猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫和猪蓝耳病灭活苗两两联合应用的免疫效果观察

文萍萍，陈代平，李金海，邓永强

（四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041）

1 材料和方法

1.1 试验动物 在较洁净的猪场，选择约180头35～37日龄健康的断奶仔猪，组间猪的大小基本一致。人工投料，猪自由采食，自由饮水。

1.2 试验疫苗 猪O型口蹄疫灭活疫苗（Ⅱ），批号0703002；猪瘟活疫苗（脾淋苗），批号0709085；高致病性猪蓝耳病灭活疫苗，批号0710091。按疫苗说明书的条件进行保存、运输，使用时均在有效期内。

1.3 诊断试剂 口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒，由兰州兽医研究所生产，批号2007122401；猪瘟ELISA抗体检测试剂盒，IDEXX公司产品，批号433220-P361；猪蓝耳病抗体ELISA试剂盒，INGENASA公司产品，批号2331106。

1.4 试验方案 将试验猪分为9个试验组，免疫注射时给所有猪佩戴牲畜耳标。具体方案详见表1。

表1 试验分组方案

1.5 免疫反应的临床观察 在接种疫苗后2h测量体温一次，4h测量第二次体温，同时观察注射局部的反应和全身反应。

1.6 采血方案 于接种后0、4、14、21 d和28 d前腔静脉采血，1～1.5mL/头，血清析出后-20℃冻存，统一检测。

1.7 检测方法及结果判定 猪瘟ELISA抗体检测试剂盒的检测原理为阻断ELISA；O型口蹄疫检测试剂盒为液相阻断ELISA抗体；猪蓝耳病抗体ELISA试剂盒的检测原理为间接ELISA。检测时按试剂盒操作说明书进行。

1.8 数据分析 用SPSS13.0软件进行分析。

2 结果与分析

2.1免疫反应的观察 单独免疫猪瘟疫苗后，猪体温、食欲正常，未见免疫副反应产生。单独免疫猪O型口蹄疫灭活疫苗（Ⅱ）或高致病性猪蓝耳病灭活疫苗后，体温升高0.5～1℃，精神状态稍差，但很快恢复，无不食和精神不振的情况，注射部位无红肿变化，总体免疫副反应较小。猪瘟与口蹄疫或高致病性猪蓝耳病疫苗同时分部位免疫，猪的免疫副反应与单独注射口蹄疫或高致病性猪蓝耳病疫苗的情况基本一致。口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗同时分部位免疫后，猪体温升高1～2℃，精神状态稍差，1d左右恢复，无不食和精神不振的情况，注射局部无红肿变化，总体上免疫副反应较单独免疫注射时明显。

2.2 免疫抗体检测结果

2.2.1 猪口蹄疫抗体检测结果与分析 用液相阻断ELISA 检测 1、4、6、7、8 组猪在接种后 0、4、14、21 d 和28 d的口蹄疫抗体效价，结果见表2、表3。从表2可见，1组免疫后28 d，平均抗体效价可达71.77，4组与1组相比差异不大，而6组平均抗体效价大大低于1组。从表3可见，28 d时I组的免疫合格率可达66.67%，4组免疫合格率为50%，6组免疫合格率为0。7、8组母源抗体比1组高，相比1、4组产生的抗体效价要低一些。从1、4组看，猪瘟和口蹄疫同时分部位注射对口蹄疫的免疫效果有一定的影响，但差异不显著（P＞0.05），总体来说是可以接受的；猪蓝耳病和口蹄疫同时分部位免疫对口蹄疫的免疫效果影响很大（P＜0.01）。比较 7、8组和 1、4组可见，母源抗体对口蹄疫的免疫效果影响较大。

表2 口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA的检测结果（几何平均值） %

表3 口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测的免疫合格数

表4 猪瘟抗体检测结果（几何平均值） %

表5 猪瘟抗体检测结果（阳性数）

2.2.2 猪瘟抗体检测结果与分析 用ELISA检测2、4、5、7、9 组的猪瘟抗体水平，结果见表 4、5。从 2、4 组看，猪瘟和口蹄疫同时分部位免疫对猪瘟的免疫效果影响不大（P＞0.05）。从2、5组看，猪蓝耳病和猪瘟同时分部位免疫对猪瘟的免疫有一定的影响。从2、7、9组看，在猪瘟母源抗体较高时免疫，对猪瘟抗体的影响较大。

2.2.3 猪蓝耳病抗体检测结果与分析 用间接ELISA检测猪蓝耳病的抗体，0d的检测结果表明该猪场部分仔猪的抗体效价达到1 000以上，说明该猪场已经感染了猪蓝耳病，所以无法比较各组的差异。此外猪蓝耳病的抗体与保护率之间无相关性，本试剂盒不能区分高致病性蓝耳病疫苗的特异性抗体，凡是猪蓝耳病的抗体均能检出。故本报告未列出相应的检测结果。

3 小结与讨论

3.1 本次试验表明，猪瘟脾淋弱毒疫苗和猪O型口蹄疫灭活疫苗（Ⅱ）同时分部位注射时，免疫副反应与单独注射口蹄疫疫苗的情况一致，对口蹄疫和猪瘟免疫抗体的产生无影响，相互间干扰很小（P＞0.05），在生产实际中是可行的，这与张娟敏等人的报道是一致的，也是被我省这几年的防疫工作所证实的。

3.2 本次试验表明，高致病性猪蓝耳病疫苗和猪O型口蹄疫灭活疫苗（Ⅱ）不能同时免疫，这可能与检测方法、母源抗体水平高低等因素有关。猪瘟脾淋弱毒疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗同时分部位免疫对猪瘟的免疫效果有一定的影响，王剑峰等也报道猪蓝耳病疫苗对猪瘟的免疫效果有显著影响。

3.3 该猪场所有母猪均免疫过两次猪蓝耳病疫苗，0 d时部分仔猪的抗体水平很高，可能存在隐性猪蓝耳病。

3.4 此次试验表明：仔猪只免疫1次口蹄疫疫苗（1 mL），免疫抗体合格率只能达到50%～66.67%，因此，生猪口蹄疫只免疫1次一般达不到保护效果，应加强免疫1次，这与农业部口蹄疫免疫方案规定的60日龄左右强化免疫1次是一致的。

3.5 通常认为猪瘟弱毒脾淋苗的免疫效果最好，本次试验用猪瘟脾淋苗1头份，抗体阳性率只能达到60%左右，因此实际生产中应在60日龄左右加强免疫1次，并且要根据当地实际情况制定合理的免疫程序。

本次试验均采用ELISA方法对免疫效果进行评价，通常ELISA比IHA方法更客观，更敏感，特异性更高，但该ELISA试剂盒没有给出达到免疫保护的临界值。

[1]张娟敏，张少东，蒋 皓，等.规模猪场主要疫病的免疫技术研究[J].浙江畜牧畜医，2006，（2）：1-3.

[2]王剑峰，杨宗照，谷 艺.同时注射猪瘟和蓝耳病疫苗对猪瘟抗体效价的影响试验[J].浙江畜牧畜医，2007，（1）：33.

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