退黄灵口服液质量标准研究与提高

庄　注　张鸿炼

【摘要】 目的 拟定退黄灵口服液的质量控制标准，进行研究与提高。并对大黄素进行含量测定。方法 按拟定的质量标准对其进行性状检查等质量研究，采用薄层色谱法对其有效成分进行鉴别；采用HPLC对大黄素、大黄酚进行测定；通过加速试验和常温考察两种方法对其初步稳定性进行预测。结果 本品分别在0、1、2、3个月，于温度37℃~40℃、相对湿度75%和常温下考察，本品的性状、鉴别、检查等均无明显变化；大黄素、大黄酚的测定，操作简便，准确，重现性好。结论 提高后的质量标准能更有效地控制本制剂的质量。

【关键词】退黄灵口服液；质量标准；稳定性考察

Improve the quality control standards of the Tuihuangling oral liquid

ZHUANG Zhu，ZHANG Hong-lian.The Central Peoples Hospital of Huizhou，Guangdong 516001，China

【Abstract】 Objective To the development of the Tuihuangling oral liquid quality control standards and research to improve.And carried emodin and chrysophanol determination.Methods To develop quality standards for their characters，such as checked the quality of research，used thin-layer chromatography for identification of its active ingredients; used HPLC for the determination of emodin and chrysophanol; by accelerating test and inspection methods at room temperature for its initial Predict stability.Results 0,1,2,3 in months，the temperature at 37℃~40℃，relative humidity of 75%and room temperature inspection，the characters of goods，identification，inspection，and so there was no significant change； the determination of emodin and chrysophanol，simple，accurate and reproducible.Conclusion The higher quality standards to better control the quality of this preparation.

【Key words】Tuihuangling oral liquid；Quality standards；Stability

新生儿黄疸是指新生儿体内胆红素过高而引起的一组疾病，严重时可导致新生儿神经系统受损引发胆红素脑病，影响新生儿智力发育，是严重威胁新生儿健康的“隐形杀手”。因此及早发现和治疗新生儿黄疸在优育学方面和提高人口素质方面具有极其重要的意义。退黄灵口服液是惠州市中心人民医院多年的临床验方，清热利湿、消炎解毒之功效显著，无不良反应，适用于新生儿黄疸。为使该制剂更加“安全、有效、质量可控”，拟对其质量标准进行整理和提高，对大黄素的含量进行测定，使之更有效地控制本制剂的质量。现将研究结果报告如下。

1 仪器与试药

1．1 仪器 AEG-120电子天平(日本岛津)；PHS-2C数字酸度计(上海虹益科学仪器有限公司)；定量毛细管(美国Drunmond)；高效液相色谱仪(美国Waters)包括Waters 510泵，Waters紫外检测器，Waters U6K进样器，SR2000色谱数据工作站(上海三锐)。

1．2 试药 退黄灵口服液(本院自制，药材购自惠州市卫康中药饮片配送中心)；精氨酸对照品、大黄素对照品、大黄对照药材(中国药品生物制品检定所提供)；硅胶G、硅胶H为薄层层析用(中国青岛海洋化工集团公司)；三氯甲烷、乙醇为色谱纯试剂；十八烷基硅烷键合硅胶；甲醇-0．1%磷酸溶液；其他所用试剂均为AR级。

2 处方与制备

2．1 处方 茵陈200 g,田基黄200 g,车前草200 g,板兰根200 g,大黄60 g,丹参50 g,龙胆草50 g，共制1000 ml。

2．2 制备

2．2．1 大黄照流浸膏与浸膏剂项下的渗漉法(附录10)，用50%乙醇作溶剂，浸渍24 h后进行渗漉，减压回收乙醇，得液①，备用。

2．2．2 将处方中其余茵陈等六味，加入热回流循环提取浓缩机组中，加水浸泡30 min后，煮沸，进行回流提取，一边回流一边浓缩，共4 h；浓缩至比重1．15~1．18(60℃)的膏体排出，待冷，加入乙醇，调含醇量至60%，充分搅拌均匀，静置24 h；过滤，滤取清液加入酒精回收器，回收乙醇并浓缩至比重为1．25左右(50℃~60℃)，得液②，备用。

2．2．2 将上述两液合并，加入单糖浆，最后添加纯化水至配制量，搅匀，滤过，分装，压盖，灭菌，即得。

3 质量标准

3．1 性状 本品为棕褐色的澄明液体；味甜、微苦。

3．2 鉴别

3．2．1 取本品10 ml，置于水浴中蒸干，残渣加稀乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液，作为供试品溶液。另取精氨酸对照品，加稀乙醇制成每1 ml含0．5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各1~2 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上(自然干燥)，以正丁醇-冰醋酸-水(19C∶C5C∶C5)为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点^[1]。

3．2．2 取本品10 ml，加盐酸1 ml，置水浴中加热30 min，立即冷却，滤液蒸干，残渣加水10 ml使溶解，再加盐酸1 ml，加热回流30 min，立即冷却，用乙醚提取2次，每次15 ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材1 g，加水煎煮30 min，滤过，滤液浓缩至10 ml，同法制成对照药材溶液。另取大黄素对照品，各加三氯甲烷制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5 μl，分别点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30℃~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15C∶C5C∶C1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点^[2]。

3．3 检查 相对密度：应不低于1．05；

pH值：应为4．0~6．0；

其他：应符合《中国药典》2005年版一部附录IJ合剂项下的各项规定。

3．4 含量测定 采用HPLC法测定退黄灵口服液中大黄素与大黄酚的含量,色谱柱为C₁₈柱(3．9 mm×150 mm,4 μm),流动相为甲醇-0．1%磷酸(85C∶C15),检测波长为254 nm。结果显示大黄素在0．028 6~0．142 8 μg范围内进样量与峰面积值有良好的线性关系(r=0．999 8,n=7),平均回收率为99．28%,RSD为0．83%(n=5);大黄酚在0．048 4~0．242 0 μg范围内进样量与峰面积值有良好的线性关系(r=0．999 9,n=7),平均回收率为99．75%,RSD为1．36%(n=5)。说明HPLC法测定退黄灵口服液中大黄素与大黄酚的含量,线性关系良好,准确可靠,灵敏度高,重现性好,可以作为退黄灵口服液中大黄素与大黄酚的含量测定方法^[3]。

3．5 稳定性考察 取退黄灵口服液留样品3批，分别于0、1、2、3个月，通过加速试验(条件：温度37℃~40℃，相对湿度75%)和常温考察两种方法对其外观性状、鉴别、检查等稳定性项目进行测定，结果本品性状、鉴别、pH、相对密度等，结果均符合规定，通过含量测定，大黄素、大黄酚的含量稳定性良好。

4 结论

退黄灵口服液质量标准提高的指导原则是在认真贯彻“科学、规范、实用”这一总的指导原则的基础上，根据本院的配制的实际情况而形成。提高后的质量标准针对方中的有效成分采用了薄层色谱鉴别法，该法专属性较强，简便实用，有效排除干扰成分的影响，较以前的化学鉴别法可靠，并且有快速、灵敏、成本低等优点；提高后的质量标准增加对有效成分大黄素、大黄酚的含量测定，该测定方法线性关系良好，准确可靠，灵敏度高，重现性好。与旧标准相比，提高后的质量标准能更客观、更全面及更灵敏地反映制剂质量的变化情况，这对指导该制剂今后的生产和质量控制，以及产品质量的稳定提高具有重要意义。

参考文献

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)化学工业出版社，2005：142.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).化学工业出版社，2005：17.

［3］ 刘起华,张萱,文谨.高效液相色谱法测定四黄膏中大黄素、大黄酚的含量.中国现代应用药学，2007,24(1)：66-68.