油菜菌核病的室内药剂筛选

摘要：本文对17种市场上常见的防治真菌型病害农药对油菜核盘菌的抑制作用进行了室内测定。结果表明，供试17种药剂中有16种对油菜核盘菌菌落生长具有抑制作用；12种药剂在200倍液下对菌丝生长抑制率达99%以上，8种药剂在1 000倍液下对菌丝生长抑制率达90%以上，其中以含有效成分400 g/L异菌脲·氟啶胺和45%咪鲜胺的效果最好，EC50值分别为0.01 mg/L和0.03 mg/L。400 g/L异菌脲·氟啶胺和45%咪鲜胺可作为防治油菜菌核病的潜在备用药剂。

关键词：油菜菌核病；防治药剂；室内筛选

中图分类号：S435.654 文献识别码：A 文献编号：1005-6114（2024）06-039-04

油菜菌核病是我国油菜的主要病害，是由核盘菌［Sclerotinia sclerotiorum（Lib.）de Bary］引起的组织坏死，油菜感染病害后一般减产10%～50%，严重者达80%以上［1-3］。由于没有抗核盘菌的种质资源，目前生产上对于油菜菌核病的防治主要是依赖于化学农药［4-6］。然而，化学农药连续多年的使用导致使核盘菌产生了抗药性，因此，需要不断筛选和开发新型菌核病防治药剂。为此，本研究在明确该病的主要病原菌基础上，对市场上常用的防治真菌病害的药剂进行了室内抑菌测定试验，以期为筛选出对油菜菌核病具有良好防治效果的药剂提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用的油菜核盘菌采集自宜昌市农业科学研究院枝江四岗试验基地发病的油菜植株茎秆。无菌环境下将收集的菌核浸入1%次氯酸钠中10 s，然后再浸入70%酒精中1 min，最后用无菌水洗涤3次，用无菌滤纸吸干表面水分，再用无菌刀切开，转至PDA培养基平板上，于20℃黑暗条件下培养3 d，然后将新生长出的菌丝转移到PDA平板上纯化，转接3次以后得到纯化的菌株，在PDA平板上培养备用。

称取各药剂溶入无菌水（对不易溶解的药剂，可添加其他助溶剂）制成母液。

1.2 供试药剂

选择市场上常见的抑制真菌型病害的药剂，具体见表1。

1.3 主要仪器设备

电子天平（精度0.1 mg）、生物培养箱、培养皿、接种器、打孔器、移液器、酒精灯等。

1.4 试验方法

1.4.1 17种药剂不同倍液对核盘菌的抑制

选取17种市场上常见的农药，以200倍液、1 000倍液、5 000倍液的浓度制成含药PDA培养基，倒入直径9 cm培养皿中，每皿倒入25 mL，制成含药培养基平板进行实验。

1.4.2 药剂浓度梯度对核盘菌的抑制

根据1.4.1试验结果以及农药经济价格，选择部分农药进行浓度梯度试验。将母液按照等比数列稀释成5个浓度，从稀释好的药液中吸取1 mL加入到100 mL融化的PDA培养基中，混合均匀后倒入直径9 cm培养皿中，每皿倒入25 mL，制成含药培养基平板测药剂有效中浓度EC50。

用直径为5 mm灭菌打孔器将备用菌株置于含有不同浓度药剂的PDA培养基平板中，每个培养皿中心一个菌饼，另设不含药剂的PDA培养基为对照，于25℃恒温培养箱中黑暗培养3 d后，采用十字交叉法（将直尺经过菌落生长中心，测得相互垂直的两边菌落直径的长度）测量各处理的菌落直径。每个处理4次重复。

1.5 药剂防效计算

按照公式（1）和（2）计算药剂对菌丝的生长抑制率。

（1）D=D1-D2

其中：D为菌落增长直径，D1为菌落直径，D2为菌饼直径；

（2）I=（D0-D1）×100/D0

其中：I为菌丝生长抑制率，D0为空白对照菌丝生长直径，D1药剂处理菌丝生长直径。

将菌丝生长抑制率转换为几率值，并计算药剂浓度的对数值。以药剂浓度对数值为横坐标、抑制率的几率值为纵坐标，用最小二乘法计算抑制率的几率值和药剂浓度对数值之间的线性回归，求出各药剂对供试菌株的毒力回归方程和抑制50%菌落有效的药物浓度EC50。

1.6 数据处理

数据统计、整理采用WPS Office（2011版）软件，差异显著性分析采用SPSS软件。

2 结果与分析

2.1 17种药剂不同倍液对核盘菌的抑制效果

试验结果表明，与空白对照（CK）相比，供试17种药剂中有16种对核盘菌菌落生长有明显的抑制作用（表2）。不同药剂对菌落抑制作用有差异，其中含有效成分氟唑菌酰羟胺、异菌脲·氟啶胺、啶酰菌胺、腐霉利、异菌脲、多菌灵、菌核净、戊唑醇、咪鲜胺等12种药剂在200倍液下的菌丝生长抑制率在99%以上，含有效成分氟唑菌酰羟胺、异菌脲·氟啶胺、啶酰菌胺、腐霉利、多菌灵、咪鲜胺等8种药剂在1 000倍液下的菌丝生长抑制率在90%以上，以含有效成分异菌脲·氟啶胺和咪鲜胺药剂对菌丝生长的抑制作用最好，在5 000倍液下的菌丝生长抑制率仍能达到96%和98%以上。含有相同有效成分的不同商品药剂如异菌脲、多菌灵、咪鲜胺等的抑制率出现差别，有的甚至达到显著差异。

2.2 7种药剂不同浓度梯度的抑菌作用

根据1.4.1试验结果，结合文献常用药剂及用药成本，选用含有效成分异菌脲·氟啶胺、咪鲜胺、啶酰菌胺、多菌灵、腐霉利、异菌脲和菌核净等7种药剂进行梯度浓度抑菌试验。结果表明，与对照相比，7种药剂浓度越大，对菌落抑制作用越明显（表3）。其中以含有效成分异菌脲·氟啶胺和咪鲜胺的防治效果最好，EC50值分别为0.01 mg/L和0.03 mg/L，其次为啶酰菌胺、多菌灵和腐霉利，而异菌脲和菌核净的药效结果一般。

3 结论与讨论

本研究对常见17种药剂对油菜核盘菌抑制作用进行了测定，发现含有效成分400 g/L异菌脲·氟啶胺和45%咪鲜胺的对菌核病菌丝生长的抑制作用最明显，可作为优先推荐进一步在大田试验。此外有效成分相同而商品名称不同的杀菌剂对菌丝生长的抑制作用出现差别，部分达到显著差异，推测与不同厂家的生产工艺和添加剂类型不同有关。下一步将对异菌脲·氟啶胺和咪鲜胺药剂在不同地区的大田应用效果、防治时期及药剂安全性进行深入研究，以便为示范推广提供数据支撑。

参考文献

［1］ 张左生.粮油作物病虫鼠害预测预报［M］.上海：上海科学技术出版社，1995：128-131.

［2］ 中国农业科学院植物保护研究所.中国农作物病虫害：上册［M］.2版.北京：中国农业出版社，1995：865-869.

［3］ 陆剑飞，谢子正，黄世文.粮油作物主要病虫预测预报及综合防治［M］.杭州：浙江科学技术出版社，2020：209-214.

［4］ 程静雯，李阿根，陈瑞，等.4种杀菌剂防治油菜菌核病的效果［J］.浙江农业科学，2022，63（4）：777-778+791.

［5］ 夏红霞，卢银花，郑在武，等.5种药剂处理对油菜菌核病的田间防治效果［J］.湖北植保，2023（5）：56-57.

［6］ 申屠兰欣，赵敏，何丽娟，等.不同药剂对油菜菌核病的防治效果研究［J］.现代农业科技，2024（5）：60-62.