CCP、IL-6及SAA与类风湿关节炎患者疾病活动度的相关性

孙一鸣,冯灵杰,赵换青,封利欣

[1.焦作煤业(集团)有限责任公司中央医院 检验科,河南 焦作 454000;2.郑州市中心医院 风湿免疫科,河南 郑州 450000]

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以慢性进行性关节病变为主要特征的一种自身免疫性疾病,临床表现为局部关节反复发作的非化脓性、增生性滑膜炎,可逐渐破坏关节软骨,随着病情进展累及肘、腕和膝等关节,最终使关节受损或畸形,致残率较高[1]。RA的病因、发生机制至今未明,其核心策略是目标治疗,而这一目标是降低疾病活动度,故检测疾病活动度是RA诊治过程中不可或缺的一个环节,其决定了RA用药方案、疗效评估以及预后预测,一向是研究热点之一。目前,疾病活动度评分(disease activity score in 28 joints,DAS28)作为由欧洲抗风湿病联盟提出的、应用最广泛的评估标准,但非公认的金标准,其存在的主观依赖性等不完美处,可能会割裂达标指标与躯体功能一致性[2]。Gomez-Moreno等[3]报道,RA疾病活动度实质上是RA炎症发展过程,随着近年来检验技术与仪器的进步,关于炎症指标检测也日益受到重视,有望为RA疾病活动度检测探寻到更特异、敏感的炎症指标。抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptides,CCP)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)为临床常见的炎症因子,Lu等[4]、Yokota等[5]、Uda等[6]表明其与RA病情变化有关,但3项指标能否用于测定RA疾病活动度,相关报道鲜见。鉴于上,本研究以DAS28评分为金标准,评价血清CCP、IL-6及SAA水平对RA患者疾病活动度的诊断价值及其相关性,以供临床借鉴。

1 对象与方法

1.1 研究对象

便利抽样法选取2019年1月至2021年1月于焦作煤业(集团)有限责任公司中央医院就诊的RA患者120例为研究对象。纳入标准:(1)查体、实验室和影像学检查结果符合RA诊断标准[7];(2)年龄>18岁;(3)意识清醒,全程配合本研究所有项目,并签订了知情同意书。排除标准:(1)合并其他免疫系统疾病或血液系统疾病;(2)参与本研究前1周服用过影响血液学检查结果的药物;(3)合并严重心脑血管和肝肾功能障碍疾病;(4)同时参与其他研究。根据DAS28评分对RA的分级标准[8]进行分组:缓解组(<2.6分,43例)、轻度活动组(2.6～3.2分,32例)、中度活动组(3.2～5.1分,24例)和重度活动组(>5.1分,21例)。其中缓解组男23例,女20例;年龄43～80岁,平均(62.47±7.66)分;体重指数19～25 kg·m-2,平均(23.05±0.95)kg·m-2。轻度活动组男16例,女16例;年龄43～81岁,平均(62.49±7.51)分;体重指数19～25 kg·m-2,平均(22.98±1.02)kg·m-2。中度活动组男12例,女12例;年龄42～80岁,平均(62.41±7.53)分;体重指数19～25 kg·m-2,平均(22.87±0.92)kg·m-2。重度活动组男11例,女10例;年龄43～82岁,平均(62.39±7.45)分;体重指数19～25 kg·m-2,平均(22.89±1.14)kg·m-2。4组患者年龄、性别与体重指数等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院医学伦理委员会审批。

1.2 检测方法

(1)血清学检查:采集患者清晨空腹静脉血5 mL,3 000 r·min-1离心10 min获得血清,保存在-80 ℃。采用胶乳增强免疫比浊法检测血清CCP及SAA水平,采取量子点免疫荧光层析法检测IL-6水平,严格按试剂盒说明书进行,其中IL-6检测试剂盒为金准生物医学工程有限公司提供,CCP、SAA所用仪器为AU5800等全自动生化分析仪,CCP抗体测定试剂盒及仪器为宁波美康生物科技有限公司提供,SAA 试剂盒及仪器均由重庆中元生物技术有限公司提供。(2)DAS28检测:检查患者双肘、双肩、双手掌指、双腕、双膝、双手近端指间关节的压痛关节数(tender joint count,TJC)、肿胀关节数(swollen joint count,SJC)以及红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR),记录疾病总体疼痛视觉模拟评分(visual analogue scales,VAS),计算DAS28评分。公式:Y=0.28×sqrtX1+0.56×sqrtX2+0.014X3+0.7 lnX4,式中Y为DAS28评分,X1为SJC,X2为TJC,X3为VAS,X4为ESR。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 4组患者血清CCP、IL-6及SAA水平差异

缓解组、轻度活动组、中度活动组和重度活动组患者血清CCP、IL-6及SAA水平依次升高,组间差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 4组患者血清CCP、IL-6及SAA水平

2.2 血清CCP、IL-6及SAA水平与RA疾病活动度之间相关性

血清CCP、IL-6及SAA水平与RA患者DAS28评分之间均呈正相关关系(P<0.05),见表2。

表2 血清CCP、IL-6及SAA水平与RA患者DAS28评分之间相关性

2.3 血清CCP、IL-6及SAA水平对RA患者疾病活动度的诊断价值

按DAS28评分将RA患者分为缓解期、活动期,血清CCP、IL-6、SAA单一及联合诊断RA患者疾病活动度的AUC分别是0.681、0.663、0.704和0.845,其中联合诊断时曲线下面积(area under the curve,AUC)最大、特异度、敏感度最高,见表3。

表3 血清CCP、IL-6及SAA水平对RA患者疾病活动度的诊断价值

3 讨论

RA发病机制尚未阐明,但其病理改变已基本清楚,即炎症侵袭关节导致关节滑膜炎、滑膜血管翳形成,最终导致关节内软骨和软骨下骨质破坏。贺叶彬等[9]报道,RA患者发生关节畸形的概率高达70.97%,而目标治疗策略可延缓关节损伤的恶性进展,因而RA疾病活动度监测十分重要。RA作为一种以进行性、侵袭性关节炎为主要表现的慢性炎症疾病,大量研究证明炎症细胞因子在RA发病发展中扮演了重要角色,故炎症因子成为其疾病活动度评估指标的研究热点[10-11]。但迄今为止,RA疾病活动度诊断仍依靠肿痛关节数、ESR、晨僵时间和C反应蛋白水平等多种因素,缺乏特异性血清标志物,且ESR等生物标志物虽应用方便,但成本效益较高,在临床实践应用中已不堪重负。因此,探寻RA疾病活动度临床诊断新的血清学标志物已是势在必行。

本研究按DAS28评分进行RA疾病活动度分级,并尝试以CCP、IL-6及SAA作为血清标志物进行分析,结果显示,RA缓解组、轻度活动组、中度活动组和重度活动组的血清CCP、IL-6及SAA水平组间差异有统计学意义,提示CCP、IL-6及SAA可能具备鉴别RA疾病活动度的功能。Dai等[12]报道RA病因与CCP相关。近期研究表明,瓜氨酸为RA血清抗聚角蛋白微丝蛋白相关抗体识别的主要抗原决定簇,而CCP抗体是环状聚丝蛋白的多肽片段,因此成为首选的RA诊断血清学标志物[13]。IL-6为多效性细胞因子,在炎症反应、免疫调节中有重要作用,其促炎、抗炎作用有助于维持有效免疫反应,但其水平高会引起RA、青少年特发性关节炎等免疫调节疾病的病理状况[14]。SAA是一种高度保守的、有多重生物学功能的载脂蛋白,其作为T细胞和中性粒细胞等免疫细胞趋化物,可显著增强促炎细胞因子表达。Li等[15]已证明,SAA参与了RA乃至其并发症的发生发展。根据表1,随着RA疾病活动度上升,患者血清CCP、IL-6及SAA水平也随之升高,且上述指标水平在缓解期、轻度活动期、中度活动期与重度活动期之间的比较,差异有统计学意义,提示RA血清CCP、IL-6及SAA水平均有鉴别RA疾病活动度的潜力,临床医生可通过观察上述指标水平高低评估RA患者病情或疗效。DAS28评分主要根据患者疼痛、肿胀关节数、ESR和C反应蛋白等指标计算获得,综合反映了RA疾病活动度。Pearson法分析RA血清CCP、IL-6及SAA水平与DAS28评分之间相关性发现,CCP、IL-6、SAA与DAS28评分均呈正相关关系,提示CCP、IL-6及SAA水平能很好地反映RA疾病进展,是评估RA疾病活动度的潜在指标。

为进一步验证CCP、IL-6、SAA对RA疾病活动度的诊断效能,绘制ROC曲线分析其对RA缓解期和活动期的鉴别效果,结果显示,CCP、IL-6、SAA联合诊断RA疾病活动度的AUC高达0.845,高于单一指标。究其原因,CCP作为风湿自身抗体系统中以IgG型为主的抗体,阳性者往往出现或容易发展为关节骨质破坏,因而是RA敏感且特异的早期诊断指标,已被纳入2010年美国风湿病学会/欧洲风湿病联盟中关于RA的诊断标准[16]。但相关研究表明,有关节症状患者随访一段时间后,即使血清CCP为阴性者,最终也会发展为RA,且经影像学动态检查发现,这类患者也出现了骨质破坏[17]。因此,单纯采取CCP诊断RA尚不足以准确鉴别其疾病活动度,而结合IL-6和SAA进行互补、互相印证,可弥补各自敏感度不足、特异度不高等缺陷。根据表3可知,CCP特异度强,但敏感度不够高,而IL-6、SAA敏感度较高,尤其是SAA作为主要急性时相反应物,在炎症刺激4～6 h后在血清中的浓度可快速上升1 000倍,是极为敏感的炎症指标[18]。因此,CCP、IL-6、SAA联合使用可提高对RA疾病活动度的诊断准确性,且临床更倾向于发掘新的标志物并综合应用多种血清学指标判断RA疾病活动度。

4 结论

RA患者血清CCP、IL-6及SAA水平与其疾病活动度呈正相关关系,可作为RA患者疾病活动度诊断的潜在生物标志物,且联合使用时诊断效能更高。临床医生在鉴别RA患者疾病活动度时,可以血清CCP、IL-6及SAA检测结果为辅助诊断指标,以减少误诊等情况发生率。但本研究也存在一些不足,如样本量少,研究对象存在区域性限制,未分析CCP、IL-6、SAA之间相关性,关于CCP、IL-6、SAA对RA疾病活动度诊断效能仅限于缓解期和活动期等,这些将在未来完善研究。