品种纯度鉴定技术及其发展等

李　蓉　烟　彬　邢惠梅　茹　鲜　晓　刚　艾合买提

20世纪50年代以前，品种纯度鉴定技术发展到了田间小区鉴定和田间检验方法。50年代后，国际种子检验协会开始提出种子检验室鉴定品种的可能性和价值。70和80年代发展了电泳技术、幼苗鉴定技术和快速鉴定技术。90年代开始注意计算机模拟分析系统和分子技术的应用。

1形态鉴定技术

1．1种子形态鉴定通过种子形状、大小、色泽、质地、表面的光与毛以及种子外表各部位的特征加以鉴别，以区分本品种与异品种。如，小麦可根据种子籽粒形状和颜色、粒质胚部性状、顶端茸毛的有无及分布，籽粒皱痕等来鉴别；玉米种子根据粒形、粒色、粒质、正面的长宽比及胚的凹陷程度来鉴别；棉花种子根据纤维长度、整齐度、棉籽形状、大小、颜色、短绒有无及多少等来鉴别。随着现代育种科学的发展，不同品种间种子外观形态的差异越来越小，靠區别种子形态上的差异来鉴定种子纯度也变得越来越困难。

1．2幼苗形态鉴定根据不同品种幼苗的独特性状进行检验，如幼苗芽鞘颜色、幼苗生长锥、子叶的形状、颜色、大小等。

鉴定途径有两种，一种是提供给植株以加速发育的条件(类似于田间小区鉴定，只是所需时间较短)，当幼苗达到适宜评价的发育阶段时，对全部或部分幼苗进行鉴定；另一种途径是让植株生长在特殊的逆境条件下，测定不同品种对逆境的不同反应来鉴别不同品种。该法简便、省时，比种子形态法的使用范围明显扩大，但能用于鉴别的性状仍不够多，且受环境影响较大，因此无法鉴别性状差异不明显的品种。

1．3植株形态鉴定(田间小区种植鉴定)该法是将一定量的作物种子在田间种植一个小区，单粒播种，不间苗、不定苗。设有标准样品作对照，在檀株的不同发育时期与标准样品进行比较对照。主要根据株形、株高片数、叶色、叶片宽窄、花药颜色等做出评判，从而对不同品种加以鉴别。田间小区种植鉴定方式多种多样，可在当地同季、当地异季或异地异季种植鉴定。该方法能够观察、比较的性状较多。结果准确、可靠。是目前解决种子质量纠纷中最具有法律效力的检测方法。缺点是费工、费时、鉴定周期长、费用高，而且此法受环境和人为影响较大，鉴定者的观察经验也制约着鉴定的准确性。

2快速鉴定技术

2．1苯酚染色法适用于小麦、大麦、燕麦、水稻等。将种子用苯酚染色，根据染色程度的差异来区分出不同品种。小麦根据颖果染成的颜色，大麦、燕麦观察内外稃染色深浅，水稻根据谷粒或米粒染色程度，来判定是本品种还是异品种。

2．2愈伤木酚专门用于大豆品种鉴别的方法。大豆种皮内具有过氧化物酶，不同品种由于遗传基础不同，过氧化物酶的活性不同，在一定条件下，溶液染色的深浅不同，依此区分不同品种。

2．3高粱种子氢氧化钾一漂白粉测定法根据高粱种皮或种皮下黑色素(单宁酸)有无的差异，区分高粱品种的方法。

2．4小麦种子的氢氧化钠测定法当红白皮不易区分(尤其是经杀菌剂处理的种子)时，可用氢氧化钠处理，根据种子浅色和深色加以区别。

2．5燕麦种子氯化氢测定法将燕麦种子放入氯化氢溶液浸泡，根据棕褐色(荧光种子)或黄色(非荧光种子)来鉴别不同品种的种子。

2．6燕麦种子荧光测定法应用波长360A紫外光照射，根据内外稃有无荧光或强弱进行鉴定。

3生化鉴定技术

目前，生化鉴定技术有蛋白质电泳法、色谱法鉴定、免疫鉴定技术等。其中，电泳法是品种纯度测定中较为快速准确的方法，是指利用电泳技术对供检样品的种子或幼苗的蛋白质进行分离、染色。形成电泳谱带的差异，并与标准品种相比较，从而鉴定品种纯度的一种方法。该法快速、稳定、重演性好，具有一定的使用价值，特别是作为种子营销过程的品种纯度快速验证方法。但对于某些遗传组成非常接近的品种，不易找到特异蛋白，采用蛋白质电泳难以发现特征带，不容易鉴别。

3．1同工酶电泳技术酶是生物代谢申的一种特殊蛋白质．同工酶是指同一生物体或同一组织中催化相同化学反应，结构不同的一类酶。其结构的差异来源于基因型的差异。在作物种子纯度鉴定中，常用的是多态性较强的脂酶和过氧化物酶，所用方法多为聚丙烯酰胺凝胶电泳法。该方法的缺点是，同工酶往往具有组织或器官特异性，即同一时期不同器官内同工酶的数目不同，某些同工酶在种子贮藏和萌发过程中，种类数目易随生活力和发育进程的变化而变化，加之种子萌发速度不一致，所以对品种纯度鉴定不利。此外，酶的提取和电泳条件较蛋白质要求严格，需在低温下进行。

3．2种子贮藏蛋白电泳技术种子中所含的贮藏蛋白质可分为清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白等。目前鉴定品种的常用电泳方法有：鉴定小麦和大麦品种醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳标准程序；鉴定小麦谷蛋白、豌豆属和黑麦草属的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准方法等。我国GB/T3543“农作物种子检验规程”已将“国际种子检验规程”的鉴定小麦和大麦品种的聚丙烯酰胺凝胶电泳标准参照方法列入应用。2001年农业部颁布了“玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定方法”(NY/T449－2001)。

4DNA分子标记鉴定技术

通过对品种DNA的多态性即DNA碱基序列的差异进行分析，从而鉴别不同品种。其检测对象是种子的DNA片段(基因)，没有器官的特异性，在植物体的各个组织、各个发育时期均可检测；不受环境的影响，不存在表达与否的问题；数量极多，遍及整个基因组，多态性丰富；准确性高；重复性好；分离出的样品DNA在适宜条件下可长期保存，这对进行追溯性或仲裁性鉴定是非常有利的。但DNA分子标记技术因所需仪器精密、药品昂贵，程序复杂等，还没有大规模的应用于品种纯度鉴定。

辣椒的贮藏保鲜技术

张彦生

由于辣椒生产的季节性，使得淡旺季矛盾较为突出，因此，搞好辣椒贮藏不仅可以调节市场的产销矛盾，也可增加经济收入。

1贮藏特性

1．1对低温的敏感性辣椒果实对低温比较敏感，当环境温度低于6℃时，若长期贮藏就可能产生冷害。辣椒受到冷害后，种子和花萼发生褐变，果皮色泽变暗，产生不规则的凹陷斑点，不能正常后熟，继而感染病菌，造成腐烂。

1．2对二氧化碳的敏感性一定浓度的二氧化碳对辣椒有保鲜、保绿作用，当二氧化碳浓度超过一定浓度时就会引起伤害，造成萼片褐变和果肉腐烂。不同品种以及不同产地的辣椒对二氧化碳的忍耐力不同，在实际操作中应掌握在2％以下为安全范围。

1．3易失水收获后的辣椒极易失水，使得果梗变干，果皮皱缩，所以要求贮藏过程中采取保湿措施。但是如果贮藏环境中湿度过大，特别是结露水过多，极易引起辣椒腐烂变质。

1．4易转红辣椒采收后有后熟过程，即山青绿色转为红色和黄色，由硬变软。控制转红的关键措施是控制温度。

2对贮藏条件的要求

2．1温度温暖潮湿地区种植的辣椒比寒冷干燥地区的辣椒对低温更敏感，同样晚秋季节采收的辣椒比夏季采收的辣椒耐低温能力强。晚熟品种比早熟品种耐低温。贮藏温度可根据不同地区而定，寒冷、干燥和晚熟品种一般可控制在7－8℃，夏季和潮湿地区采收的辣椒贮藏一般不低于9℃。相对湿度90－95％，过低果实易失水、萎蔫、果皮皱缩；过高又易引起腐烂。

2．2气体成分在实际贮藏中，可通过选择透气性好的保鲜膜和控制装果数量，来控制氧和二氧化碳的浓度，一般维持氧2－5％，二氧化碳1－2％，过量的二氧化碳可用消石灰来吸收。

3影响辣椒耐贮性的因素

3．1品种选择辣椒品种间耐贮性差异较大。果皮厚、表皮光亮、褶皱少、果实干物质含量较高、色泽浓绿的晚熟品种较耐贮藏，如茄门、世界冠军、巴彦、中椒4号等，早中熟尖椒类不耐贮藏。

3．2栽培管理果实采收后的生理状态，包括耐贮性和抗病性，是在田间生长条件下形成的。果实的生育特性、地区气候、土壤条件和管理措施等，都会对果实的品质及贮藏特性产生直接或间接的影响。因此，辣椒防腐必须从田间种植开始，在采收前的10－15天可喷施适当的杀菌剂，如甲基托布津、克菌丹、乙磷铝、代森錳锌等，尽可能地消除从田间带来的病菌。

3．3采收期的确定和采收技术采收期对辣椒的耐贮性有较大影响，9月下旬(霜前一周)采收的果实较耐贮藏，可贮两个月以上。而8月份正值高温多雨季节，田间带病较多，这时采收的果实只能贮一个月左右。长期贮藏的辣椒要选果实充分膨大、果肉厚而坚硬、光亮而未转红的绿熟果。采收应在晴天早晨气温较低对进行，戴绒线手套握住果梗采摘，防止果实和果柄受伤，也可用平头锋利的剪刀采摘。轻拿轻放，尽量避免机械伤的产生。

4贮藏技术

4．1贮前准备及预冷

贮前准备包括贮藏架及塑料箱、纸箱和保鲜膜袋等。架子可选用平架或立架两种。平架要离开地面20cm，立架则要分层搭起，搭架材料最好选用角铁，架宽为60em－1.2m，层高40－50cm，长和高视库位而定，架与架之间要留50－70cm，架子要保持坚固平稳。搭架后，选用库房专用烟雾消毒剂或硫磺点燃密闭24小时，打开库门窗排出库内残留雾。贮藏用具包括塑筐、纸箱等，要进行消毒处理。在辣椒入贮前应开机降温。采收后的辣椒，在低于贮藏温度1℃的条件下预冷1－2天，以减少呼吸消耗，保持新鲜，同时还可避免装袋后结露，减少腐烂。剔除红果、病果、虫果及伤果。

4．2保鲜库贮藏法

4．2．1大帐贮藏将预冷好的辣椒装入消过毒的箱内，每箱5－10kg,放入架上。在上架前将备好的2.3－3nma透气性好的塑料膜将架底铺好，辣椒上架冷透后要迅速扣帐密封，并在帐的四周开几个8－10cm的小窗，便于通风补氧，降低二氧化碳浓度。一般贮藏前期15－20天补氧一次，后期7－10天补氧一次(每1次补氧5－10分钟)。为防止下部二氧化碳积聚，引起伤害，可在帐内撒一些消石灰，来吸收多余的二氧化碳。

4．2．2小包装平架贮藏将预冷好的辣椒装入箱内，每箱不超过5kg，把透气性好的保鲜袋套在箱子的外围，注意装箱易少不易多，过多会引起二氧化碳积聚，造成腐烂。码垛时，垛与垛之间要留5-10cm的空隙，库顶要留50－70cm，架底要撒一层消石灰。在贮藏时最好使用辣椒防疯剂，严格把关，可贮60－70天。

4．3民间土藏法

4．3．1沟藏在背阴处挖宽和深各1m，长依地形而定。将采收后的辣椒直接放人沟内，厚度不超过50cm，在沟底铺一层沙子，将辣椒散放于上，上面盖一层稻壳或沙子，顶上要盖草帘等保温防寒物。此法可贮40－50天。

4．3．2窑洞贮藏采用筐装的形式，每筐容量以10－15kg为宜。先在筐内衬一层薄纸，装满辣椒后上面盖一层纸，加盖，成“晶”字形堆码，这种方法容易失水，要注意保持窑洞内的湿度，10天左右检查一次，挑出红果和腐烂果。夜间气温低时打开窑洞门通风降温，要保持湿度注意加湿。

4．3．8带秸秆民宅贮藏晚秋辣椒基本成熟后，将带秸秆的辣椒用镰刀从根部割起。运输时轻装、轻拿。先用0.5％的漂白粉水喷洒房内的墙壁和地面进行消毒，然后将带秸秆的辣椒整齐地码在房内，最好垛与垛之间留50－70cm人行道。等外界气温过低时要堵好门窗，注意保温加湿(加湿可用湿草帘覆盖)，这样也可贮藏40－50天。