规模猪场口蹄疫O型合成疫苗免疫程序检测

周志平 朱晓路 范坤晓 周继勇

我国规模猪场主要使用O型来活疫苗免疫，近年来随着O型合成肽疫苗的上市，因其副作用小、免疫效果较好而在猪场得到越来越多的试用。

（1）试验分组：将怀孕母猪分为试验组和对照组，每组10头，分别用合成肽苗和浓缩苗免疫，跟踪观察其所产仔猪至70日龄抗体消退情况。仔猪70日龄开始一部接种合成肽疫苗，并分为3组，每组8头，即70日龄首次免疫组、70～100日龄二次免疫组、70～100～132日龄3次免疫组，观察免疫抗体产生情况。

（2）免疫程序：母猪：产前45d首免、产前17d二免。浓缩苗肌肉注射3.5ml/头合成肽苗肌肉注射2.0ml/头。仔猪：70日龄肌肉注射1.5ml/头；70、100日龄分别肌肉注射1.5ml/头；70、100、132日龄分别肌肉注射1.5ml/头。

（3）饲养管理：怀孕母猪笼养限饲，仔猪26日龄断奶即转保育舍饲养30d，后转育成舍饲养50d，再转入育肥舍饲养至出售。保育舍采用半漏缝地面、育成开始均采用水泥地面栏位饲养，自由采食，自动饮水器饮水。

（4）采血日龄：母猪首免前1d、二免后15d，仔猪30、50、70、100、132、176日龄。每次采集血样后凝固分离血清并冷冻保存，全部血样采集结束后一起检测。

（5）检测方法：根据VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒说明书进行，VP1结构蛋白抗体ELISA的抗体效价≥25为合格，即将血清作32倍稀释呈阳性为合格。并计算样品吸光值与临界值比值分析结果。正向间接血凝方法（IHA）检测O型口蹄疫抗体方法参照《口蹄疫诊断技术》（NY/SY150-2000），以抗体效价27为合格。全部血清样品同时用上述两种方法检测，比较两者结果。

（6）结果：① 两种方法均检测到两组母源抗体的阳性率及数值随日龄增长而逐渐下降，但消失的速率有明显差异。试验组抗体阳性率VP1检测至70日龄降到50%、IHA检测至30日龄降到25%，对照组VP1检测至50、70日龄逐渐降到58.33%和25%、IHA检测至30、50日龄降到91.67%和25%。同时可见，用VP1检测两组的抗体均要比IHA检测的敏感性好，阳性率下降较IHA检测的要慢，试验组至少要慢40d，对照组慢20d。根据VP1检测结果，试验组首免可定在70～75日龄，对照组首免可定在50～55日龄。IHA检测浓缩苗免疫抗体有较好的敏感性，检测合成肽疫苗抗则不理想。② 用VP1检测3个组的阳性率、比值和用IHA检测的阳性率、对数值在首免后都呈现相反的趋势。在浓缩苗或合成肽苗免疫的母抗基础上，接种一次合成肽疫苗后均能迅速获得较高的阳性率，至176日龄，3个组之间在阳性率上几乎没有差异。

3个组在70日龄首免后其S/C比值均逐渐上升，尤其是首免后30d时上升2.5倍以上，之后仍小幅度上升，至176日龄时以第一组比值最高为9.06、第二组次之为8.68、第三组最低为8.47，组间差异不明显。70日龄开始用IHA检测已不显示阳性反应，对数值虽总体呈逐渐下降趋势，但实际上较多样本对数值已小于1，已和VP1检测结果大相径庭。可见IHA方法不适用于合成肽疫苗免疫抗体的检测。