DHA营养强化鸡蛋与普通鸡蛋蛋黄脂肪酸组成对比分析

摘 要：为探究DHA营养饲料对鸡蛋蛋黄中脂肪酸组成的影响，试验选用120只健康的45周龄汶上芦花鸡随机分成2组，每组3个重复，每个重复20只鸡。对照组饲喂基础日粮，试验组在基础饲粮的基础上添加1%禽用DHA预混料，分析蛋黄中脂肪酸组成，试验期30 d。结果显示：与对照组相比，汶上芦花鸡饲喂禽用DHA预混料（藻油DHA饲料添加剂），可显著提升蛋黄中DHA含量（Plt;0.05），DHA含量由（131.37±2.66）mg/100 g提高到（201.34±4.72）mg/100 g，并能显著提升其他多种脂肪酸含量，且具有更优的ω-6 PUFA /ω-3 PUFA比值。综上所述，饲喂藻油DHA添加剂可显著改善汶上芦花鸡鸡蛋中的脂肪酸组成。

关键词：DHA； 营养强化；鸡蛋；脂肪酸组成

中图分类号：S816.6 文献标识码：A 文章编号：1673-1085（2024）12-0019-07

二十二碳六烯酸（DHA）属于ω-3系列的多不饱和脂肪酸[1]，是大脑和视网膜组织中含量最高的ω-3型多不饱和脂肪酸。研究表明，补充DHA具有改善血液胆固醇（TC）、降血脂的作用，同时能够促进脑部发育[2-3]、改善视网膜功能，而且还具有抑制肿瘤、抗炎等生理作用[4-5]。DHA主要以乙酯型、甘油三酯型以及磷脂型三种形式存在，其中磷脂型DHA在改善神经性疾病方面显示出更高的效率且更容易被吸收[6]。

近几年，中国鸡蛋产量位居世界第一，同时鸡蛋作为优质蛋白质来源，富含卵磷脂、多种维生素及微量元素，一直以来深受我国居民的青睐。蛋黄中含有较多的磷脂，因此近年来富含ω-3型多不饱和脂肪酸、DHA营养强化鸡蛋等逐渐成为研究热点[7-12]，本研究以普通鸡蛋及DHA营养强化鸡蛋为对象，对鸡蛋蛋黄中多种脂肪酸含量进行对比分析，以期为更好地开发DHA营养强化鸡蛋提供数据支撑。

1" 材料与方法

1.1" 试验材料

试验所用基础饲粮购自禹城亚太中汇饲料有限公司，禽用DHA预混料（藻油DHA≥24.5%）购自青岛藻源海洋生物科技有限公司。

1.2" 试验设计

试验于山东省地方鸡品种资源活体基因库进行。选取120 只健康的45周龄汶上芦花鸡，随机分为2个组别，每个组别3个重复，每个重复20只鸡。对照组仅饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮的基础上添加1%禽用DHA预混料。试验期30 d。

1.3" 饲养管理

参照《鸡饲养标准》（NY/T33-2004）配制玉米-豆粕型饲粮，基础饲粮组成及营养水平见表1。采用三层层叠笼养方式进行养殖，每笼5只鸡，舍温控制在（20±2）℃，相对湿度控制在50%～60%；每天喂料3次（8：00、13：30和18：00）。

1.4" 仪器与试剂

仪器：GC-6890A气相色谱仪、HP-88毛细管色谱柱（100 m×0.25 mm，0.2 µm）， 美国Agilent公司；FA2204电子天平，上海上平公司；电热恒温水浴锅，北京永光明公司；GT200震动球磨仪，北京格瑞德曼公司；FreeZone冷冻干燥机，美国Labconco公司。

试剂：37种脂肪酸甲酯标准品1ST5305，天津阿尔塔公司；十一烷酸甘油三酯（C11：0）标准品1ST2001（纯度为98.9%），天津阿尔塔公司；乙醇、正庚烷、石油醚、盐酸（分析纯），国药集团化学试剂有限公司。

1.5" 脂肪酸的测定

1.5.1" 酸解-脂肪提取" 分别称取蛋黄在冻干前后的重量用于水分的换算。将蛋黄取出后，于冷冻干燥机中进行冷冻干燥，后于震动球磨仪中分散均匀。称取0.3 g蛋黄粉移入100 mL离心管中，按照GB 5009.168-2016的方法进行脂肪提取；然后在离心管中加入2.0 mL十一碳酸甘油三酯内标溶液（5.00 mg/mL），再依次加入100 mg焦性没食子酸、2 mL的95%乙醇和4 mL水，混匀，最后加入8.3 mol/L的盐酸溶液10 mL，充分混匀后放于80 ℃水浴中水解40 min。每隔10 min进行振荡混匀，将黏附于内壁的颗粒物混入溶液中。水解完成后，取出离心管冷却至室温。为防止乳化，加入10 mL的95%乙醇，混匀；加入50 mL石油醚，振摇5 min，静置10 min，将醚层提取液收集到250 mL的鸡心瓶中，重复提取水解液3次，用旋转蒸发仪进行浓缩，黄色残留物即为蛋黄中脂肪提取物。

1.5.2" 脂肪的皂化、脂肪酸的甲酯化及气相色谱测定脂肪酸组成" （1）脂肪的皂化、脂肪酸的甲酯化：在蛋黄脂肪提取物中加入2%的氢氧化钠甲醇溶液8 mL，连接回流冷凝器，将鸡心瓶置于80 ℃水浴上回流至油滴消失，过程约30 min；在回流冷凝器上端加入7 mL的15%三氟化硼甲醇溶液，继续回流2 min，用少量水冲洗回流冷凝器；停止加热，取下鸡心瓶，迅速冷却至室温。加入15 mL正庚烷，振摇2 min；加入15 mL饱和氯化钠水溶液，静置分层。吸取上层溶液5 mL至25 mL试管中，加入4 g无水硫酸钠，振摇1 min，静置5 min分层，吸取上层正庚烷层，用0.22 µm有机滤膜过滤至进样瓶中，进行上机气相色谱分析。

（2）气相色谱分析：HP-88毛细管色谱柱（100 m×0.25 mm，0.2 µm）， 载气为高纯氮气，进样体积为1.0 µL，分流比25：1。柱箱升温程序：初始温度100 ℃，持续13 min；100～180 ℃，升温速率为10 ℃/min，保持6 min；180～200 ℃，升温速率为1 ℃/min，保持20 min；200～230 ℃，升温速率为4 ℃/min，保持10.5 min。检测器为火焰离子化检测器（FID），前进样口温度为270 ℃，检测器温度为280 ℃，压力为31.75 psi，氢气流量40.0 mL/min，空气流量400 mL/min，氮气尾吹流量30.0 mL/min。

1.6" 数据统计分析

试验数据使用EXCEL2019进行初步整理， 结果用“平均值±标准差”表示，采用SPSS 20.0软件进行独立样本T检验，以P＜0.05 时表示具有统计学意义上显著差异。

2" 结果与分析

2.1" DHA饲料添加剂对蛋黄中DHA含量的影响

由表2可知，与对照组相比，添加1%禽用DHA预混料喂养的试验组鸡蛋黄中脂肪酸含量显著提高（Plt;0.05），DHA含量由（131.37±2.66）mg/100 g提高到（201.34±4.72）mg/100 g。

2.2" DHA饲料添加剂对蛋黄中其他脂肪酸含量的影响

由表2可知，除DHA含量显著提升外，经DHA 营养饲粮喂养的鸡蛋蛋黄中的其他脂肪酸种类以及含量也产生变化。试验组鸡蛋蛋黄中检出了反式亚油酸、γ-亚麻酸、二十二碳酸、花生四烯酸、二十三碳酸五种对照组鸡蛋蛋黄中未检出的脂肪酸，其中包括了饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。与对照组相比，试验组的脂肪酸除了肉豆蔻油酸外，其他含量都有了显著提高（Plt;0.05）。另外，饱和脂肪酸SFA、不饱和脂肪酸UFA、单不饱和脂肪酸MUFA、多不饱和脂肪酸PUFA、ω-6 PUFA、ω-3 PUFA的含量均得到显著性提高（Plt;0.05）。

蛋黄占鸡蛋可食用部分的比例一般在33%～45%之间，试验组鸡蛋ω-3 PUFA的含量符合NY/T 4069-2021行业标准中ω-3多不饱和脂肪酸强化鸡蛋的要求，即ω-3多不饱和脂肪酸的含量≥300 mg/100 g；ω-6PUFA /ω-3 PUFA 比值也表现出显著性下降（Plt;0.05），显示出DHA营养强化鸡蛋具有更优的ω-6PUFA /ω-3 PUFA比值。

3" 讨论

3.1" DHA饲粮对蛋黄中DHA含量的影响

二十二碳六烯酸（DHA）是大脑和视网膜组织中含量最高的ω-3型多不饱和脂肪酸，对人体有显著的保健作用[13]，同时，鸡蛋中磷脂型DHA更容易被人体吸收[6]。陈秀丽等[14]研究发现，蛋黄中DHA沉积效率不会随着饲粮中DHA含量增加而无限制的增加。为避免出现高脂肪酸肝脏损伤，考虑耐受性、成本以及鸡蛋风味等情况[15]，本试验采用1%禽用DHA预混料作为DHA饲料添加剂，研究发现，经1%禽用DHA预混料喂养的汶上芦花鸡，其蛋黄中的DHA含量比基础饲粮喂养的鸡蛋蛋黄中DHA含量显著提高（Plt;0.05），同时使得鸡蛋中ω-3 PUFA含量达到300 mg/100 g以上，符合行业标准[16]。在汶上芦花鸡对DHA饲料添加剂耐受且无副作用的前提下，要想进一步使鸡蛋中DHA有更高含量的富集，可参考龙烁等[10]研究优化DHA营养饲料配方。

3.2" DHA饲粮对蛋黄中其他脂肪酸含量的影响

脂肪酸是维持人类生命活动的必需物质之一，对机体免疫与脑和神经的发育都具有重要的作用[17]。陈秀丽等[18]研究发现，在饲粮中添加裂殖壶菌，试验组与对照组相比，蛋黄中脂肪酸种类发生了变化，检测出对人体有益的花生四烯酸的存在。王维维等[19]研究发现，饲粮中添加微藻油可使α-亚麻酸含量有所提升，使ω-3多不饱和脂肪酸的含量显著提升。杨蕊等[20]研究发现，在饲粮中添加微藻DHA能显著提高鸡的平均日采食量。赵英才[8]、陈秀丽[14]、杨蕊[20]等均研究发现，DHA营养强化鸡蛋具有更优的ω-6PUFA /ω-3 PUFA比值。本试验用1%禽用DHA预混料喂养的芦花鸡蛋蛋黄中，除DHA含量明显提升外，其他脂肪酸的含量均有显著提升，且比对照组增加了5种脂肪酸，这些变化可能与藻油本身含有的脂肪酸在产蛋鸡体内的代谢沉积富集有关，或者与促进了汶上芦花鸡采食量的增多有关。

4" 结论

在本试验条件下，汶上芦花鸡采用富DHA饲粮（1%禽用DHA预混料）能够显著提高蛋黄中DHA的含量（Plt;0.05），也显著提升其他多种脂肪酸含量，且具有更优的ω-6PUFA /ω-3 PUFA比值，显著改善汶上芦花鸡鸡蛋的蛋品质。

参考文献：

[1] GAWRISCH K， ELDHO N V， HOLTE L L. The structure of DHA in phospholipid membranes[J]. Lipids， 2003， 38（4）： 445-452.

[2] LOTTE L， PAOLO B， ALESSANDRA M， et al. DHA Effects in Brain Development and Function[J]. Nutrients， 2016， 8（1）：1-17.

[3] BAZAN N G. Neuroprotectin D1 （NPD1）： A DHA‐Derived Mediator that Protects Brain and Retina Against Cell Injury‐Induced Oxidative Stress[J]. Brain Pathol， 2005，15（2）：159-166.

[4] ROQUETA-RIVERA M， STROUD C K， HASCHEK W M， et al. Docosahexaenoic acid supplementation fully restores fertility and spermatogenesis in male delta-6 desaturase-1 mice[J]. J Lipid Res， 2009， 51（2）： 360-367.

[5] GABRIELLA C， FIORELLA D N， SIMONA G， et al. n-3 PUFAs reduce VEGF expression in human colon cancer cells modulating the COX-2/PGE2 induced ERK-1 and -2 and HIF-1alpha induction pathway[J]. Carcinogenesis，2004 （12）： 2303.

[6] 李响.磷脂酶A_1的固定化及其催化合成DHA/EPA型磷脂的研究[D].广州： 华南理工大学， 2015.

[7] 李子睦，宗蕾，毕艳兰，等. DHA营养强化鸡蛋与普通鸡蛋蛋黄脂质组成对比分析[J].中国油脂， 2021（2）： 36-40.

[8] 赵英才，于竹林，李榕，等.二十二碳六烯酸营养强化鸡蛋及蛋黄粉中脂质分析[J]. 食品安全质量检测学报， 2019， 10（15）： 6.

[9] 刘雪兰，艾武，井庆川，等.日粮添加CLA对蛋黄脂肪酸组成的影响[J].家禽科学， 2010（4）： 4.

[10] 龙烁.高峰产蛋鸡对DHA耐受性研究[D].北京：中国农业科学院，2018.

[11] 夏中生，陈继新，谢梅冬，等.饲粮油脂对蛋鸡生产性能、血清脂质含量和蛋黄脂肪酸组成的影响[J].基因组学与应用生物学，2003，22（3）：171-177.

[12] 李菊芬.日粮添加鱼油对蛋鸡蛋黄脂肪酸富集和代谢物组成的影响[D].昆明：云南农业大学，2023.

[13] 龙烁，王浩，武书庚，等.二十二碳六烯酸的生理学功能及其在家禽生产中的应用[J].动物营养学报，2017，29（4）：9.

[14] 陈秀丽，李连彬，岳洪源，等.裂殖壶菌粉对鸡蛋品质与蛋黄n-3PUFA含量的影响[J].中国畜牧杂志，2014，50（23）：5.

[15] 张城，朱冬荣，傅杨勇.强化磷脂型DHA鸡蛋研究进展[J].浙江畜牧兽医，2024，49（3）：10-13.

[16] 朱宏，梁克红，洪翊棻，等.《ω-3多不饱和脂肪酸强化鸡蛋》农业行业标准解读[J].中国标准化，2021（21）：5.

[17] 张洪涛，单雷，毕玉平.n-6和n-3多不饱和脂肪酸在人和动物体内的功能关系[J].山东农业科学，2006（2）：115-120.

[18] 陈秀丽，岳洪源，李连彬，等.裂殖壶菌粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标和蛋黄二十二碳六烯酸含量的影响[J].动物营养学报，2014（3）：701-709.

[19] 王维维，张运强，周昭彬，等.微藻油对鸡蛋中ω-3多不饱和脂肪酸沉积的影响[J].养殖与饲料，2022，21（12）：46-50.

[20] 杨蕊，徐方华，Jong-SuhS，等.日粮中添加微藻DHA和ALA对蛋鸡产蛋性能和蛋品质的影响[J].饲料研究，2014（17）：6.

Analysis of Fatty Acid Composition between DHA Enriched Eggs and Normal Egg Yolks

Abstract：" In order to explore the effect of DHA nutritional feed on the fatty acid composition of egg yolks， 120 healthy 45-week-old Wenshang Luhua chickens were randomly divided into two groups， with 3 replicates in each group and 20 chickens in each replicate. The control group was fed with basal diet， and the experimental group was supplemented with 1% algal oil DHA feed additive in the basal diet for 30 days， analyzing the fatty acid composition in the egg yolk. The results showed that compared with the control group， the content of DHA in egg yolk could be significantly increased （Plt;0.05）， the DHA content was increased from （131.37±2.66） mg/100 g to （201.34±4.72） mg/100 g， and the content of other fatty acids could be significantly increased， and the omega-6 PUFA/ω-3 PUFA ratio was better. In conclusion， DHA nutrient feed feeding could significantly improve the fatty acid composition of Luhua chicken eggs.

Keywords：" DHA; Enrichment; Egg; Fatty acid composition