湖南郴州地区年轻女性宫颈炎症患者的病原学研究

曹艳华 谭红专 杨志英 阳帆 李勇

宫颈炎是女性生殖道的常见疾病，可由多种病原体引起，如沙眼衣原体(Ct)、奈瑟淋球菌(NG)、单纯疱疹病毒(HSV)、人乳头瘤病毒(HPV)、生殖支原体(Mg)、解脲脲原体(Uu)及厌氧菌、真菌等[1-2]。随着性传播疾病(STD)发病率的增多，由此引起的宫颈炎也逐渐增多。湖南省郴州地区是我省性传播疾病的高发区，流动人口多，旅游、娱乐行业发达，在中低档娱乐场所及性工作者中安全套推广项目尚未普及。为此，本文对郴州市第一人民医院2007年11月～2010年4月门诊患者的184份阴道分泌物样本的检查结果进行回顾性分析，旨在了解郴州地区女性宫颈炎的病原学情况，为临床用药及疾病监测提供一定依据。

1 材料和方法

1.1 材料 酵母提取液、琼脂购自英国Oxoid公司，Uu、Mh、NG培养基购自珠海丽珠试剂有限公司，哥伦比亚琼脂为生物梅里埃中国有限公司产品。DNA提取试剂盒、Taq DNA聚合酶分别购自上海生工和TaKaRa公司。Mg、Ct、HPV和HSV-2分别来自东南大学公共卫生学院、中国预防科学院皮肤性病研究所、中国疾病预防控制中心和南京皮肤性病研究所。其他均为分析纯产品，主要购自上海生物工程公司和北京鼎国公司。

1.2 研究对象 随机选取184例于2007年11月～2010年4月在普通妇科门诊及妇女保健门诊就诊的女性为研究对象，研究对象选择标准：所有对象均有性生活史(包括非婚性接触史)，在两周内未使用过任何抗生素，取样3d内没有阴道冲洗，无阴道用药及性生活，排除经期女性。同时随机选取该时间段在门诊进行健康检查和孕前检查的女性128名，年龄20～40岁，平均27.56岁。

1.3 宫颈炎诊断标准 所有入选对象的诊断标准符合《实用妇产科学》的诊断标准[3]。

1.4 实验室检测 用无菌窥阴器扩张阴道，用宫颈试子于穹窿部停留1min，将取样后的棉拭子放入盛有lml无菌生理盐水的尖底无菌试管中漂洗片刻，在管壁上挤干后丢弃拭子，用于分离培养或分子生物学检测用。按照上海生工试剂盒提供的方法提取基因组DNA，设计针对Mg，Ct，HSV和HPV的特异性引物，PCR扩增。每次实验应用已知阳性的标准株作对照。尤其是在PCR反应时，对于阴性标本，会再次加入标准品DNA，一同扩增，以排除标本里抑制物的存在。

2 结果

2.1 研究对象基本情况 随机所选的184例研究对象，年龄18～39岁，病程：2～648d，平均58d。其中有尿道刺激症状、阴道口灼痛、白带增多、下腹痛的共138例，无上述症状16例，宫颈脆性增加易出血和(或)宫颈不同程度糜烂116例。

2.2 各种病原体感染状况 在所研究的184例初步诊断为宫颈炎的研究组中，共检测出157例阳性，检出率为85.33%。而在同期128例体检对照组当中，仅检测出39例，检出率为30.4%。宫颈炎组和对照组的病原体感染情况见表1。

表1 宫颈炎患者及对照组体内各种病原体的检出情况

表2 157例阳性标本中病原体混合感染情况(%)

2.3 混合感染情况 如表2所示，研究组所检出的157例患者中，其中有2种或2种以上病原体混合感染的患者有26例，占14.13%，其中15例为2种病原体混合感染，主要是Uu、Ct、NG、Mg、HSV和HPV间的混合感染，并且以Uu合并Ct和Uu合并Mg感染最多见。

3 讨论

宫颈炎从病因学上可分为感染性宫颈炎和非感染性宫颈炎，感染性宫颈炎主要由外源性病原体感染所致，如细菌、真菌、病毒、支原体和衣原体等[1]。本研究结果显示在184例宫颈炎患者中，检出病原体157例，以Uu的阳性检出率最高，其次为Ct、Mg、NG、Mh、HSV-2和HPV，分别占23.27%、8.7%、7.61%、5.43%、4.35%和4.35%。本研究从病原学上证实了在宫颈炎患者中不仅存在Ct、NG感染，而且还存在其他病原体感染。但Uu的检出率与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，说明Uu可能与宫颈炎的发病无关，因为有研究对生殖道感染的女性进行PCR检测，Uu的检出率为70%，其中微小脲原体占80%以上，显示Uu的致病性可能与其基因型有一定联系，同时也间接说明本地区Uu的感染率可能低于国外其他地区[4]。另外，一些研究资料显示，Mg、HSV-2、HPV等与宫颈炎相关，我们的研究结果与此相符[5]。本研究PCR对Mg基因检测，检出率为8.7%，略高于国外报道[6]。分析其原因，主要有：①技术因素，如PCR抑制物的存在及引物的选择等而导致实验敏感性不同。②采样方法：很多文献采样部位大多数为宫颈口，认为支原体一般寄生于宫颈上皮细胞。但Mg在pH=7或稍酸或稍碱时生长良好。因此我们认为对女性进行Mg感染的检测可选择阴道弯窿部采集标本，而不一定要取材于宫颈上皮细胞。阴道弯隆部是上、下生殖道的联接部分，因此无论是上生殖道还是下生殖道的支原体感染都比较容易在该部位的标本中检测到，另外阴道弯隆部本身呈现弱酸性，也有利于支原体的寄生。③本地区Mg感染引起宫颈炎的比例呈上升趋势。事实上，在本研究当中，我们对于阴性结果进行了排除，凡是阳性结果我们都在不同时间重复了2次。因此本研究当中我们认为第3种可能性最大，应引起临床医师高度重视。同时，HSV-2和HPV的检出率均为4.35%，与世界其他地区相比较低，这可能与不同地域及生活方式有关[7]。因此，临床上应重点关注宫颈炎的无症状患者，这对于防止宫颈癌及癌前病变的发生有重要意义。另外不应遗漏其宫颈的检查，如宫颈涂片细胞学检查，并视情况行阴道镜检查及阴道镜指引下的病理活检。

综上所述，Ct、Mg以及NG是引起宫颈炎的重要病原体，事实上，宫颈炎患者体内存在的Uu、Mg、HSV-2和HPV单独或混合感染也是一个不可忽视的病因之一。在184例拟诊的宫颈炎患者中各种病原体感染157例，其中单项病原体感染131例(71.2%)、混合病原体感染26例(14.13%)。1例宫颈炎患者可同时感染两种或两种以上性病病原体，在混合感染中以Uu合并Ct最高，占34.62%，其次是Uu和Mg，占26.92%。因此在临床上若部分患者久治不愈，且无新发感染，应考虑混合的可能。多种病原体反复感染导致黏膜上皮细胞损伤，大大增加了其他病原体感染的可能性。

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