赵静夫 张淑梅 张国财 于淑芳 赵晨飞 程 功 王月杰
1.黑龙江农垦林业职业技术学院;2.东北林业大学;3. 黑龙江大学;4.吉林松原乾安县林业局
可控循环生物磁化水在平菇生产中的应用
赵静夫1张淑梅1张国财2于淑芳1赵晨飞3程 功4王月杰2
1.黑龙江农垦林业职业技术学院;2.东北林业大学;3. 黑龙江大学;4.吉林松原乾安县林业局
经试验确定了制备平菇液体菌种的最佳培养配方;采用0.25T磁处理水配制平菇液体菌种效果最好,可以提高菌种的品质和缩短摇床时间1~2d,提高淀粉酶活性16%、羧甲基纤维素酶活性75%、半纤维素酶活性55%、漆酶活性94%、多酚氧化物酶活性152%。
循环生物磁化水;平菇;酶活性测定;增产
可控循环生物磁化水应用在平菇的制种、拌料、喷浇过程中,通过采用磁处理水,达到平菇增产的目的。课题组于2008~2009年经过反复试验,确定可以应用于平菇实际生产的最佳方法,提高了菇质水平,实现了降低成本的目的。现将试验结果简述如下。
平菇菌种由东北林业大学森保学科提供;磁水处理器(大禹活水宝)由哈尔滨大禹磁处理开发有限公司提供;循环式磁水机(自行设计制造),其主要由磁水处理器、循环水泵、水箱三部分构成。
首先,用磁处理水对平菇液体菌种培养基进行单因子试验,筛选出平菇的最佳磁化水液体菌种培养基。然后,用最佳磁化水液体菌种进行摇床培养,测定液体培养过程中的平菇分泌的胞外酶,接着用磁处理水拌料栽培平菇,测定栽培过程中平菇胞外酶的活性。采用统计学的方法对试验测得数据进行分析,最后对磁处理水的作用机理做进一步的探讨。
2.1 平菇磁处理水液体菌种筛选试验
配制母种培养基:斜面及平板培养基(PDA培养基)、平菇液体菌种培养基。将3种摇瓶培养基装入三角瓶中,进行湿热灭菌,每种3个重复。然后置振荡器振荡培养,得到磁化水液体菌种,分别测定菌种菌球生长指标:菌球直径、菌球干重、菌球密度、菌丝长速。
2.2 液体菌种培养阶段的酶活性测定试验
(1)测定淀粉酶活性:在试管中加入0.5%可溶性淀粉溶液(pH=4.8、0.1M NaAC-HAC缓冲液)1.5mL,再加稀释10倍粗酶液0.5mL,混匀,于38℃水浴保温30min,取出后立即加入DNS试剂1.5mL,煮沸5min后取出,冷却后加入蒸馏水21.5mL,混匀,测520nm处OD值,以煮沸灭活15min的酶液作对照(3个重复)。
(2)测定羧甲基纤维素酶活性:在试管中加入0.5%的羧甲基纤维素钠溶液(用pH=4.6、0.1M NaAC-HAC缓冲液配制)1.5mL,加稀释10倍的粗酶液0.5mL,50℃水浴保温30min,取出后立即加入DNS试剂1.5mL,煮沸5min,取出,冷却后加入蒸馏水21.5 mL,混匀,测520nm处的OD值,以煮沸灭活15min的酶液作对照(3个重复)。
(3)测定半纤维素酶活性:在试管中加入0.5%的木聚糖溶液(用pH=4.6、0.1M NaAC-HAC缓冲液配制)1.5mL加稀释10倍的粗酶液0.5mL,50℃水浴保温30min,其后操作与纤维素酶活性测定相同。
2.3 磁处理水拌料栽培的酶活性测定试验
每隔5天取培养料5g用25mL水浸泡,捣碎,在25℃浸提4h,用4层纱布过滤,离心(4000r/min,5min),上清液为粗酶液。另一份于80℃烘干,称重,测定漆酶活性和多酚氧化物酶活性。
经试验确定了制备平菇液体菌种的最佳培养配方为:玉米粉2%;蛋白胨1%;KH2PO40.05%;MgSO40.05%;可溶性淀粉5%。采用0.25T磁处理水配制平菇液体菌种效果最好;采用0.25T磁处理水配制平菇液体菌种,可以缩短摇床培养时间1~2d;可以提高淀粉酶活性16%、提高羧甲基纤维素酶活性75%、提高半纤维素酶活性55%;采用0.25T磁处理水培养料栽培阶段,提高漆酶活性94%、提高多酚氧化物酶活性152%、提高羧甲基纤维素酶活性53%、提高半纤维素酶活性9%。
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[J].食用菌.2003 ,(6):34
10.3969/j.issn.1001-8972.2010.14.039
黑龙江省农垦总局十一五重点攻关项目(HNKXIV-07-06-05a)
赵静夫:高级工程师;
张淑梅:教授,博士,黑龙江农垦林业职业技术学院;
张国财:教授,博士,东北林业大学。