.2 VEGF 水平变化 取第 1、7、14、21、28 天时采集的外周静脉血清，复温，严格按照人VEGF试剂盒说明操作，酶标仪450 nm处测取OD值，绘制标准曲线图，计算出VEGF浓度，结果见图1。

从图中可以看出A组在第7天时即高于B组，峰值期间明显高于对照组（P＜0.01），有极显著差异，并有持续高于B组的倾向。另外，也反映出伤后2～3周是VEGF表达的高峰期，这与用逆转录-聚（RT-PCR）法检测实验性骨折不同时期骨痂中VEGF表达的研究结果是一致的[4-5]，说明外周血中VEGF水平与其在骨折局部的合成与释放为同步性增减。

2.3 血清骨源性碱性磷酸酶 外周静脉血清复温，按照人BAP试剂盒说明操作与计算，结果见表1。入院后1、7 d时测定BAP均属值正常，无明显差异，但第21天后两组间有差异性（P＜0.05），以28 d时最为显著（P＜0.01）。

2.4 血清钙、磷离子浓度乘积 治疗后两组患者血清钙磷离子乘积有所降低（见图2），但两组间无显著差异。

2.5 X线片骨痂生长情况 参照上海骨科研究所X线片评价方法对骨痂生长情况进行评分：无骨痂生成计0分；少量骨痂生长，骨折线清晰者为1分；断端间连续性骨痂形成，骨折线折模糊者计2分，较多连续性骨痂生成，骨折线基本消失者计3分。两组在前两周因均无骨痂生成，治疗至56 d时的评分经统计学处理见表2，从表中可以看出两组骨痂生长情况在28 d后出现显著差异，同时期A组骨痂质量明显高于B组。

表1 血清BAP浓度检测结果(±s)Tab.1 The test results of serum BAP(±s)U/L

表1 血清BAP浓度检测结果(±s)Tab.1 The test results of serum BAP(±s)U/L

注：与 B 组比较，*P＜0.05，**P＜0.01 。

组别A组B组n 2319第1天64.40±5.2369.72±7.01第7天79.18±9.3574.12±4.12第14天76.89±11.4481.63±10.74组别A组B组n 2319第21天115.54±13.10*88.73±9.17第28天124.64±11.06**101.48±12.41第56天87.82±7.2691.80±12.47

表2 X线片骨痂生长评分(±s)Tab.2 The X-ray scores of the callus(±s)分

表2 X线片骨痂生长评分(±s)Tab.2 The X-ray scores of the callus(±s)分

注：与 B 组比较，*P＜0.05，**P＜0.01 。

组别A组B组n 2319第14天0.68±0.270.52±0.18第28天1.52±0.17*1.04±0.22第42天2.62±0.38**1.14±0.26第56天2.97±0.35*2.15±0.09

3 讨论

3.1 骨乐宁胶囊的立法组方 肢体外受跌仆打击，皮肉筋骨首当其冲。但气血循行于周身，外而营养皮肉筋骨，内而灌溉五脏六腑，故皮肉筋骨受伤的同时，必然伤及气血，外而为肿为痛，内而脏腑功能失调。气滞血瘀所致的伤处肿痛实乃外伤之标，而气血脏腑功能失和才是伤病之本。所以，治疗需气血标本兼顾，益气养血为主，活血化瘀为辅。骨乐宁胶囊立方旨在益气养血、活血止痛。方中用黄芪补气，以资生化之源，当归辛甘温润，既补血养血，又能与白芍共同柔肝益阴，活血止痛；熟地黄、白芍滋阴养血，和营养肝；佐以“血中气药”之川芎调理气血，柴胡协川芎升清降浊，宣畅气机，以助推陈致新之功，并能防熟地黄之滋腻；酌用赤芍、桃红活血化瘀通络止痛。诸药合用补中有通，补而不腻，使气血调达、生化有源，从而达到瘀去新生，促进骨折愈合的目的。本组患者服用骨乐宁胶囊后未见有不良反应，而对骨代谢生化指标有正向调节作用，治疗至56 d时，骨折均已达到或接近临床愈合标准，证明了其立法组方的合理性与有效性。

3.2 骨乐宁胶囊对骨代谢生化及VEGF的调节作用 骨折的修复与重建离不开血管的再生，血管的再生在很大程度上决定着骨折愈合的速度与效果。VEGF是机体内促进血管内皮生长最具特异性的生长因子，它能与血管内皮细胞膜上的特异性受体结合，产生促血管内皮细胞分裂、增殖及诱导血管生成的作用[5-6]。从上述检测结果可以看出，骨乐宁胶囊治疗组较单纯活血化瘀组患者血清VEGF含量要高，表明骨乐宁胶囊对VEGF的合成与释放有一定的促进作用。在VEGF的作用下骨折断端间血管的早期形成，有利于营养物质的输送和代谢废物的清除，也为其他细胞因子作用的发挥提供了基础，从而促进的骨折愈合。

一般认为BAP能分解有机磷酸化合物，产生无机磷酸根离子促使它与钙离子结合，形成羟磷灰石而沉积于骨组织；或分解焦磷酸盐，解除其对骨组织钙化的抑制作用，使骨盐沉积，钙化得以进行。钙、磷是骨骼矿物质的主要成分，血清中钙磷离子主要由骨骼系统调节。本组病例在治疗后外周血清钙磷离子乘积有所下降，对于一个平素消化吸收功能正常又无其他代谢性疾病的骨折患者来说，有可能是由于骨痂的生长代谢利用，钙磷离子沉积过快所致，提示临床在骨折愈合早期应及时补充调整。所以，本组病例中血清钙、磷离子乘积的下降和BAP的升高，说明在骨乐宁胶囊的作用下成骨细胞活性增强，骨痂中盐沉积加快，骨痂质量改善的表现，这一点在X线片上也得到了很好的印证。治疗28 d时，骨乐宁组骨痂评分高于活血化瘀组，提示骨折愈合时间缩短。

总之，研究结果反映出骨乐宁胶囊能提高骨折愈合早期成骨细胞的活性，促进VEGF及BAP的合成与释放而有利于骨折损伤部位血管再生重建和骨矿沉积。同时，血管的再生为营养物质的输送的代谢产物的清除提供了前提，有利于骨折早期血肿的吸收，加快软骨内骨化进程，从而促进骨折的愈合。

[1] 董福慧,金宗濂,郑 军,等.四种中药对骨折愈合过程中相关基因表达的影响[J].中国骨伤,2006,19(10):595-597.

[2] 许碧莲,吴 铁,张新乐,等.复方丹参促进家兔骨折愈合的骨组织形态计量学评估[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,37(12):7211-7214.

[3] 王 轩,李引刚.桃仁、木香、黄芪分别与红花配伍对大鼠早期桡骨骨折愈合及VEGF表达的影响[J].山西中医学院学报,2009,10(3):18-20.

[4] 张 俐,叶俊材.活血化瘀汤对骨折早期血管内皮细胞因子活性的影响[J].中国临床康复,2001,23(8):4798-4799.

[5] 初同伟,王正国,朱佩芳,等.血管内皮生长因子在骨折愈合中的作用[J].中国修复重建外科杂志,2002,l6(2):75-77.

[6] Toleman MA,Simm AM,Murphy TA,et al.Molecular characterization lf SPM-1.a novel metallo-β lactamase isolated in Latin America:report from the SENTRY antimicrobial surveillance program[J].Antimicrob Agents Chemother,2002,50:673-675.