黄精提取液对老龄小鼠心、脑SOD和MDA含量的影响

韦素珍 ，黄艳莲 ，陆贻逊 ，黄桂雄 ，赵善民 ，晋 玲 ，黄彦峰

（右江民族医学院，广西百色 533000）

随着社会逐渐步入老龄化阶段，中国已经成为一个典型的“未富先老”的国家，衰老及老年群体的健康问题已成为医学领域的研究热门。大量资料表明，黄精含有皂苷、黄精参、多糖、醌类、氨基酸及微量元素等多种生物活性物质[1-2]，对机体具有一定的降血压、血脂等作用，也有部分研究表明黄精具有抗衰老作用[3-5]，但目前相关深入研究不多。为此，本实验研究不同浓度的黄精提取液对老龄小鼠心、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的影响，以进一步探讨黄精的抗衰老作用，为黄精的应用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

昆明种小白鼠24只（由右江民族医学院实验动物中心提供），均为雌性。鼠龄13~15周，体重30~42 g，随机分为黄精提取液高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照组，每组6只，分笼饲养。

1.2 黄精提取液的制备

称取100 g黄精干品（产地广西，购于南宁生源中药饮品有限责任公司，批号090903），用自来水浸泡12 h，加自来水至500 ml，煮沸30 min，自然冷却至室温后过滤，保存滤液，将自来水加入滤渣至500 ml，再次煮沸30 min后过滤。合并2次滤液再加入95%乙醇50 ml醇提，水浴加热使乙醇完全挥发，幷浓缩至100 ml，制成1.0 g/ml的黄精提取液，4℃低温保存备用。

1.3 实验方法

从第1天起，全部小鼠给予正常饲料和饮水，将黄精提取液浓度15、10、5 g/kg依次给高剂量组、中剂量组、低剂量组灌胃，对照组给予生理盐水5 g/kg灌胃，每天灌胃1次，连续21 d，室温控制在25~28℃，湿度为50%。第22天采取颈椎脱臼法处死小鼠，迅速取出其心、脑组织，用冰冻生理盐水洗净，滤纸吸干。称重后制备成10%和1%的组织匀浆，分别测定组织匀浆中的SOD、MDA含量。

1.4 10%和1%组织匀浆的制备

取组织块在冰冻生理盐水中漂洗，滤纸吸干称重，放入匀浆管中剪碎并加入该组织块重量9倍的4℃冰冻生理盐水，用匀浆机匀浆（15 000 r/min，连续3~5次）并制备成10%的组织匀浆液，再将其中一部分10%的组织匀浆液用生理盐水按1∶9稀释成1%的组织匀浆液，最后用10%匀浆液和1%匀浆液分别加药并离心（3 000 r/min，10 min）。

1.5 氧自由基的测定

心、脑组织匀浆中SOD、MDA含量的测定均按南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书方法进行操作，组织中蛋白含量的测定采用四川省迈克科技有限责任公司提供的总蛋白Doumas法检测试剂盒的说明书进行操作，测定仪器用722型分光光度计（上海第三分析仪器厂）。

1.6 统计学处理

数据以均数±标准差（x±s）表示，采用 SPSS 13.0软件进行统计学分析，组间比较采用方差分析法（LSD法），P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 黄精提取液对小鼠心、脑组织SOD含量的影响

结果显示，除高剂量组脑组织SOD含量升高不明显外，其余各黄精提取液实验组心、脑SOD含量均较对照组明显升高（P＜0.01），其中以低量组变化最明显，结果见表1。

表1 黄精提取液对小鼠心、脑组织SOD、MDA含量的影响（x±s）

2.2 黄精提取液对小鼠心、脑组织MDA含量的影响

结果显示，黄精提取液实验组心、脑组织中MDA含量与对照组相比均有所降低，其中中剂量组明显降低（P＜0.01），高剂量组差异有统计学意义（P<0.05），低剂量组变化不明显，结果见表1。

3 讨论

在生命活动的新陈代谢过程中，自由基是生命活动过程中生物化学反应的中间产物。在健康机体内自由基的形成和清除处于一种动态平衡，一旦这种动态平衡遭到破坏，自由基积累过量时就会造成对组织的损害，引起衰老以及多种疾病的发生[6]。超氧阴离子自由基是机体代谢过程中的一种活性氧[7]，它可以攻击生物膜上的不饱和脂肪酸，并发生一系列连锁反应，生成脂质过氧化物——MDA，MDA可以攻击蛋白质、核酸大分子等，最终引起细胞代谢及功能障碍，导致细胞衰老死亡。因此，通过测定MDA含量的高低可以间接反映组织细胞的损伤程度[8-9]。SOD是一种清除氧自由基的关键酶[10-11]，能够清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受损伤，检测SOD含量的高低可以间接反映机体清除自由基的能力。因此，通过测定组织中SOD和MDA含量可了解机体的生理状态。大量研究表明，SOD含量与物种寿命呈正相关，在保护心、脑功能及延缓衰老方面发挥重要作用。随着年龄的增加，体内SOD的活性降低，MDA含量增加。随着社会步入老龄化阶段，衰老问题已受到社会的普遍关注。因此，研究清除氧自由基的抗氧化剂用于保护细胞和组织免受损伤或减轻其受损程度具有重要意义，并可为保健及延缓衰老提供一些重要的依据。

实验结果显示，服用黄精提取液3周后，除高剂量组脑组织SOD含量升高不明显外，其余各黄精提取液实验组心、脑SOD含量均较对照组明显升高（P＜0.01），其中以低量组变化最明显。MDA含量均低于正常对照组，其中以中剂量组降低最明显（P<0.01），高剂量组差异有统计学意义（P<0.05），表明黄精提取液中的某种生物活性物质在参与清除自由基或间接增强机体其他清除自由基系统的功能中起重要作用。在本实验中，实验组小鼠心、脑组织SOD含量均高于对照组，但以低剂量组最明显，说明低剂量组所对应的黄精提取液的浓度抗自由基损伤的能力较强。实验组小鼠心、脑组织的MDA含量均低于对照组，中剂量组降低最明显（P<0.01），低剂量组MDA下降不明显。这可能是因为黄精提取液中的生物活性物质在提高机体对抗超氧阴离子能力上较明显，而对如羟自由基、过氧化氢等自由基的清除能力较弱。所以同一浓度的黄精提取液其抗自由基损伤能力较强，但其清除自由基的能力不一定较强，其具体机制有待进一步研究。本实验结果提示，服用黄精提取液对机体抗氧化及延缓衰老有良好的作用，这与民间常用黄精来强身健脾、补中益气、延长寿命一致。

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