大肠埃希菌耐药性分析

周亚丹　胡艳文　张　敏

[摘要] 目的分析产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌(EC)对抗菌药物的耐药性,为指导临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法 用纸片扩散法(K-B法)对大肠埃希菌进行14种常规抗菌药物的敏感性试验,产超广谱β-内酰胺酶的筛选按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片确证法进行。结果2003～2006年从临床标本中共分离到大肠埃希菌153株,其中产ESBLs阳性51株(产酶率33.3%),除亚胺培南外对其他13种抗生素均有不同程度耐药,头孢类药物耐药率较高。结论 齐齐哈尔市EC的耐药情况十分严重,应对EC进行耐药性动态监测,以指导临床科学使用抗菌药物。

[关键词] 耐药性; 超广谱β-内酰胺酶; 大肠埃希菌

[中图分类号] R378.21 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2009)27-117-02

近年来,大肠埃希菌已成为医院感染常见的条件致病菌,常引起尿路、呼吸道、血液、伤口感染,其中以尿路感染最为常见,其感染率呈逐年上升趋势。随着高效广谱抗菌药物的广泛应用,EC中某些菌株对头孢菌素、喹诺酮类及其他抗菌药物获得性耐药,且该菌可产生ESBLs酶。为了分析本市EC的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据,笔者对我院分离的153株EC进行了检测分析。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

大肠埃希菌153株来自我院2003年2月~2006年7月住院和门诊患者尿液、痰、咽试子、血、胸腹水、脓液等标本。质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603购自卫生部临床检验中心。

1.2 细菌鉴定

按《全国临床检验操作规程》鉴定,最后用法国生物梅里埃API-20E系统确证。

1.3 药敏试验

采用NCCLS推荐的K-B法进行、药敏纸片和M-H琼脂购自杭州天和微生物试剂有限公司。头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸纸片购自英国Oxoid公司。

1.4 ESBLs的检测

1.4.1 ESBLs初筛 选用头孢噻肟、头孢他啶、氨曲南(均为30μg/片)药敏纸片,用标准纸片扩散法测试抑菌圈的直径。采用NCCLS2002年版的标准进行判断。凡头孢他啶的抑菌环直径≤22mm,头孢噻肟或氨曲南≤27mm,均应高度怀疑产ESBLs株,进一步做确诊试验。

1.4.2 ESBLs确证试验 用头孢他啶(30μg/片)和头孢他啶/克拉维酸(30μg/10μg/片)、头孢噻肟(30μg/片)和头孢噻肟/克拉维酸(30μg/10μg/片),分别测试其抑菌环的直径(药敏纸片均为英国Oxoid公司产品)。当两种药物中任意一种加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌圈直径差≥5mm时,可确认为产ESBLs株。

1.5 统计学方法

数据统计采用SPSS13.0软件,率的比较采用χ2检验,α=0.05。

2 结果

见表1。

3 讨论

近年来革兰阴性杆菌引起的感染越来越多,EC主要引起泌尿系感染[1]。谭洁等[2]报道治疗单产ESBLs EC引起的感染可首选哌拉西林/他唑巴坦合用阿米卡星,特别适用于同时伴粒细胞减少的患者。本研究中产ESBLs EC对阿米卡星敏感率较高,而对不含酶抑制剂的哌拉西林具有较高的耐药性。本试验中产ESBLs的发生率为33.3%(51/153),说明EC对3代头孢菌素耐药的主要原因是产生ESBLs。

ESBLs是由质粒介导的能水解氧亚氨基β-内酰胺抗生素并可被β-内酰胺酶抑制剂(如克拉维酸等)所抑制的一类β-内酰胺酶。ESBLs可以通过接合、转化和转导等形式使耐药基因在细菌中扩散,从一个细菌传递到另一个细菌,甚至在不同的菌种之间传递[3]。因此产ESBLs菌可在医院内或医院间传播,极易引起暴发流行[4,5]。本组产ESBLs大肠埃希菌阳性率33.3%(51/153),对头孢菌素类、氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、复方磺胺呈多重耐药,耐药率显著高于非产ESBLs大肠埃希菌(P<0.01),可能与这些药物为本院常规用药、诱导产生耐药有关。本组结果表明亚胺培南、阿米卡星对产ESBLs大肠埃希菌具有很高的敏感性,建议治疗EC感染首选,但应注意阿米卡星的肾毒性。

细菌耐药性的增加在全球都是个难题,各地因使用的抗生素种类的不同和用药习惯的差异,产ESBLs大肠埃希菌分离率可能存在明显的不同。延缓细菌的耐药性的产生、延长抗生素的使用寿命,有赖于临床医生严格掌握抗生素使用指征。做好细菌耐药性监测,控制耐药菌株流行刻不容缓。

[参考文献]

[1]张秀珍. 当代细菌检验与临床[M]. 北京:人民卫生出版社,1999:96.

[2]谭洁,林汉冲. 哌拉西林/他唑巴坦联合阿米卡星治疗粒细胞减少伴发热33例疗效观察[J]. 苏州大学学报,2003,23:453-454.

[3] 俞云松. 超广谱β-内酰胺酶研究进展[J]. 中华医学杂志,2006,9(86):641-644.

[4]崔岩,沈定霞,周贵民. 产超广谱β-内酰胺酶产酸克雷伯菌的医院感染流行分析[J]. 中华检验医学杂志,2002,25(5):277-280.

[5]陈茶,黄彬. 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药特性[J]. 中华医院感染学杂志,2002,12(1):73-74.

(收稿日期:2009-03-02)