131I-组胺-吲哚美辛对大鼠Lewis肺癌的SPECT显像及疗效观察

刘侃峰,张彩霞

(中国医科大学附属盛京医院 核医学科,辽宁沈阳 110001)

吲哚美辛(Indometacin,IN)是一种非甾体抗炎药,是最强的前列腺素(PG)合成酶抑制剂之一。它具有镇痛、抗炎及解热作用,缓解炎性疼痛作用强,在临床使用多年。近年来,有大量临床研究显示,该药对肺癌、膀胱癌、食管癌、肠癌、肝癌等都有较好的疗效[1-9]。本研究小组[10-13]曾将氚标记的吲哚美辛引入到荷瘤小鼠体内,应用放射自显影(ARG)和液闪测量(LSC)技术,观察氚标记的吲哚美辛在荷瘤鼠体内的分布情况及其亲肿瘤性的强弱,证实了氚标记的吲哚美辛在荷瘤鼠的肿瘤组织中有明显放射性浓聚,即吲哚美辛有较好的瘤组织亲和性,且能在肿瘤细胞中存留较长时间,这为吲哚美辛发挥抗肿瘤作用提供了必要的条件。但由于3H的半衰期很长,不适于临床应用。故选择临床常用放射性核素131I标记吲哚美辛,本工作拟将131I标记的组胺-吲哚美辛(131I-His-IN)引入荷瘤鼠体内,以了解其对肿瘤的SPECT显像效果。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器

Infinia2 VC Hawkeye SPECT、OLYMPUS C-5050光学显微镜、OLYMPUS BX41数码相机:由中国医科大学盛京医院病理科提供。

吲哚美辛:化学纯度98.5%,山西临汾云鹏药业公司提供;组胺-IN(His-IN):化学纯度＞95%,委托沈阳药科大学合成。131I-His-IN:放化纯度＞95%,比活度＞185 GBq/g,由江苏省原子医学研究所同位素标记实验室协同标记。

1.2 实验动物

21只近交系Wistar大鼠(体重120±20 g,鼠龄约2个月,均为雌性,普通级),购于中国医科大学实验动物中心;荷Lewis肺癌模型鼠:购自中国医学科学院药物研究所。

1.3 动物模型复制与分组处理

将荷Lewis肺癌鼠处死,选择生长良好的瘤组织,剪成小块,用200目不锈钢筛网摩擦,过滤制成单细胞悬液,用细胞计数板测得活瘤细胞计数约为2×106/mL,接种于21只大鼠右腋皮下,每只0.6 mL。待瘤体直径长至1.5～2 cm时,随机取6只大鼠进行预实验:先给予复方碘溶液,行甲状腺封闭,每次1滴,每天3次,连续7 d,此后采用灌胃法,一次性分别给予370～2 220 kBq131I-His-IN,于 24、48、72 h 进行SPECT显像,确定最适剂量。预实验结束后,将另外15只大鼠平均分为3组,同样采用灌胃法一次性给予 1480 kBq131I-His-IN,分别于 24、48、72 h进行SPECT显像。

1.4 SPECT显像

显像前夜所有模型鼠均被禁食,可自由饮水。将大鼠俯卧位固定后应用SPECT进行扫描。扫描条件:高能平行孔准直器,静态平扫,矩阵为128×128;能峰为 364 keV;窗宽为20%;放大2.5倍。利用感兴趣区(ROI)技术计算肿瘤部位的放射性计数。

1.5 病理检查

取出肿瘤组织用10%中性甲醛缓冲液固定,石蜡切片、做HE染色。光镜下观察各治疗组肿瘤细胞的坏死情况。

1.6 统计学处理

2 结果与讨论

2.1 SPECT显像结果

荷瘤鼠灌服131I-His-IN后,其SPECT显像结果示于图1。大鼠各部位不同时间的放射性摄取及肿瘤与非肿瘤的放射性摄取比(T/NT)分别列于表1和表2。

由图1可以看出,注药后24 h时,胃、膀胱、肿瘤区域放射性核素浓度较高,24 h后各区域浓度呈下降趋势,但是肿瘤区域相对放射性浓度增高,表明吲哚美辛在胃及膀胱进行摄取及排泄,而在肿瘤区域吲哚美辛有选择性吸收及储留作用。

由图1还可以看出,各显影区域放射性核素浓聚程度随时间的延长而降低,注药后24 h,肿瘤区域、胃区、膀胱区域显影,其中以胃的放射性核素分布最为浓聚,膀胱和肿瘤区域次之;注药后48 h,各显像区域放射性核素分布较前明显稀疏,肿瘤区域相对放射性核素分布浓聚超过膀胱区域;注药后72 h,仅可见少量放射性核素分布于各区域,此时肿瘤区相对放射性核素浓聚度最高。这表明131I-His-IN主要经泌尿系统排泄,在胃部组织中有一定程度摄取,而在肿瘤组织中有选择性地吸收及储留。

由表1可见,131I-His-IN在肿瘤、胃、膀胱的不同时间的放射性摄取具有统计学意义,p＜0.05。这也证实了图1的显像结果。

由表2可见,肿瘤与非肿瘤组织的 T/NT也具有统计学意义,p＜0.05。说明131I-His-IN能释放γ射线,使肿瘤组织能进行 SPECT显像。

图1 荷瘤大鼠灌服131 I-His-IN后的SPECT显像图

表1 SPECT显像各部位不同时间放射性计数(,n=5)

表1 SPECT显像各部位不同时间放射性计数(,n=5)

注:各组间比较,p＜0.05

时间/h放射性计数肿瘤 胃 膀胱24 679.4±45.8 3 108.8±194.2 1 034±131.7 48 394.6±18.8 506.8±38.6 218.4±14.8 72 105.4±13.8 60.4±3.2 19.4±7.7

表2 不同时间肿瘤与非肿瘤的放射性计数比(T/NT,n=5)

2.2 肿瘤的病理检查结果

肉眼观察肿瘤组织可见肿瘤中心坏死组织随时间延长而有所增多。光镜下观察病理结果示于图2。由图2可以看出,HE染色切片镜下见肿瘤细胞有不同程度的坏死,各组肿瘤细胞的坏死部分随时间推移而有所增多,并且出现了一定量的碎裂细胞,细胞碎裂数目逐渐增多。这也表明肿瘤区域对IN及131I-His-IN有选择性吸收及储留作用,131I-His-IN是将IN作为载体特异地聚集于肿瘤细胞内或其表面,131I释放出的射线(β粒子)的电离辐射生物效应作用于肿瘤,杀伤或杀死肿瘤细胞,因此131I-His-IN具有双重治疗肿瘤作用。

图2 荷瘤大鼠灌服131I-His-IN后肿瘤组织病理检查结果a——服药后 24 h;b——服药后48 h;c——服药后 72 h

4 结 论

131I-His-IN能选择性在肿瘤组织浓集并长时间储留,可以作为显像和治疗用放射性药物进行深入研究。

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