卵黄免疫球蛋白防治仔猪腹泻的应用

（江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州 225300）

卵黄免疫球蛋白(卵黄抗体)制剂，是指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的免疫球蛋白，可抑制致病性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等肠道致病菌的生长。鸡蛋中富含IgY，利用超免疫鸡可将特异性抗体稳定持续地传递至卵黄中的特性，采用生物技术从产蛋鸡卵黄中制备特异性多克隆抗体，具有成本低，产量高的特点。IgY广泛用于动物保健和疾病治疗。

一、lgY的抗病作用机理

IgY可与特异性菌毛抗原结合减少或阻断特异性菌毛与宿主肠上皮的结合，使产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)不能在小肠定植，不能积累大量的肠毒素，从而防止腹泻的发生；抗特定病原菌的IgY可直接粘附于病原菌的细胞壁上，改变病原菌细胞的完整性，直接抑制病原菌的生长；一部分抗特异病原的IgY在肠道内被消化酶降解为结合片段(Binding fragment)，这些片段含有抗体的末端高度可变的小肽，即Fab部分。这些小肽很容易被肠道吸收，进入血液后能与特定病原菌的粘附因子相结合，使病原菌不能粘附易感细胞而失去致病性，从而可对非肠道病原菌发挥抑菌作用。这些Fab部分还能与宿主血液中球蛋白末端相结合，使其免遭机体破坏。

IgY可以中和仔猪大肠杆菌毒素，从而起保护作用(Yokoyama等，1992)。体外试验表明，经喷雾干燥的含抗K88菌毛抗体的蛋黄粉能阻碍K88在猪小肠粘膜的粘附(Jin等，1994)。IgY具有被动免疫效果，是由于它能像初乳中的抗体一样通过小肠上皮进入机体，同时IgY和抗原的亲和力远比哺乳动物抗体和同种抗原的亲和力强(Yokoyama等，1993),鸡抗猪大肠杆菌IgY能明显抑制大肠杆菌在猪肠粘膜上的粘附作用，抑制大肠杆菌在体内的生长(Yokoyama等，1992)。

二、IgY作为新型饲料添加剂的应用

宋迎春对猪的研究表明，饲喂含抗尿素酶IgY显著提高了饲料转换率，日增重也得到了改善。Yokoyama等证明，将抗产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的IgY饲喂新生的小猪和小牛，均可防止ETEC引起的腹泻，起到被动保护作用。Yokoyama等(1992)研究证实，口服抗致病性大肠杆菌K88、K99、987P的IgY可防止新生仔猪发生腹泻。罗函禄（1997）研究表明，高免IgY添加于饲粮中，防治仔猪轮状病毒腹泻取得了满意的效果。

三、IgY预防仔猪腹泻的的免疫学效用

徐福洲等(2002)用K88、K99、987P标准菌株制备单价菌体油乳剂灭活苗，免疫产蛋鸡，将提纯后的IgY对攻毒的新生仔猪口服治疗，结果显示治疗组未出现死亡病例，而对照组仔猪死亡率为33%～67%。李国 平 等 (2002)用 K88、K99、987p和F41标准菌株制成多价菌体油乳剂灭活苗，对蛋鸡免疫后收集高免卵黄，提纯后精制成抗大肠杆菌特异性高免IgY并应用于临床。结果表明:每头新生仔猪口服2～4 ml该IgY可有效预防仔猪大肠杆菌性腹泻，且安全性很好。高云英等（2003）用K88、K99、987P标准菌株和地方分离菌株制成多价菌体油乳剂灭活苗，免疫商品蛋鸡，收集高免蛋制备多价IgY。经预防、攻毒试验及临床治疗效果观察，对新生仔猪免疫保护率可达90%以上，3日龄仔猪攻毒保护率达98%以上，3～11日龄仔猪临床治愈率达95%以上。

李学伍等（2000）用K88、K99、987P和F41菌毛蛋白苗免疫产蛋鸡，将高免卵黄液去脂喷雾干燥后对新生仔猪进行口服治疗，结果表明多价IgY粉可使攻毒仔猪获得较好的保护，保护期持续10～14 d，对自然发病的仔猪治愈率高达97.7%。Yokoyama等（1992）将提纯的ETEC宿主特异性菌毛K88、K99、987P制成单价菌毛蛋白苗，免疫蛋鸡获得IgY粉末，ELISA检测结果表明，抗K88、K99、987P的 IgY能够特异性地与相应的菌毛抗原作用，用IgY对不同ETEC菌株攻毒的新生仔猪进行口服治疗，治疗组仔猪服用效价为625和2 500的抗体后全部存活，而对照组仔猪死亡率超过80%。Jin等（1999）将一种K88+ETEC地方株培养后，提取和纯化菌毛，与佐剂充分乳化免疫蛋鸡，收集高免卵黄并喷雾干燥制成IgY粉，体外试验表明:该IgY粉能阻碍K88+粘附到猪小肠黏膜上，而且能迅速与该菌株结合，15 min即可使仔猪获得最大程度的免疫保护。Marquardt等(1999)在此基础上，采用同一抗原免疫母鸡后获得抗K88菌毛的IgY，用于治疗K88+攻毒的新生(3日龄)和断奶后(21日龄)仔猪，结果表明:新生仔猪用IgY治疗后24 h内均被治愈，而用安慰剂(不含K88抗体的卵黄粉)治疗的仔猪继续腹泻死亡率达62.5%；断奶仔猪饲喂IgY后仅出现短暂腹泻，未出现死亡病例且体重明显增加，而对照组出现严重腹泻和脱水症状，且48 h内即有仔猪死亡。在商业性猪场的饲粮中添加抗K88、K99菌毛的IgY，能降低早期断奶(14～18日龄)仔猪的腹泻发生率。

四、IgY对仔猪腹泻的治疗效用

IgY与母猪初乳中的抗体具有类似的功能，且与菌毛抗原的亲和力远远超过母乳和高免血清中抗体与抗原的亲和力，对控制肠道疾病更有利。由于仔猪消化系统尚未发育完全，口服的IgY能够很容易透过新生仔猪的肠壁，且在仔猪整个消化道内均能保持活性，如果吸收初乳的同时口服特异性IgY，被动保护作用将显著增强。

肖驰等(1998)利用IgY预防仔猪大肠杆菌性腹泻，具有很好的效果，对仔猪黄痢的治愈率高于庆大霉素、土霉素和痢特灵。李学伍等(2000)将抗仔猪大肠杆菌IgY制成干粉，对发病仔猪的治愈率最高可达97.7%，比药物治疗的治愈率高21.2%。李国平等(1998)对已发病的黄、白痢仔猪肌注高免卵黄液4 ml，连续2次，发现有明显的治疗作用，且未发现毒副作用。

Yokoyama等(1992)研究结果表明，给新生仔猪口服1012CFU/ml的K88, K99，和 1010CFU/ml的 987P,然后口服4 ml效价分别为1:156,1:625和 1:2500的 K88、 K99和987PIgY液。在IgY效价高于1:625以上时，能有效防治仔猪腹泻，降低死亡率，改善粪便的粘稠度。

Imberechts等给断奶仔猪饲喂抗F18的鸡IgY，每只猪每天给予30 g冻干的全鸡蛋，在开始后的16 h所有的仔猪给饲大肠杆菌。饲喂鸡IgY蛋仔猪大肠杆菌的排出减少，腹泻率下降，体重增加。李国平等(2002)试验证明，初生仔猪每头注射或口服2～4 ml精制鸡抗猪大肠杆菌IgY可有效预防仔猪大肠杆菌性腹泻，且在出生36 h内IgY不被分解，口服和注射效果无差异。

陈鲁勇等选用21日龄的早期断奶仔猪160头，每组80头，分别饲喂基础日粮和基础日粮加0.1%卵黄抗体粉。结果表明：21～35日龄阶段，试验组比对照组平均日增重高15 g（P<0.05），采食量高 24 g/d（差异不显著），料重比下降，腹泻率下降 9.9%（p<0.05）；35～ 70日 龄阶段，试验组比对照组平均日增重高65 g（差异不显著），采食量下降15 g/d，料重比低，腹泻率下降1.5%（p<0.01）。张守全等、王建明等的研究也得出相似的结论，证实了IgY防治仔猪细菌性腹泻效果确切。

宋维平等用猪流行性腹泻病毒对仔猪进行攻毒实验，对腹泻仔猪口服IgY液治疗，研究结果也表明治疗组腹泻症状明显减轻，多数在5 d后恢复正常，死亡率仅是16.7%；而对照组呈水样腹泻，最后脱水衰竭而死，死亡率为100%，二者的极显著差异表明，IgY对病毒性腹泻同样具有良好疗效。

总之，随着对卵黄免疫球蛋白研究的不断深入，这种新型生物活性物质由于能够预防和治疗多种动物细菌性和病毒性疾病，并具有促生长作用，而且无任何毒副作用，在很大程度上可替代抗生素和化学合成药物，在未来的动物生产和兽医诊疗中必将有着更广阔的应用前景。

（略）