高效液相色谱法测定礞石滚痰片中黄芩苷含量

李 卿 ，陈志新 ，秦 剑 ，肖铭玉

（1.重庆市中药研究院，重庆 400065； 2.中国人民解放军第6905工厂职工医院，重庆 400712）

礞石滚痰片是由金礞石、沉香、熟大黄等提取制成的中药制剂，具降火逐痰功效。为有效控制产品质量，笔者采用高效液相色谱（HPLC）法测定制剂中黄芩苷的含量，报道如下。

1 仪器与试药

Waters 2695/2996型高效液相色谱仪。黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110715-200514）；水为纯化水，甲醇为色谱纯；其余试剂均为分析纯；礞石滚痰片（市售品，批号分别为081001，081002，081003，081101，081102）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：DiamonsilTM（钻石）C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇 -0.2% 磷酸溶液（47 ∶53）；流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm；进样量:10 μL。理论塔板数以黄芩苷计算不低于3 000。

2.2 溶液制备

精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.092 mg的溶液，作为对照品溶液。取样品10片，研细，取约0.1 g，精密称定，置100 mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理30 min，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，取续滤液即得供试品溶液。按礞石滚痰片制备工艺制备缺黄芩的阴性样品，同法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性考察：取2.2项下3种溶液，分别注入液相色谱仪。供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液色谱图相应位置上有一相同色谱峰，阴性对照品溶液则无此峰，表明阴性无干扰（图1）。

线性关系考察：精密吸取对照品溶液 2，4，8，16，30 μL，注入液相色谱仪，以进样量（μg）为横坐标、峰面积为纵坐标（Y）进行回归分析。得回归方程 Y=3 149 527X-187 479.1，r=0.999 9（n=5）。结果表明黄芩苷进样量在0.184～2.760 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取对照品溶液，重复进样测定。结果黄芩苷峰面积的 RSD为0.4%（n=5）。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，2，4，10，12 h时进样。结果黄芩苷峰面积的 RSD为0.8%（n=5），表明溶液稳定性良好。

重现性试验：取同一批样品6份，依法测定。结果黄芩苷平均含量为21.34 mg/片，RSD 为1.12% （n=6）。

加样回收试验：取已知含量的样品6份，分别加入黄芩苷对照品，按供试品溶液制备方法制备溶液并测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 黄芩苷加样回收试验结果（n=6）

2.4 样品含量测定

取 5批样品，依法测定。结果批号为 081001，081002，081003，081101，081102 的样品中黄芩苷含量分别为 22.14，23.26，22.85，23.04，21.92 mg/片。

3 讨论

[1]选用甲醇-磷酸溶液作为流动相，经多次试验，以甲醇-0.2%磷酸溶液（47∶53）为流动相能使样品中黄芩苷峰与相邻色谱峰达到基线分离。在此色谱条件下，黄芩苷与相邻色谱峰分离良好，峰形对称，阴性对照无干扰，故本方法可用于礞石滚痰片的质量控制。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2005：117.