饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊血清抗氧化指标和肌肉脂肪酸含量的影响

魏宗友，王伟，周丽雅，徐哲，张阳阳，陈为红

(1. 太仓市农业农村科技服务中心，江苏 太仓 215400；2. 太仓市畜牧兽医站，江苏 太仓 215400；3. 苏州健雄职业技术学院，江苏 太仓 215400；4. 太仓市东林生态养殖专业合作社/江苏省企业研究生工作站，江苏 太仓 215400)

功能性脂肪酸是指对人体具备特殊营养价值或作用的多不饱和脂肪酸(PUFA)，如n-3系PUFA。 PUFA可对诸多关键性的生理活性具有调控作用，包括预防心血管疾病、调控机体脂质代谢、促进生长发育等[1]。n-3系列的PUFA和人类健康具有密切联系，对多种慢性病具有防治作用，包括心脑血管疾病、糖尿病、肥胖等[2]。此系列的PUFA以α-亚麻酸(C18：3n-3，ALA)，二十碳五烯酸(C20：5n-3，EPA)和二十二碳六烯酸(C22：6n-3，DHA)为主。1994年，美国卫生部提出，多食鱼肉制品尤其是n-3 PUFA含量高的鱼油能够改善必需脂肪酸的平衡。改善肉品的脂肪酸(FA)平衡有助于人类的营养保健。亚麻籽又称胡麻籽，富含油脂、蛋白质和氨基酸等营养成分，同时含有木酚素、黄酮和植物甾醇类等抗氧化物质[3]。此类油料籽实的ALA含量极高。利用亚麻籽作为饲料原料生产富含n-3 PUFA的肉品已有很多报道，但试验动物主要以鸡、牛[4]和山羊[5-7]为主。Hemant 等[8]研究发现，亚麻籽所含n-3系PUFA(ALA、EPA与DHA等)可削弱动物机体肝脏与心脏的炎症。近几年，动物营养研究开始涉足海洋资源。微藻是一种分布广泛且营养物质含量高、光合能力强的自养植物，富含有大量的细胞色素，其中包括β-胡萝卜素、叶黄素、虾青素等。微藻能合成多种拥有特殊生物活性的化合物，还能提高动物的生长性能、增强机体免疫机能、改善畜产品品质、解决畜牧业的环境污染问题，同时还可减轻食品与饲料以及燃料工业之间的竞争[9]，在医药、畜禽饲料、食品与保健食品等方面广泛应用。陈秀丽等[10]研究发现，饲粮中添加裂殖壶菌粉能够增加蛋中n-3 PUFA和DHA含量，降低n-6/n-3 PUFA比值。吴永保等[11]报道，饲粮中添加微藻和亚麻籽均可提高蛋黄中n-3 PUFA含量，降低n-6 PUFA 含量，并降低n-6/n-3 PUFA比值，可生产n-3 PUFA鸡蛋。但关于在饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊血液抗氧化指标和肌肉脂肪酸组成的影响还未见报道，本试验为此开展研究，为采用调整饲粮的方法生产富含n-3 PUFA 的功能性羊肉提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

膨化亚麻籽购自武汉山川生物科技有限公司；微藻采用裂殖壶藻粉，发酵工艺，购自挪亚圣诺太仓生物科技有限公司。

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)检测试剂盒(批号：20221108)，超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(批号：20221106)，丙二醛(MDA)检测试剂盒(批号：20221108)，过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(批号：20221108)均购自南京建成生物工程研究所。

1.2 试验设计与日粮

试验在江苏现代肉羊产业技术体系太仓推广示范基地东林生态养殖专业合作社进行。选择4月龄健康湖羊45只，体重(18.60±0.62)kg，随机分为3组，每组3个重复，每个重复5只。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮；试验A组饲喂玉米-豆粕型基础日粮+10%膨化亚麻籽；试验B组饲喂玉米-豆粕型基础日粮+5%膨化亚麻籽+5%微藻粉。基础日粮由精料补充料和粗饲料组成，膨化亚麻籽和藻粉在精料补充料中添加。基础日粮配方和营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)

每日定量饲喂基础日粮，粗饲料自由采食，自由饮水，每日清理食槽，打扫羊舍，保持羊舍清洁卫生，通风状况良好。常规饲养管理和免疫。

1.3 样品采集

样品采集前1 d，对试验羊进行半天禁食处理，第2 天早上空腹颈静脉采血5 mL，置于含有无抗凝剂成分的一次性真空采血管内。经过120 min，血液自然凝固，3 000 r/min离心15 min，吸取上层血清，存放于-20 ℃冰箱中待用。

待试验结束，各组随机选取6只湖羊进行屠宰试验。立即对左侧胴体背最长肌取样，通过磷酸盐缓冲液于4 ℃下充分漂洗处理，装袋，编号，液氮速冻，于-20 ℃冰箱冻存，用以检测肌肉中脂肪酸的含量。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 抗氧化指标

测定血清中GSH-Px、SOD、MDA、H2O2含量，相关操作参考试剂盒说明书，检测机构为南京迈博昊成公司。

1.4.2 肌肉脂肪酸含量

委托有资质第三方公司浙江国正检测技术有限公司进行测定，根据GB 5009.124—2016 《食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》，在背最长肌样品解冻后，提取肌肉脂肪酸，经由气相色谱仪(GC-2014C型，岛津)测定肌肉内24类FA含量。

1.5 数据统计与分析

由Excel 2013完成数据库的构建，数据统计由SPSS 24.0完成，显著性分析所用方法为One-way ANOVA(单因素方差分析)，LSD法开展组间多重对比，试验数据以“平均数±标准误”表示，P<0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊血清抗氧化指标的影响

由表2可以看出，饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻显著影响湖羊血清内GSH-Px、SOD、H2O2和MDA指标。与对照组相比，试验A组GSH-Px活性显著下调28%(P<0.05)，试验B组下调18%(P>0.05)；试验A组和B组SOD活性分别显著下调了19%和20%(P<0.05)；H2O2含量分别显著增加了44%和21%(P<0.05)；MDA含量分别显著增加79%和45%(P<0.05)。

表2 饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊血清抗氧化指标的影响

2.2 饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊肌肉脂肪酸组成的影响

由表3可以看出，饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊背最长肌中n-3 PUFA组成产生较大差异。与对照组相比，试验A组和B组湖羊背最长肌中n-3 PUFA含量显著提高，分别提高1.14、3.33倍(P<0.05)，显著降低n-6/n-3 PUFA比值，分别降低48%和82%(P<0.05)；在ALA含量上，试验A组和B组分别上调了116%(P<0.05)和21%(P<0.05)；试验B组EPA和DHA显著提高，分别提高了3.91、30.57倍(P<0.05)。同时，添加膨化亚麻籽和微藻对肌肉中饱和脂肪酸(棕榈酸、十七烷酸和硬脂酸)产生不同程度影响。

表3 饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊肌肉脂肪酸组成的影响 %

3 讨论

3.1 饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊血清抗氧化指标的影响

3.2 饲粮中添加膨化亚麻籽和微藻对湖羊肌肉脂肪酸组成的影响

湖羊在国家一级保护地方畜禽品种之列，属于稀有白色羔皮羊品种，其所具备的优良性能包括早熟、改良后产肉性能理想、四季发情每胎多羔、生长发育迅速、泌乳性能好等优点。羊肉内含几十种FA，含油酸量最大，棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、豆蔻酸、花生四烯酸、棕榈油酸和十七烷酸次之，上述FA含量皆在1%以上，其中多数为PUFA。在含量1%以下的脂肪酸中，α-亚麻酸含量最高。日粮的脂肪酸组成直接影响其肌肉脂肪酸组成，李晨萱等[16]研究表明，与添加大豆油相比，添加棕榈油、棉籽油或猪油显著增加肉鸡腿肌饱和脂肪酸含量，显著降低肉鸡胸肌和腿肌多不饱和脂肪酸含量。Wang等[17]研究发现，TMR日粮缺乏α-亚麻酸是引起其脂肪代谢和羊肉脂肪酸组成变化的主要原因之一。因此，通过补充富含α-亚麻酸的亚麻油，对改善舍饲绒山羊羊肉脂肪酸组成具有重要的意义。但是，亚麻油的补充对瘤胃发酵、微生物区系、纤维降解和生产性能可能产生负面影响，这会降低其对动物产品脂肪酸组成的改善效果，并且在生产中的使用也受到了一定限制。

目前，各国及相关组织对n-6/n-3 PUFA比值的推荐值不尽相同，世界卫生组织(WHO)与联合国粮农组织(FAO)的推荐值为(5～10)∶1，加拿大推荐值为6.25∶1，中国营养学会推荐值为(4～6)∶1。Artemis[18]研究发现，不同脂肪酸只有在适宜的n-6/n-3 PUFA 范围内才能发挥有益机体健康的作用。魏永生等[19]研究表明，当前，我国人民食用植物油主要有大豆油、花生油、菜籽油和玉米胚芽油，其在FA组成方面，n-6 PUFA系列的亚油酸水平较高，可达脂肪酸总量的一半以上，从而导致n-6/n-3 PUFA 比值严重超出中国营养学会推荐水平。羊肉作为膳食FA的一大来源，其FA构成的合理性极大有助于人类健康。本试验通过在湖羊饲粮中添加膨化亚麻籽，将n-6/n-3 PUFA比值降至WHO与FAO的推荐范围；通过添加膨化亚麻籽+海藻粉组合方式，将n-6/n-3 PUFA比值降至远远低于中国营养学会推荐范围。

综上，饲粮中适当添加亚麻籽与微藻，显著影响湖羊血清抗氧化活性，且可提高肌肉内n-3 PUFA水平，下调n-6/n-3 PUFA比例。建议生产实际中亚麻籽和微藻混合添加效果更优，各自比例5%为宜。