活血药、破血药对动脉粥样硬化大鼠血脂、血液流变学的影响

谢海波，莫新民，罗尧岳

（1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学,湖南 长沙 410007）

动脉粥样硬化(AS)是心脑血管疾病的主要病理基础之一，是一种常见病、多发病。根据AS的表现，中医可将其归为“血瘀”、“瘕结”等范畴，常采用活血化瘀药治疗。活血化瘀药有活血止痛、活血调经、活血疗伤、破血消癥之分[1]。总的来说，根据活血化瘀程度不同，可分为活血和破血两类。本研究选用活血药当归、川芎和破血药三棱、莪术，开展两类药对血脂和血液流变学的对比研究，探讨两者的作用差异，为临床处方选药提供实验依据。现将实验方法及结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 雄性Wistar大鼠，8周龄，体质量 （200±10）g，60只。由湖南中医药大学实验动物中心提供，合格证号：SCxk豫2005-001。

1.1.2 药物 当归、川芎、三棱、莪术均购于湖南中医药大学第一附属医院，常规煎煮，制成含生药0.18 g/mL的药液，5℃保存备用。

1.1.3 试剂 胆固醇由中国医药（集团）上海化学试剂公司提供（批号：20080923）；胆酸钠由上海蓝季科技发展有限公司提供（批号:080628）；维生素D3注射液由苏州第六制药厂生产（批号:070621）；丙基硫氧嘧啶由南通精华制药股份有限公司生产（批号:080701）；阿托伐他汀（立普妥）由大连辉瑞制药有限公司分装（批号:85837034）；猪油购自农贸市场。总胆固醇(TC)试剂盒：德国罗氏诊断有限公司提供（批号:11491458216）；甘油三酯(TG)试剂盒：德国罗氏诊断有限公司提供（批号:11730711216）；低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒：德国罗氏诊断有限公司提供（批号:04711220190）；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒：德国罗氏诊断有限公司提供（批号:04713214190）。

1.1.4 仪器 P800全自动生化分析仪：日本生产；T5-Ⅱ台式离心机：长沙平凡仪器仪表有限公司提供；SA-6000自动血流变测试仪：北京赛科希德科技发展有限公司提供；L500台式低速自动平衡离心机：湘仪离心机仪器有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 动物适应性饲养1周后按随机数字表法将60只大鼠分为5组，即空白组、模型组、活血药（当归、川芎）组、破血药（三棱、莪术）组、他汀组，每组12只。

1.2.2 造模方法 空白组每日给予普通饲料，其它各组大鼠首先腹腔注射维生素D370万IU/kg，分3次，每2 d注射1次，然后各组每日每只给予高脂饲料（2%胆固醇，0.5%胆酸钠，3%猪油，0.2%丙基硫氧嘧啶和94.3%基础饲料）20 g，连续喂饲12周[2-3]。随机抽取2只大鼠，处死后速取主动脉，浸入4%多聚甲醛溶液中，固定48 h，石蜡包埋切片，HE染色，光学显微镜下观察发现已形成粥样硬化斑块，提示造模成功。

1.2.3 给药剂量及方法 造模成功后，灌胃给药，每天1次，灌胃体积10 mL/kg，空白组、模型组灌服等体积白开水；活血药组灌服当归、川芎煎液，给药剂量为1.8 g/（kg·d）；破血药组灌服三棱、莪术煎液，给药剂量1.8 g/（kg·d）；他汀组灌服阿托伐他汀各组给药体积10 mL/(kg·d)，给药剂量0.001 8 g/kg，均按60 kg成人体表面积换算，连续给药4周。

1.2.4 血脂检测 实验结束时，大鼠在禁食8 h（不禁水）后，断头采血，离心后取血清，用酶法在全自动生化分析仪上测定TC、TG、HDL-C、LDL-C。

1.2.5 血液流变学的检测 在大鼠禁食8 h（不禁水）后，断头采血4 mL，采用SA-6000自动血流变测试仪测全血黏度、血浆黏度。注意采血后及时送检。

1.3 统计学分析

采用SPSS 13.0软件包进行分析处理，所有数据均以“±s”表示，组间比较方差齐时用方差分析，方差不齐时用秩和检验。

2 结果

2.1 活血药、破血药对各组大鼠血脂的影响

模型组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C明显高于空白组，差异具有统计学意义（P＜0.01）；活血组、破血组、他汀组血清TC均低于模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05），三者组间比较无统计学差异；活血组、破血组血清TG均低于模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05），两者组间比较无统计学差异；破血组血清LDL-C低于活血组，但两者组间无统计学差异。结果见表1。

2.3 活血药、破血药对各组大鼠血液流变学变化的影响

模型组全血黏度（低切、中切、高切）、血浆黏度明显高于空白组，差异具有统计学意义（P＜0.01）；活血组、破血组、他汀组全血黏度（低切、中切、高切）、血浆黏度低于模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05），三者组间比较无统计学差异。结果见表2。

表1 活血药、破血药对各组大鼠血脂的影响 （n=10，±s，mmol/L）

表1 活血药、破血药对各组大鼠血脂的影响 （n=10，±s，mmol/L）

注：与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01；与活血组比较*P＜0.05，**P＜0.01。下表同。

组别空白组模型组他汀组活血组破血组药物剂量（g/kg）——0.0018 1.8 1.8 TC 1.59±0.39△△** 3.97±0.77* 2.95±0.46△2.85±0.55△2.62±0.46△△TG 0.45±0.11△△1.06±0.36* 0.74±0.22 0.55±0.21△0.52±0.16△△LDL-C 0.24±0.05△△** 1.22±0.40 0.75±0.15△0.90±0.33 0.68±0.13△HDL-C 1.52±0.36△△2.49±0.43 2.06±0.22 1.89±0.48 2.09±0.32

表2 活血药、破血药对各组大鼠血液流变学变化的影响 （±s，n=10，mpa·s）

表2 活血药、破血药对各组大鼠血液流变学变化的影响 （±s，n=10，mpa·s）

组别 药物剂量（g/kg）全血黏度（低切）全血黏度（中切）全血黏度（高切） 血浆黏度空白组模型组他汀组活血组破血组——0.001 8 1.8 1.8 12.06±1.30△△15.40±1.98* 12.30±1.58△12.51±1.91△12.68±1.79△6.28±0.65△△8.05±0.94* 6.49±0.78△△6.59±0.73△6.74±0.82△4.59±0.47△△6.65±1.03* 5.08±0.70△5.09±0.78△5.15±0.94△1.34±0.22△△** 1.95±0.17** 1.72±0.14△1.68±0.14△△1.73±0.12△

3 讨论

大量的流行病学、临床及实验研究证实，血液中TC含量增高与AS发生的关系密切，是冠心病（CHD）发病率和致死率增高的独立危险因子。LDL是TC转运并进入细胞的主要载体。LDL受体是细胞表面的一种糖蛋白，在人体代谢中它通过介导细胞摄取LDL及增加LDL的降解来调节血浆TC水平。目前，已经把降低LDL-C作为高胆固醇血症患者治疗的主要目标。HDL颗粒具有胆固醇逆转运的作用，直接或间接将胆固醇转送至肝脏降解，以减少胆固醇在动脉壁的沉积。血清HDL-C含量降低是CHD的独立危险因素，TG的增高亦是CHD的独立危险因素。有学者[4-5]研究表明CHD血瘀证患者TG和LDL-C水平明显增高。亦有人[6]研究认为血瘀证是一种因血液的流动性和黏性异常而引起的血流量紊乱症，与血液流变学异常改变密切相关。有学者[7]提出血液流变学已成为血瘀证诊断与临床疗效客观评定的核心指标。

魏会平[8]等探讨了当归注射液对大鼠实验性弥散性血管内凝血（DIC）血液动力学的影响，结果表明：当归注射液可明显降低DIC时的血黏度增高，抑制血小板黏附和聚集，增强红细胞的变形性。王普霞[9]等通过大鼠血瘀模型血液流变性及凝血试验，证实莪术不同炮制品均具有一定的抗血小板聚集、抗凝血及调节血液流变性作用。党春兰等[10]研究了中药三棱对血液流变学指标的影响，结果表明三棱组的全血黏度、血细胞压积以及血沉速率与空白对照组相比均有明显减小。姜华[11]等观察了川芎微乳对气虚血瘀型大鼠血液流变学指标的影响，发现川芎微乳可明显降低气虚血瘀型大鼠全血黏度和全血还原黏度、红细胞比容以及红细胞聚集指数，且该作用呈剂量依赖性。阿魏酸是当归的有效成分之一，现代药理研究表明阿魏酸具有抑制肝合成胆固醇的作用，可竞争性抑制肝细胞中羟戊酸-5-焦鳞酸脱氢酶活性，同时通过抗氧化、自由基清除以及抗血栓3种作用相互协调产生抗动脉粥样硬化的作用。

本研究模型组血脂及血液流变学各项指标明显高于空白组，说明经高脂喂饲可以引起大鼠血脂和血液流变学的改变，与目前的文献报道相符。活血药（当归、川芎）、破血药（三棱、莪术）在降TC、TG方面无明显差异，破血药（三棱、莪术）降低LDL-C的幅度大于活血药 （当归、川芎），但未显示统计学差异。活血药（当归、川芎）、破血药（三棱、莪术）均能降低AS大鼠全血黏度（低切、中切、高切）、血浆黏度。

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