新生儿窒息尿系列微量蛋白变化及临床意义

黄 萍 糜丽珍

(余姚市人民医院,浙江 余姚 315400)

窒息为新生儿常见症状,也是新生儿的主要死亡原因。新生儿窒息(Neonatal Asphyxia)可引起多器官损害,虽然缺氧缺血性脑病是最严重的并发症之一,但肾损害发生率最高,约占50%[1]。传统的肾功能检查方法易遗漏病变轻微的亚临床及早期急性肾损伤的病例。本研究对58例窒息新生儿尿中系列微量蛋白包括视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、白蛋白(Alb)、免疫球蛋白(IgG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、α1-微球蛋白(α1-MG)进行联合检测,同时检测传统肾功能指标血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),探讨新生儿窒息尿系列微量蛋白对早期肾损伤的临床诊断价值。

1 资料与方法

1.1 研究资料 新生儿窒息组58例,均为2007年8月～2008年7月本院新生儿科住院足月患儿,其中男31例,女27例,胎龄(39.13±0.99)周,出生体质量(3070±437)g,日龄(4.16±1.72)天。按1分钟Apgar评分,4～7分为轻度窒息38例,0～3分为重度窒息20例。重度窒息组胎龄(39.23±0.99)周,出生体质量(3094±455)g;日龄(4.24±1.79)天;轻度窒息组胎龄(38.95±0.99)周,出生体质量(3025±407)g;日龄(4.12±1.72)天。对照组为本院产科同期出生的足月正常新生儿49例,1分钟Apgar评分分8～10分,其中男27例,女22例,胎龄(39.06±1.02)周,出生体质量(3097±426)g,日龄(4.08±1.44)天,无宫内窘迫,无心、肺、脑、肾及感染性疾病。各组间性别、胎龄、出生体质量、日龄等差异无显著性。

1.2 方法 各组新生儿均于入院后第2天抽取静脉血2ml,用新生儿集尿袋收集留尿4～5ml,静脉血提取血清后采用HITACHI 7060 Automatic Analyzer(日立7060全自动生化分析仪)检测出BUN和Cr;尿液2000r/min,离心5分钟,取上清液,采用 DADE BEHRING BN ProSpec(德灵全自动分析仪)检测出尿系列微量蛋白(RBP,TRF,Alb,IgG,NAG,α1-MG)。

1.3 统计学处理 采用SAS6.12统计学软件包对试验数据进行统计学分析,结果以均数±标准差表示,两组间比较用团体t检验。

2 结 果

窒息组新生儿尿中 RBP、TRF、α1-MG(P ＜0.01)、Alb、IgG、NAG(P＜0.05)均显著高于对照组,窒息组与对照组Cr差异无统计学意义(P＞0.05),详见表 1。重度窒息组尿RBP、TRF、α1-MG(P＜0.01)、NAG(P＜0.05)显著高于轻度窒息组,Alb、IgG两组无显著性差异(P＞0.05),详见表2。

3 讨 论

新生儿窒息后肾损害的本质是肾脏的缺氧缺血性损伤,近端肾小管细胞对缺氧特别敏感,因此缺氧性肾损害主要发生于近端肾小管细胞[1]。临床表现为功能性少尿,部分可出现蛋白尿,少数甚至出现无尿,肾损害程度与窒息严重程度相关。目前肾损害的实验室诊断多以尿蛋白、BUN、Cr作为主要指标,然而这些指标难以发现早期肾脏的损害。本组58例窒息新生儿尿中 RBP、TRF、α1-MG(P ＜0.01)、Alb、IgG 、NAG(P ＜0.05)均显著高于对照组,但窒息组BUN和Cr与对照组并没有明显差异,说明窒息后缺氧缺血导致肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能障碍,而这种肾功能的损害并未引起肌酐及尿素的变化。因此,在新生儿窒息中,尿系列微量蛋白的检测是发现早期肾损害的重要手段。

表1 窒息组与对照组尿系列微量蛋白及肌酐、尿素的比较

表1 窒息组与对照组尿系列微量蛋白及肌酐、尿素的比较

组 别 n RBP(μ g/mol)TRF(μ g/mol)Alb(mg/mol)IgG(mg/mol)α1-MG(mg/mol)NAG(U/mmol)BUN(mmol/L)Cr μ mmol/L)窒息组 58 16.12±5.91 171.58±37.34 85±1.94 1.03±0.52 4.57±2.07 1.96±1.08 4.93±3.21 54.26±24.37对照组 49 7.40±3.84 59.64±18.37 2.04±1.06 0.74±0.32 1.23±0.98 1.37±0.34 3.98±2.26 48.76±37.85 t值 — 8.86 19.11 5.83 3.40 10.35 3.67 1.74 0.89 P值 — ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＞0.05 ＞0.05

表2 重度窒息组与轻度窒息组尿系列微量蛋白比较

表2 重度窒息组与轻度窒息组尿系列微量蛋白比较

组 别 n RBP(μ g/mol) TRF(μ g/mol) Alb(mg/mol) IgG(mg/mol) α1-MG(mg/mol) NAG(U/mmol)重度窒息组 20 18.37±5.91 192.58±37.34 3.92±2.09 1.09±0.64 5.93±2.33 2.32±1.37轻度窒息组 38 14.94±3.84 160.53±32.18 3.81±1.85 1.00±0.32 3.85±1.68 1.77±0.63 t值 — 2.67 3.41 0.21 0.72 3.91 2.01 P值 — ＜0.01 ＜0.01 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.01 ＜0.05

尿系列微量蛋白的测定是近年来检测肾小球、肾小管功能的主要手段[2-3],主要包括检测IgG、TRF、Alb、NAG、α1-MG、RBP 等,其中前三项主要反映肾小球功能,后三项主要反映肾小管受损情况。本组58例窒息新生儿尿系列微量蛋白各项指标均有升高,表明窒息新生儿肾小球及肾小管功能均有损伤。IgG、Alb分别为大、中分子蛋白质,正常情况下绝大部分不能通过肾小球滤过膜屏障。当肾小球滤过屏障受损时,Alb随尿液排出增加,当肾小球病变发展到一定程度时,IgG亦会在尿中出现。TRF分子质量直径大小与白蛋白接近,但带负电荷相对比白蛋白少。当肾小球基底膜的电荷屏障发生损害后、TRF比白蛋白更易漏出,所以TRF是一项更能反映肾小球滤过膜损害的灵敏指标,但尿中浓度相对比白蛋白低很多。NAG是一种溶酶体酶,在肾小管上皮细胞内含量尤高,对肾小管活动性损伤反应灵敏,往往是最早发现的指标[4]。α1-MG是一种分子量为26100的糖蛋白,它以游离状态或与高分子蛋白结合两种形式存在于血液中,游离状态的α1-MG可经肾小球滤过,且大部分被肾近曲小管重吸收,少量从尿中排出,当肾近曲小管受损时则其排量增加,所以α1-MG可敏感反映肾小管功能[5],从而早期发现肾小管受损情况。目前肾小管功能的测定是评价肾间质病理损害的重要依据。RBP在酸性尿及不同温度中均稳定,肾小球滤过的RBP有99.7%被近曲小管重吸收,它与α1-MG一样都是反映近曲小管重吸收功能变化的低分子蛋白。本组20例轻度窒息新生儿和38例重度窒息新生儿的比较中发现TRF、RBP、α1-MG在窒息新生儿的尿液中变化最为明显,而IgG、Alb在重度窒息组和轻度窒息组没有明显的差异,可能原因是肾小管对缺氧更加敏感。

综上所述,传统指标对新生儿窒息的肾损害的早期诊断相对不敏感,尿微量蛋白检测为临床提供了较灵敏的实验室指标,其取材简便、无创伤,有可连续追踪随访的优点,同样具有早期定位诊断、鉴别诊断、指导治疗和判断预后的实用价值[6]。新生儿窒息后肾小球、肾小管有不同程度损害,尿液中RBP,TRF,Alb,IgG,NAG,α1-MG是诊断肾功能早期损害的敏感指标,其中以 TRF、RBP、α1-MG 最敏感,对患儿进行监测有助于早期诊断肾损害的部位和程度以及对预后作出判断。

[1] 石晶,向龙综述,姚裕家审校.新生儿窒息肾损害及肾功能监测.国外医学儿科学分册,2000,27(6):284

[2] Kirsztajn G M,Nishida S K,Silva M S,et al.Urinary retinal-binding protein as a prognostic marker in glomerulopathies.Nephron,2002,90(4):424

[3] Prevot A,Martini S,Guignard J P.Glomerular filtration markers in pediatrics.Rev Med Suisse Romande,2002,122(12):625

[4] 黄振国,王绵,刘品力,等.尿视黄醇结合蛋白、N-乙酰β-D-葡萄糖苷酶对早期糖尿病肾病的诊断意义.临床荟萃,2004,19(2):83

[5] 陈光明,李秋,李永柏,等.过敏性紫癜性肾受累的实验室指标选择与分析.中国实用儿科杂志,2001,16(4):207

[6] 田国力,许洪平,董庆元,等.小儿尿系列微量蛋白正常值测定及其临床意义.临床儿科杂志,2003,21(12):799