巨细胞病毒感染与冠心病患者的白细胞介素-10水平升高相关

研究显示，炎症参与了动脉粥样硬化病变的发生、发展以至最终血栓形成[1-2]。还有研究表明，细胞因子网络与缺血性心脏病有关，炎症标致物C-反应蛋白和其它细胞因子，如白介素(Interleukin，IL)-1和IL-6，被认为能增加动脉粥样硬化的炎症反应[1-2]，而IL-10，则被认为是细胞因子网络中的负相调节细胞因子[3]。IL-10主要由Th2、巨噬细胞和活化B细胞产生，它抑制T细胞、单核-巨噬细胞产生炎症因子，如：IL-1、IL-6、γ-干扰素和肿瘤坏死因子-α，并抑制抗原提呈和免疫激活过程中细胞表面的分子表达，在抑制细胞免疫的同时，增强体液免疫[4-5]。体外和动物试验显示，IL-10在动脉粥样硬化病变的发生和发展中，有抗炎和抑制病变的作用[6-9]，但临床上，有关冠心病患者IL-10水平的研究结果并不一致[10-13]。

巨细胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)、单纯疱疹病毒-1型[14]、单纯疱疹病毒-2型[15]、肺炎衣原体[16-17]等微生物感染可能参与心血管病的发生[18]，造成冠状动脉粥样斑块不稳定，加速动脉粥样硬化病变和增加心血管事件[18]。有研究表明，在冠心病患者，CMV感染参与上调局部和循环中的炎症细胞因子，如：IL-1，IL-6和C反应蛋白[19], 但CMV感染对IL-10水平的影响知之甚少，因此，本研究意欲探讨CMV感染对冠心病患者血清IL-10水平的影响。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择水利医院住院患者188例，其中冠心病患者106例，对照组患者82例。所有10例冠心病患者均行冠状动脉造影，证实有1支或1支以上的主要冠脉分支存在≥50% 的狭窄。对照组患者为或有不典型冠心病症状，或有冠心病传统危险因素，而怀疑患有冠心病，但经冠状动脉造影证实冠脉壁光滑，而在临床上排除患有冠心病。另外，57例冠状动脉造影显示有冠脉管壁有不规则病变者，被排除出本研究。

1.2 一般资料

188例患者的基本统计学资料见表1。在冠心病组，患者合并糖尿病、高血压的比例显著高于对照组(P<0.01)。 冠心病组与对照组相比，CMV IgG阳性率统计学差异无显著性(38.9% vs.37.6%，P>0.05 )。冠心病组IL-10水平显著高于对照组，7.3(3.0 -12.5) pg/ml vs. 5.9 (3.2 - 10.4) pg/ml(P= 0.043)。

1.3 方法

1.3.1 IL-10的相关因素 本研究分析了影响IL-10潜在的相关因素包括：年龄、性别、吸烟、糖尿病、血脂紊乱、高血压、体重指数、体力活动少和血清CMV- IgG阳性。吸烟状态分为目前吸烟、既往吸烟(停止吸烟>1个月至<40年)和不吸烟(从不吸烟或戒烟 ≥40年)。糖尿病患者指空腹血糖 ≥7.0 mmol/L (126 mg/dl) 或者已经使用口服降糖药物或胰岛素治疗者。高血压指收缩压 ≥140 mmHg和/或舒张压 ≥90 mmHg或已经应用降压药物治疗的患者。血脂紊乱指空腹总胆固醇 ≥220 mg/dl (5.72 mmol/L), 或甘油三脂 ≥200 mg/dl (2.26 mmol/L), 或HDL-C<40 mg/dl (1.04 mmol/L), 或经计算的LDL-C ≥140 mg/dl (3.64 mmol/L), 或者已接受调脂治疗。从事较多脑力劳动者被认为体力活动少。

1.3.2 试验技术 患者入院后，取过夜空腹血。标本采集后放置-80℃冰箱保存。使用美国BioSource International生产(双单抗夹心法)的高灵敏度人IL-10 ELISA试剂，定量测量IL-10，检测限度为 0.3 pg/ml，组间变异为 7.8%。CMV (AD 169)-IgG检测试剂盒购于中国预防医学科学院病毒研究所，其原理基于间接固相酶联免疫吸附试验，根据阴性和阳性对照，得出CMV IgG阳性界值，CMV IgG阳性表示既往CMV感染。

表1 研究对象的一般资料

注：括号内为百分数；290例患者(83.3%)的吸烟资料可用

1.3.3 统计分析 记数资料采用Pearson χ2检验或Fisher检验进行分析。体重指数以均值±标准差表示，用t检验分析。IL-10为非正态分布，用中位数及(25%和75%)百分位数表示，两组间比较采用非参数检验(Mann-Whitney U 检验)。所有个体(n=288)，据计算出的IL-10中位数值(6.84 pg/ml)，分高、低IL-10组[20]，以高IL-10作为应变量，其它可能的相关因素作为因变量，以Logistic回归分析IL-10的影响因素，并用调整后的危险度比值比(OR)和95%的可信区间表示相关因素对IL-10的影响。P<0.05统计学差异具有显著性。SPSS 10统计软件进行分析。

2 结果

2.1 IL-10升高相关的单因素分析

如表2所示，高IL-10组的CMV IgG阳性率显著高于低IL-10组的CMV IgG阳性率(46.8% vs. 30.4%,P<0.001)，而性别、年龄、吸烟、高血压、糖尿病和血脂紊乱在高、低IL-10组间的差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 在冠心病组，高IL-10 组中的CMV IgG阳性率显著高于低IL-10组的CMV IgG阳性率(48.1% vs. 28.6 %，P<0.001)，但在对照组患者的高、低IL-10 组中，未见CMV IgG阳性率的显著差异(40.4% vs. 35.6%，P=0.588)，见表3。

2.3 IL-10升高相关因素的多元Logistic回归分析

表4为高IL-10的每个相关因素调整后的OR值和95%的可信区间。在冠心病组，只有CMV IgG阳性与高IL-10独立相关，调整的OR值为2.3(1.6～3.4，P<0.001)。在对照组，CMV IgG阳性与高IL-10调整后的OR值为1.1(0.5～2.5，P=0.83)。调整变量包括年龄、性别、吸烟、高血压、血脂紊乱、糖尿病及较少体力活动。

3 讨论

本研究表明：在冠心病患者，CMV感染与血清IL-10水平升高独立相关。

CMV感染与冠心病患者血清IL-10水平升高相关的机制，可能与CMV感染刺激体内Th2细胞、巨噬细胞、B细胞产生IL-10有关[4-5]。尽管体外研究显示单核细胞被CMV感染后不能产生IL-10[21]，但CMV感染后，肾移植患者血浆IL-10水平升高[22]，肺组织和支气管肺泡灌洗出的细胞中IL-10mRNA 水平较高，支气管肺泡灌洗液中的IL-10升高[23]。本研究也表明CMV感染与冠心病患者高IL-10水平相关。因此，CMV体内感染可能与疾病相关因素协同作用于IL-10的产生。

表2 高IL-10相关因子的单因素分析

注：高、低IL-10组据所有个体的IL-10水平的中位数(6.84 pg/ml)界定;括号内为百分数；290例患者(83.3%)的吸烟资料可用

表3 高、低IL-10组中的CMV IgG阳性率比较

注：高、低IL-10组据所有个体的IL-10水平的中位数(6.84 pg/ml)界定;括号内为百分数

表4 高IL-10影响因素的多元Logistic回归分析 [调整后的OR值(95% 可信区间)]

注：aP<0.001

本研究资料虽然未显示冠心病和冠状动脉壁光滑的CMV感染率有显著差异，但CMV感染对IL-10水平的影响主要是在冠心病患者，而对冠状动脉壁光滑者的影响不显著。结合其它研究报道，有理由认为，在某些冠心病患者(IL-10产生与遗传相关[24-25])，CMV感染不仅参与上调局部和循环中的致炎细胞因子，如：IL-1，IL-6和C反应蛋白[19]，也与抗炎细胞因子IL-10的水平增加有关。因此，冠心病时，体液循环中和动脉粥样病变的局部，细胞因子网络可能处于超敏状态，致炎和抗炎细胞因子水平都增加，而这种有个体差异的细胞因子超敏状态激活或维持，可能与CMV感染有关。换言之，冠心病与CMV感染使患者的细胞因子网络处于超敏状态有关，增高的细胞因子还可能参与免疫细胞的激活，由此产生炎症反应。基于此，将外源性IL-10用于CHD的治疗值得商榷，也许将冠心病患者血中的细胞因子超敏状态下调至正常，比给予患者外源性IL-10[20]，更有益于冠心病的预后。因为本研究还表明，冠状动脉光滑者的IL-10水平比冠心病患者低。我们还认为，CMV感染诱导机体产生IL-10原因，也有可能使CMV更容易逃逸机体的免疫反应清除。无论如何，冠心病患者CMV感染与IL-10升高的意义，需要谨慎的解释和进一步研究。

有报道高胆固醇血症的IL-10水平较高[26]，血管紧张素转换酶抑制剂[27]和β受体阻滞剂[28]可降低IL-10水平，而类固醇激素的应用则有上调IL-10水平的作用[29]。本研究中的所有个体均为住院患者，药物治疗对IL-10水平可能有一定的影响。尽管如此，本研究资料未显示传统的危险因素，如：高血压、血脂紊乱、糖尿病、吸烟和体重指数对冠心病患者的血清IL-10水平有显著影响。

本研究中有二方面局限性。首先，特异性的CMV IgG阳性或阴性，不是衡量CMV感染与否的金标准，但是，与CMV IgG阴性个体相比，CMV IgG阳性可认为是经常性的、近期的、或较严重的CMV慢性感染。其次，本研究设计为横断面病例对照研究，因此，我们只能据此提出假设，而非因果关系的证明。

总之，本研究表明CMV感染与冠心病患者的IL-10升高相关，CMV感染可能增加冠心病患者IL-10产生。因此，我们认为，在冠心病患者，CMV感染的免疫应答可能是一个影响细胞因子网络的复杂反应。

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