P120 catenin和E-Cadherin联合标记对乳腺小叶肿瘤性病变的诊断意义

刘玲莉，旷乐辉

（湖南师范大学附属湘东医院，湖南 醴陵412200）

随着人们生活水平的提高、健康意识的增强，我们外检中遇到的乳腺标本越来越多，一般情况下都是比较好诊断的，尤其在区分经典的小叶性病变和导管性病变，但有时也很困难，并有相当大的主观性，如已发表的研究资料已证实的那样，浸润性小叶癌(invasive lobular cancinoma ILC)的发生率变动范围为0.7%～20%[1]。临床上我们常用E-Cadherin作为鉴别两者的辅助指标，但仅用E-Cadherin，少数病例结果并不理想[2]，P120是连环蛋白家族的新成员 与E-Cadherin有着密切的关系，所以我们尝试了应用P120 catenin和 E-Cadherin联合进行免疫组化标记，以期对小叶和导管肿瘤有更客观准确的诊断。

1 材料与方法

1.1 材料 收集我院2008年1月～2009年12月间乳腺肿瘤标本64例作为研究对象，其中浸润性导管癌(IDC)53例，浸润性小叶癌(ILC)3例，导管原位癌(DCIS)3例，小叶原位癌 (LCIS)1例，导管不典型增生(ADH)3例，小叶不典型增生(ALH)1例，另选10例正常乳腺组织作为对照。

1.2 方法 所有组织均经福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋切片，HE染色，免疫组化采用SP法染色，DAB显色，试剂P120和E-Cadherin均由福州迈新生物技术开发有限公司提供。

1.3 结果判断 P120表达胞膜棕黄色颗粒为阳性，棕黄色颗粒沉积于胞浆内为异位表达，E-Cadherin表达胞膜棕黄色颗粒为阳性。将阳性细胞按数量和强度分为4级，染色强度与背景无明显差别为(-)，阳性细胞数≤10%，染色强度大部分较弱为 (+)：＞50%，染色强度为中至强染色者为(+++)，介于两者之间为(++)。

1.4 统计学分析 采用SPSS10.0软件，Spearman等级资料的相关性分析。

2 结果

2.1 P120 catenin 在正常乳腺、DCIS、IDC中，P120 catenin表达连续性的胞膜交界处阳性，胞浆少许阳性(图1)。在LDIS和ILC却出现异位表达表达，大量细胞出现胞浆阳性(图2)。P120 catenin在正常乳腺与导管病变的表达无差异性，而在小叶肿瘤性病变中的异位表达与导管病变的表达差异极为显著(P＜0.01)。

2.2 E-Cadherin E-Cadherin表达定位于胞膜，正常乳腺、DCIS、IDC表达连续性胞膜棕黄色，LCIS、ILC表达较弱甚至不表达(图3)。E-Cadherin在正常乳腺与导管病变的表达无差异性，而在小叶肿瘤和导管肿瘤中的表达也极具差异性（P＜0.01)。

图1.P120 catenin浸润性导管癌细胞膜阳性

图2..P120catenin小叶原位癌显示明显的胞浆阳性

图3.E-Cadherin小叶原位癌瘤细胞不表达

2.3 P120 cateni和E-Cadherin异常表达的相关性

结果显示，P120 catenin E-Cadherin的异常表达呈正相关性，即P120 catenin正常表达越强 ECadherin表达也越强，而P120 catenin正常表达越弱，异常表达越强，E-Cadherin表达也越弱。

2.4 经免疫组化标记 在原诊断的5例DCIS中发现1例为LCIS，在原诊断的54例IDC中重新诊断了1例ILC，2例混合性导管-小叶癌。显然小叶性肿瘤的诊断明显偏低，对病人的治疗和愈后有一定的影响。前后两次诊断的两次诊断的结果见表1。

表1 经免疫组化标记后，前后两次诊断的比较

3 讨论

P120 catenin是连环蛋白家族的新成员，位于细胞膜旁的胞浆内，参与细胞粘附和细胞内信号传导；E-Cadherin是介导细胞间粘连作用的跨膜糖蛋白，位于细胞膜；一旦其功能丧失可引起细胞-细胞连接的破坏。P120 catenin能直接与E-Cadherin结合形成连环蛋白-钙粘连蛋白复合体 (catenin cadherin complex,CCC)。CCC中任何一个分子表达异常都可能反映其正常结构和(或)功能受到破坏并导致细胞恶性转化[3]。正常情况下,P120 catenin表达于乳腺上皮的胞膜，只有在小叶肿瘤时却异位表达于胞浆。其生物学机制可能为：当小叶腺泡上皮瘤变时，E-Cadherin的部分或完全性丢失使得CCC的形成减少甚至消失，导致P120 catenin在胞浆内聚集[3]。小叶癌和导管癌有着明显不同的临床特征及愈后，前者多中心性比例高，对侧发生的机率也高[4]，肿瘤的边界较难界定，淋巴结转移较少，约3%～10%，发生腹膜、腹膜后、脑膜、胃肠道、女性生殖器官转移的几率较高，肺和胸膜累及的几率较低。且ALH和LCIS发展发展为双向乳癌的风险是正常人的7～10倍，临床治疗和预后与导管原位癌不同，所以，作出正确的诊断是非常重要的。双向乳癌的风险是正常人的7-10倍，临床治疗和愈后与导管原位癌不同，所以作出正确诊断是非常重要的。镜下经典型ILC瘤细胞小而较一致，成列兵样、靶环状、单个散在浸润在间质纤维组织中，并且还有腺泡型、实性型、多形型三个亚型。其形态特点的多样性，无疑给我们的诊断带来了一定的困难。结合实验我们发现一些比较容易误诊的情况：①在不典型增生和原位癌，细胞并不一定很经典，都是管腔内上皮的实性或筛状增生，并且周围常有增生的导管，这时就很容易主观性地诊断为导管病变；②多形性ILC细胞大而异形性明显，同时纤维间质高度增生，排列也不一定是列兵状或靶环状，形态学上很难与IDC鉴别；③在典型的IDC中有些区域细胞比较小，散在排列，我们常把它误认为是分化比较差的区域；而遗漏了混合有小叶癌的可能。④IDC的周围常可见小叶原位癌样结构，究竟是导管小叶癌化还是合并小叶原位癌，有时很难断定，这些情况下，通过P120 catenin和E-Cadherin联合标记一般都给我们很大的帮助；即LCIS、ALH和ILC会出现E-Cadherin表达减弱或消失，P120 catenin出现异位的浆阳性。当然有时候也并不是我们想象的那么美好，在我们的实验中还发现两例形态上似小叶源性肿瘤，但ECadherin仍有一定程度的表达，而P120 catenin以浆阳性为主，综合考虑，最终还是诊断小叶性肿瘤，故本人认为P120 catenin和E-Cadherin的联合应用对于小叶肿瘤性病变很有帮助.比用单一抗体更准确可靠。

[1]Martinez V,Azzopardi JG.Invasive lobular carcinoma of the breast:incidence and variants[J].Histopathology,1979,3(6):467-488.

[2]Acs G,Lawton TJ,Rebbeck TR,et al.Differential expression of E-cadherin in lobular and ductal neoplasms of the breast and its biologic and diagnostic implications[J].Am J Clin Pathol,2001,115(1):85-98.

[3]张琼,张昌菊.连环蛋白家族新成员-P120ctn[J].医学分子生物学杂志,2006,3(6):450-452.

[4]WHO世界卫生组织肿瘤分类及诊断标准系列.乳腺及女性生殖器官肿瘤病理学和遗传学[M].北京:人民卫生出版社,2006.19.