基于ＨＰＬＣ法测定不同六味地黄丸中丹皮酚溶出度的研究

周　灿

【摘要】 目的 测定不同六味地黄丸，为患者选择该药作出判断依据。方法 利用高效液相色谱法测定不同六味地黄丸中丹皮酚的溶出度。结果 被测六味地黄丸溶出量偏低，不同厂家之间差异较大。结论 建议定期对丸剂进行溶出度测定，以期为临床提供有指导意义的质量标准。

【关键词】 HPLC法；六味地黄丸；丹皮酚；溶出度

六味地黄丸是由熟地、山茱萸、山药、泽泻、丹皮、茯苓6味中药组成，具有滋补肾阴之功效，是治疗肾阴不足的基本方药，同时它对多形核白细胞的免疫功能有明显的双向调节作用，且具有一定的防癌作用。因为其价廉物美，该药在我国市场上广泛使用。为此，笔者收集了5种市售量多的六味地黄丸品种进行溶出度测定，来摸索评价该制剂的内在质量，为患者选择该药作出判断依据。

1 材料

1.1 仪器PJ-3片剂四用测试仪(天津市国铭医药设备有限公司)，岛津高效液相色谱仪(LC-10AT泵，SPD-10A紫外监测器)，N-2000色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所)，VP-ODS色谱柱(150L×4.6)。

1.2 试药 丹皮酚对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号110708-200505)；收集市售的5个不同厂家的六味地黄丸，A为水蜜丸(批号7033279，规格 200 mg，北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂)，B、C、D、E为浓缩丸(B：批号0801140，河南省宛西制药股份有限公司；C：批号20071247，九芝堂股份有限公司；D：批号071101，修正药业集团通化通药制药股份有限公司；E：批号080201，江苏康缘药业股份有限公司。规格均为每8丸相当于原药材3 g)；甲醇为色谱纯，水为二级纯水，其他试剂为色谱醇。

2 方法与结果

2.1 色谱条件根据药典，将丹皮酚含量作为六味地黄丸质控指标。色谱柱为VP-ODS色谱柱(150L×4.6)；流动相：甲醇-水(70∶30)，检测波长274 nm，柱温：35℃，流速1.0 ml/min，进样量20 μL，按外标法峰面积定量。

2.2 标准曲线的制备 精密称取丹皮酚适量，加入甲醇溶解并稀释成130 μg/ml作为对照品溶液。以甲醇分别稀释成浓度为0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，16，32 μg/ml的丹皮酚工作液，分别按2.1色谱条件进样，以峰面积和含量回归得到方程：丹皮酚y=83345.3x-716，r=0.9999 (n=7)。表明丹皮酚在0.5~32 μg/ml与峰面积有很好的线性关系。

2.3 精密度试验 分别精密取对照品溶液20 μL分别注入液相色谱仪，按2·1色谱条件进样测定，得丹皮酚的峰面积和保留时间RSD分别为2.3%，1.5% (n=6)。表明精密度良好。

2.4 稳定性试验 取同一批样品溶液，分别在0，2，4，5，6，8 h进样测定，结果丹皮酚的峰面积和保留时间RSD分别为2.43%，0.17% (n=6)。表明稳定性良好。

2.5 重复性试验 取同一样品粉末6份，各约0.5 g，精密称定，制备成供试品溶液，并分别进样测定，结果丹皮酚的峰面积和保留时间RSD分别为2.4%，0.11% (n=6)。表明重复性良好。

2.6 回收率测定 精密称定已知含量的六味地黄丸6份，每份约0.45 g，精密取130 μg/ml丹皮酚对照品溶液1 ml，再补加流动相稀释至适当浓度，制备成供试品溶液，测定丹皮酚含量，计算得丹皮酚平均回收率为99.0%，RSD2.2%。

2.7 样品丹皮酚含量测定 根据药典方法并稍作改进，测定六味地黄丸丹皮酚总含量，得丸A，B，C，D，E的丹皮酚含量分别为2.60，2.42，2.15，2.53，3.67 mg/g。

2.8 溶出度测定 根据药品说明书单次服用剂量及药典关于丸剂溶散时限的规定，取六味地黄丸(浓缩丸)8粒和六味地黄丸(水蜜丸)30粒，精密称量，按药典2005年版第二部溶出度测定法第一法，以水为溶出介质，转速为100 r/min，温度为37℃，分别于10，20，40，80 min定点取样5 mL(同时立即补充水5 mL)，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液20 μL按上述高效液相色谱法测定，根据回归方程计算出各时间丹皮酚量，并作为溶出量。以六味地黄丸丹皮酚总含量为溶出最大量100%。5个厂家六味地黄丸累计溶出量及累计溶出百分率见表1。

3 讨论

本文探讨了六味地黄丸溶出度测定方法，并收集了市售的5个不同厂家的产品。通过溶出度实验发现，丹皮酚的溶出量和累计溶出率不甚理想，且差异较大，80 min末只有C产品溶出达到50%，这必将影响产品药理作用的发挥。

参 考 文 献

[1] 国家药典委员会.中国药典.一部.化学工业出版社，2005.