深圳不同区域草地贪夜蛾田间种群对3种杀虫剂的抗药性监测

摘要：为指导科学用药防控草地贪夜蛾，本文在室内采用浸渍法测定了采自深圳光明区、龙岗区和坪山区3个区域共5个点的田间草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的抗药性。结果表明，深圳市草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺抗性处于高水平抗性至极高水平抗性阶段（110.05～290.77倍），对乙基多杀菌素抗性处于敏感水平至低水平抗性（1.75～4.80倍），对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性处于低水平抗性至中等水平抗性（8.60～15.73倍）。建议在草地贪夜蛾防治中，交替使用乙基多杀菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐，限制使用氯虫苯甲酰胺。

关键词：深圳；草地贪夜蛾；杀虫剂；抗药性

中图分类号：S433.4 文献识别码：A 文献编号：1005-6114（2024）06-046-04

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda （J.E.Smith）（Lepidoptera：Noctuidae），是夜蛾科灰翅夜蛾属的一种昆虫，其幼虫以100多种不同的植物物种为食［1］，是玉米、水稻、高粱、甘蔗、花生、大豆和其他一些非粮食作物比如棉花的重要害虫［2］。在玉米上，草地贪夜蛾的幼虫主要取食鲜嫩的幼叶，影响玉米的生长，降低玉米的产量［3］。海南、台湾、西藏南部部分地区、云南西南部、广西大部分地区、广东、福建、浙江、江西、湖南东部是草地贪夜蛾的高度适生区［3］，草地贪夜蛾可以在我国北回归线以南的热带、亚热带地区以及中南半岛大部分地区进行周年繁殖［4］，并且该虫在我国形成季节性南北迁飞，已成为一种常发性害虫［5］。

为了减轻草地贪蛾虫害造成的损失，许多农民会使用化学杀虫剂进行防治。长期使用单一化学杀虫剂使草地贪夜蛾的抗药性水平提高，而为了达到理想防治效果，农民会增加农药的使用次数及提高用药量，这更会加快草地贪夜蛾的抗性水平，同时也加重农产品的农药残留及对环境的污染。目前已经发现，草地贪夜蛾已对41种杀虫剂产生了不同程度的抗性，包括有机磷类、拟除虫菊酯类、双酰胺类、多杀菌素等［6，7］。Gutiérrez-Moreno等2019年发现美国波多黎各田间草地贪夜蛾种群已对多种新型作用机制杀虫剂产生了高水平抗性，如氟苯虫酰胺（500倍）和氯虫苯甲酰胺（160倍），对乙基多杀菌素（14倍）也显示出了中等水平抗性，对多杀菌素（8倍）、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（7倍）和阿维菌素（7倍）均处于低水平抗性阶段［8］。

深圳位于我国华南地区，属于亚热带季风气候，十分适合草地贪夜蛾终年繁殖，深圳市周年种植玉米，生产的玉米多为鲜食玉米，为减少农药残留，保证玉米的安全性，很有必要定期、系统地监测深圳不同地方草地贪夜蛾对常用药剂的抗性水平，为指导田间科学用药和开展草地贪夜蛾抗药性治理提供依据。本研究采用浸渍法，测定了深圳市3区5个不同地点草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐3种常用杀虫剂的抗药性。

1 材料与方法

1.1 供试昆虫

草地贪夜蛾幼虫于2023年11月，分别从深圳市的龙岗区袁隆平院士深圳创新团队基地（袁隆平基地）、坪山区深圳市农业科技促进中心试验示范场（促进中心）、光明区华盛光明北农业基地（华盛）、光明区工业科技劳动教育基地（教育基地）和光明区光明奶牛饲养队（光明牛奶场）5个不同地方的玉米地采回高龄幼虫，并在室内人工气候箱内进行饲养，饲养条件为温度27℃±2℃、相对湿度70%±5%、光照周期L∶D=16 h∶8 h。饲养一代后，挑选虫龄一致的2龄幼虫进行测定。

1.2 供试药剂

200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂（美国富美实公司，市售）；25%乙基多杀菌素水分散粒剂（科迪华农业科技有限公司，市售）；1.14%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐乳油（山东瑞星生物有限公司，市售）。

1.3 试验方法

根据预备试验，将氯虫苯甲酰胺配置为40、20、10、5、2.5、1.25 mg/L的6个系列浓度；乙基多杀菌素配置为5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625 mg/L的6个系列浓度；甲氨基阿维菌素苯甲酸盐配置为1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 mg/L的6个系列浓度，备用。

将人工饲料切成长1.1 cm，宽0.8 cm，厚0.4 cm小片，分别将小片在不同浓度的药液中浸泡10 s后，放在滤纸上阴干后置于1.8×2.3×2.3 cm戴盖的小盒中。每盒放入一小片经药液处理的人工饲料，并接入5头2龄幼虫，每个重复2盒，共10头虫。每处理重复4次，每个处理不少于40头幼虫。以清水处理人工饲料作为对照。

将上述小盒放入27℃±2℃、相对湿度为70%±5%、光照周期L∶D=16 h∶8 h的培养箱中，于96 h后统计各组的死亡虫数。用毛笔轻触幼虫无反应则视为死亡。

1.4 数据处理

采用DPS数据处理软件进行统计分析，计算药剂毒力回归方程、LC50值及95%置信限和相关系数，并以LC50的95%置信限是否重叠作为判断不同地方草地贪夜蛾对同一种杀虫剂的抗性是否差异显著的标准。

抗性倍数（RR）=所测种群LC50/敏感种群LC50。

抗性水平分级标准：参考Gutiérrez-Moreno等（2019）的研究设定抗性水平划分标准［8］：抗性倍数lt;3.0为敏感水平；3.1～10.0为低水平抗性；10.1～40.0为中等水平抗性；40.1～200.0为高水平抗性；抗性倍数gt;200为极高水平抗性。

3种杀虫剂的相对敏感基线：氯虫苯甲酰胺为0.0075 mg/L［9］；乙基多杀菌素为0.025 mg/L［10］；甲氨基阿维菌素苯甲酸盐为0.0015 mg/L［9］。

2 结果与分析

2.1 对氯虫苯甲酰胺的抗性

深圳市不同地区草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性在110.05～290.77倍之间，其中深圳市促进中心、华盛和光明牛奶场的草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺抗性倍数分别为110.05倍、163.07倍和135.55倍，均属高水平抗性，袁隆平基地和教育基地的草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺抗性倍数分别为208.24倍和290.77倍，属于极高水平抗性（表1）。从LC50置信限来看，深圳市不同区草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺的抗性差异不显著。

2.2 对乙基多杀菌素的抗性

深圳市不同地区草地贪夜蛾对乙基多杀菌素的抗性在1.75～4.80倍之间，除袁隆平基地草地贪夜蛾种群对乙基多杀菌素抗性倍数为4.80倍，属低水平抗性外，其它4个地方草地贪夜蛾种群对乙基多杀菌素抗性倍数在1.75～2.48倍之间，属于敏感水平（表2）。从LC50置信限来看，深圳市不同地区草地贪夜蛾种群对乙基多杀菌素的抗性差异不显著。

2.3 对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的抗性

深圳市不同地区草地贪夜蛾对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的抗性在8.60～15.73倍之间，深圳光明区的华盛和牛奶场草地贪夜蛾种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性倍数分别为9.40倍和8.60倍，属低水平抗性；促进中心、袁隆平基地和教育基地3个地方草地贪夜蛾种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性倍数分别为10.47倍、12.27倍和10.47倍，属中等水平抗性（表3）。不同地方草地贪夜蛾种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性差异不大，从LC50置信限来看，抗性差异不显著。

3 结论与讨论

我国对草地贪夜蛾的防控主要是施用化学杀虫剂来进行防治，但由于我国地域广阔，草地贪夜蛾迁入虫源不同且不同地区草地贪夜蛾的发生情况、用药品种和用药频次存在差异，导致不同地区草地贪夜蛾种群对不同杀虫剂的抗药性也存在差异。因此加强不同地区草地贪夜蛾对常用杀虫剂抗药性水平监测，对于指导不同地区因地制宜地合理用药具有重要意义。氯虫苯甲酰胺是较早登记用于防治草地贪夜蛾的化学农药，因对鳞翅目害虫具有良好防效，是防治草地贪夜蛾主要化学农药，但多年的连续使用使得草地贪夜蛾已对其产生极高抗药性；乙基多杀菌素是大环内酯类杀虫剂，其杀虫机理主要作用于烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptor，nAchR）和γ–氨基丁酸受体（γ-amino-hutyric acid receptor，GABA），通过刺激害虫的神经系统引起兴奋，导致虫体非功能性的肌肉收缩、颤抖、衰竭和麻痹等，最终致其死亡［11，12］，正是由于乙基多杀菌素独特的杀虫作用机理，导致草地贪夜蛾不易产生抗药性；甲氨基阿维菌素苯甲酸盐作用于昆虫神经元突触或神经肌肉突触的γ-氨基丁酸（GABA）受体和谷氨酸氯离子通道受体，刺激神经末梢释放大量的GABA和调节特异性谷氨酸门控氯离子通道、GABA敏感的氯离子通道，增加细胞膜对氯离子的通透性，从而使大量氯离子进入神经细胞，使细胞功能丧失，扰乱神经传导，最终导致虫体麻痹不能取食死亡［13］。本试验结果表明，深圳市草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺抗性处于高水平抗性至极高水平抗性阶段（110.05～290.77倍），对乙基多杀菌素抗性处于敏感水平至低水平抗性（1.75～4.80倍），对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性处于低水平抗性至中等水平抗性（8.60～15.73倍）。建议在深圳市草地贪夜蛾防治过程中，交替轮换使用乙基多杀菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐，限制使用氯虫苯甲酰胺，以延缓草地贪夜蛾抗药性的产生。

参考文献

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