祛痘合剂质量标准的初步研究

周晓霞

杭州市红十字会医院制剂室 杭州 310003

祛痘合剂为我院临床常用制剂,具有清热利湿解毒等功效,治疗湿热内壅及肠胃湿热型痤疮疗效显著。笔者对其制剂的质量控制标准进行了研究,现报道如下。

1 仪器与试药

S22PC型可见分光光度计(上海棱光技术有限公司),BS110S电子分析天平(北京赛多利斯天平有限公司),80-2离心沉淀器(上海手术器械厂)。芦丁标准品(中国药品生物制品检定所,批号:100080-20030)。乙醇、亚硝酸钠、氯化铝、氢氧化钠等均为分析纯。祛痘合剂(由我院制剂室提供,批号:061031、070306、070402)。

2 方法与结果

2.1 处 方 黄芩、龙胆草、栀子、柴胡、地黄、车前子、泽泻、当归、黄连、枇杷叶、大黄(制)、生石膏等。

2.2 制备工艺 取生石膏先煎 2次,时间分别为 1小时和 0.5小时,过滤,得滤液备用。取柴胡和当归提取芳香水 200ml,药渣与余药合并煎煮 2次,时间分别为 1小时和 0.5小时,合并煎滤液,静置过夜,上清液浓缩至比重不小于 1.01(20℃),用 85℃药液溶解尼泊金乙酯,放冷,加入芳香水,加入石膏滤液,调整至全量 1000ml,静置过夜,过滤,经半成品检验合格后,灌装,105℃热压灭菌 1小时即得。

2.3 质量标准

2.3.1 性 状 本品为棕色液体,久置有少许沉淀,味苦。

2.3.2 鉴 别 取本品 10ml,加硅藻土 2g,拌匀,水浴蒸干,残渣加甲醇 10ml超声提取 10min,滤过,滤液作为供试品液。另取黄芩苷,加甲醇制成 1mg/ml的溶液作为对照品。同法制作缺黄芩的阴性对照液。参照薄层色谱试验[1],吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一聚酰胺薄膜上,以醋酸为展开剂,展开,取出,晾干。置紫外灯 365nm下检视,供试品色谱中,应与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,而阴性对照液则无,见图 1。

图1 祛豆合剂薄层鉴别

2.4 总黄酮含量测定

2.4.1 对照品溶液制备 精密称取 105℃干燥恒重的芦丁对照品 13.0mg,加 50%乙醇置 25ml量瓶定容,得浓度为 0.26mg/ml的对照品溶液备用。

2.4.2 供试品溶液制备 精密吸取 1.0ml样品溶液于 10ml容量瓶中,用 95%乙醇稀释到刻度,涡旋混匀,转移至离心管中 4000r/min离心 5min,精吸上清液 1ml于 25ml容量瓶中,加 50%乙醇至刻度,作为供试品溶液,备用。

2.4.3 标准曲线制作 精密吸取对照品溶液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,分别置于 25ml容量瓶中,加 50%乙醇至 6min,各加入 1.0ml的 5%NaNO2,摇匀,放置 6min,加入 1.0ml10%Al(NO3),摇匀,放置 6min后加 10%NaOH10.0ml,加 50%乙醇稀释至 25ml,混匀,静置 15min,于 510nm处比色测定,以相应试剂为空白[2]。以浓度对吸光度绘制工作曲线,得回归方程 C=3.0469A-0.008(r=0.9997),结果表明,在 0.13～1.30mg/ml范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系。

2.4.4 精密度试验 精密吸取标准品溶液 1ml,按“2.4.3”操作,重复 5次测定,RSD=0.18%,表示本法有较好的精密度。

2.4.5 重复性试验 依照供试品溶液处理方法对同一批样品 (批号:061031)按“2.4.3”操作,重复测定 5次,结果表明,RSD=2.52%,重复性良好。

2.4.6 稳定性试验 取上述供试品溶液,按“2.4.3”项下法每隔 5min测定吸光度,结果表明吸光度在显色完全后 60min内稳定,RSD=2.66%。

2.4.7 回收率实验 精密吸取已知含量(批号:061031)供试品溶液 1.0ml5份,分别精密加入对照品溶液适量,按“2.4.3”项操作,测定吸光度并计算,结果见表 1。

表1 回收试验结果

2.4.8 祛痘合剂总黄酮含量测定 精密吸取供试品溶液 1.0ml,按“2.4.3”项操作,于 510nm处测定吸光度,由回归方程计算总黄酮含量。测定结果见表2。

2.5 与质量有关的项目测定 相对密度、pH值等按中国药典 2005版附录 VIIA、VIID[1]检测,结果见表 2。

表2 祛痘合剂总黄酮含量测定结果(n=5)

3 讨 论

本实验制剂为中药复方制剂,且主要通过水煎提取制备而成,成分复杂,故对供试品溶液需进行前处理。经实验发现,当采用 95%乙醇沉淀离心时,杂质干扰较小,所得样品总黄酮含量回收率较高,重现性好,方法简便,可作为该制剂定量测定用。初步制订该制剂总黄酮含量≥3mg/ml。由于祛痘合剂药味较多,成分复杂,本文仅对其质量标准进行了初步研究,至于其他成分的质控研究正在进行中。

本文仅对祛痘合剂中君药黄芩进行了定性鉴别,实验发现用甲苯 -乙酸乙酯 -甲醇 -甲酸展开剂时,干扰严重;而采用醋酸为展开剂,分离效果佳,斑点圆整,无拖尾现象,可作为制剂黄芩药材定性鉴别用。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2005.附录 18、28.

[2] 马莺,王静,牛天娇,等.功能性食品活性成分测定[M].北京:化学工业出版社,2005.253.