红景天化学成分研究

刘 艳，尧俊涵，梅 瑀，潘 娟，管 伟，李萌萌，匡海学，杨炳友

红景天化学成分研究

刘 艳，尧俊涵，梅 瑀，潘 娟，管 伟，李萌萌，匡海学，杨炳友*

黑龙江中医药大学，教育部北药基础与应用研究重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150040

研究景天科植物红景天干燥根的化学成分，考察红景天中化学成分抗缺氧损伤作用。综合运用硅胶、ODS及HPLC等色谱方法进行系统的分离纯化，利用UV、IR、NMR、MS等光谱、波谱学手段对分得的化学成分进行结构鉴定。采用CCK-8法评价化合物对CoCl2诱导PC12细胞的保护作用。从红景天根70%乙醇提取物中分离并鉴定了37个化合物，包括苯丙素类19个，分别为对羟基桂皮酸（1）、咖啡酸（2）、6,7-二甲氧基香豆素（3）、2-甲氧基-4-(2-丙烯基)苯基β--吡喃葡萄糖苷（4）、1,2-diβglucopyranosyl-4-allylbenzene（5）、3,4,5-trihydroxy allylbenzene-3--β--glucopyranosyl-4--β--glucopyranoside（6）、刺五加苷B（7）、松柏苷（8）、肉桂基--β--吡喃葡萄糖苷（9）、1-feruloyloxy-2-methoxy cinnamic acid（10）、异落叶松脂素（11）、(7,8)-dehydrodiconiferyl alcohol 9-β-glucopyranoside（12）、(7,8)-脱氢双松柏醇-9-β--葡萄糖苷（13）、(7,8)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 9′--β--glucopyranoside（14）、(7,8)-7,8-dihydro-9′-hydroxyl-3′-methoxyl-8-hydroxymethyl-7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1′-benzofuranpropanol 9′--β--gluco- pyranoside（15）、(7,8)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4--β--glucopyranoside（16）、hyuganoside IIIa（17）、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-[4-(3-hydroxy-1-()-propenyl)-2,6-dimethoxyphenoxy]propyl-β--glucopyranoside（18）、金石蚕苷（19）；苯乙烷类6个，分别为酪醇（20）、苯乙醇--β--吡喃葡萄糖苷（21）、icariside D2（22）、-hydroxyphenethyl-β--glucopyranoside（23）、对羟基-苯乙基-6--没食子酰-β-葡萄糖苷（24）、苯乙醇-β-巢菜糖苷（25）；黄酮类4个，分别为根皮素（26）、异槲皮苷（27）、山柰酚-7葡萄糖苷（28）、表儿茶素-3没食子酸酯（29）；其他类8个，分别为3-methyl-but-2-en-1-yl-β--glucopyranoside（30）、大花红天素（31）、taxilluside A（32）、-linalool-3,6-oxide-β--glucopyranoside（33）、xylogranatinin（34）、马钱苷（35）、(6Z)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-one--β--glucopyranoside（36）、blumenyl C-β--glucopyranoside（37）。在20 μmol/L时，苯丙素类、苯乙烷类及黄酮类化合物均表现出明显的的抗缺氧损伤作用。化合物7、10、17～19、35为首次从景天科植物中分离得到，化合物4、6、26、28、32～34、36、37为首次从景天属植物中分离得到。体外抗缺氧损伤活性实验表明，在20 μmol/L时苯乙烷类化合物20、23对CoCl2损伤PC 12细胞保护作用最好，细胞存活率较高。

景天科；红景天；2-甲氧基-4-(2-丙烯基)苯基β吡喃葡萄糖苷；刺五加苷B；山柰酚-7葡萄糖苷；马钱苷

红景天为景天科植物大花红景天(Hook. f. et Thoms.) H. Ohba的干燥根和根茎。断面呈红色或紫红色，有时具裂隙。气芳香，味微苦涩、后甜[1]。生于海拔2 800～5 600 m的山坡草地、灌丛中、石缝中，广泛分布在东北、新疆以及西藏等地区[2]。作为一种传统的中药材，我国已有2 000多年的应用红景天的历史，自明代起，在《本草纲目》等古籍中具有记载。红景天中的化学成分种类丰富，主要包括黄酮类、苯乙烷类、苯丙素类、酚类、萜类、等成分，其中苯乙烷类是红景天中主要的活性成分。现代药理研究表明红景天具有抗炎、抗氧化、抗疲劳、抗缺氧、抗衰[3]、抗癌、保肝护肝、减缓轻度阿尔兹海默症症状以及潜在治疗帕金森病、重度抑郁病症的药理活性[4]。有研究表明红景天根部及茎中的主要活性提取物为红景天苷、没食子酸、酪醇及没食子酸乙酯，其中红景天苷、酪醇和没食子酸都有不同程度的促进缺氧心肌细胞活力的作用[5]。本研究对红景天的成分进行研究，从红景天70%乙醇提取物中分离并鉴定了37个化合物，包括19个苯丙素类：对羟基桂皮酸（phydroxycinnamic acid，1）、咖啡酸（caffeic acid，2）、6,7-二甲氧基香豆素（6,7-dimethoxycoumarin，3）、2-甲氧基-4-(2-丙烯基)苯基β吡喃葡萄糖苷（2-methoxy-4-(2-propenyl)phenyl β--glucopyrano- side，4）、1,2-diβglucopyranosyl-4-allylbenzene（5）、3,4,5-trihydroxy allylbenzene-3β--glucopyra- nosyl-4βglucopyranoside（6）、刺五加苷B（syringin，7）、松柏苷（abietin，8）、肉桂基β吡喃葡萄糖苷（cinnamyβglucopyranoside，9）、1-feruloyloxy-2-methoxy cinnamic acid（10）、异落叶松脂素（isolariciresinol，11）、(7,8)-dehydrodiconiferyl alcohol 9-β-glucopyranoside（12）、(7,8)-脱氢双松柏醇-9-β葡萄糖苷 [(7,8)-dehydrodiconiferyl alcohol 9-β--glucoside，13]、(7,8)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol9′--βglucopyranoside（14）、(7,8)-7,8-dihydro-9′-hydroxyl-3′-methoxyl-8-hydroxymethyl-7-(4-hydroxy- 3-methoxyphenyl)-1′-benzofuranpropanol 9′βglucopyranoside（15）、(7,8)-dihydrodehydro- diconiferyl alcohol 4βglucopyranoside（16）、hyuganoside IIIa（17）、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-[4-(3-hydroxy-1-()-propenyl)-2,6-dimethoxyphenoxy]propyl-βglucopyranoside（18）、金石蚕苷（poliumoside，19）；苯乙烷类6个，分别为酪醇（tyrosol，20）、苯乙醇β吡喃葡萄糖苷（phenethanol--βglucopyranoside，21）、icariside D2（22）、-hydroxyphenethylβglucopyranoside（23）、对羟基-苯乙基-6没食子酰-β-葡萄糖苷（4-hydroxy-phenylethyl-6'--galloyl-β-glucoside，24）、苯乙醇-β-巢菜糖苷（phenethanol-β-cycloside，25）；黄酮类4个，分别为根皮素（phloretin，26）、异槲皮苷（isoquercetin，27）、山柰酚-7葡萄糖苷（kaempferol-7βglucoside，28）、表儿茶素-3没食子酸酯（epicatechin-3gallate，29）；其他类8个，分别为3-methyl-but-2-en-1-yl-βglucopyranoside（30）、大花红天素（crenulatin，31）、taxilluside A（32）、-linalool-3,6-oxide-βglucopyranoside（33）、xylogranatinin（34）、马钱苷（loganin，35）、(6)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-oneβglucopyranoside（36）、blumenyl--βglucopyranoside（37）。化合物1～19为苯丙素类化合物，化合物20～25为苯乙烷类化合物，化合物26～29为黄酮类化合物，化合物30～37为其他类化合物，其中7、10、17～19、35为首次从景天科植物中分离得到，化合物4、6、26、28、32～34、36、37为首次从景天属中分离得到。采用CoCl2对PC 12细胞诱导低氧损伤为模型，研究红景天对PC 12细胞的保护作用。结果表明，不同浓度（0.625～20 μmol/L）苯丙素类、苯乙烷类、黄酮类化合物均能保护CoCl2损伤的PC 12细胞，且当浓度为20 μmol/L时，苯乙烷类化合物对CoCl2损伤的PC 12细胞保护作用最显著。苯乙烷类化合物20、23表现出对CoCl2损伤PC 12细胞的保护作用最显著，其细胞存活率分别为（69.63±0.71）%和（65.36±0.44）%。该研究对红景天中的化学成分进行了系统的化学成分研究，为阐明红景天的药效成分奠定了实验基础，为充分开发和利用红景天的资源提供了理论依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

Bruker-400超导核磁共振光谱仪（Bruker公司），Waters2695-2996分析型HPLC（Waters公司），LC-20AR制备型HPLC（日本岛津公司），Thermo Orbitrap Fusion Lumos Tribrid质谱仪（Thermo公司），BT 25S型电子分析天平（德国Sartorius公司），ELx 800酶标仪（美国BioTek公司），GI54DS型高校专用高压灭菌器（厦门致微仪器有限公司），150i型二氧化碳培养箱（美国Thermo公司），TDL-4型低速离心机（上海安亭科学仪器厂），Vert-A1型荧光倒置显微镜（德国Carl Zeiss公司），WT-1ND型超净台（北京王堂蓝翼科技有限公司）。

1.2 材料

分析型色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm，Waters公司SunFire），半制备型色谱柱（250 mm×10 mm，4 μm，YMC公司），制备型色谱柱（250 mm×20 mm，5 μm，岛津公司），大孔树脂sp-825（三菱公司），硅胶80～100、200～300目（青岛海洋化工厂），柱色谱用ODS（ODS-A-HG，50 μm，YMC公司），薄层色谱硅胶板（Silicagel60 F254，Merck公司），薄层色谱反相板（Rp-18，Merck公司），柱色谱用化学试剂（分析纯，天津试剂一厂），色谱级甲醇（Merck公司），氘代甲醇（美国剑桥CIL公司），CCK-8（上海恒斐生物科技有限公司），奥美拉唑（天津天药药业股份有限公司），1640（美国Corning公司），DMSO（Vetec），96孔板（美国Corning公司），10 000 U/mL青霉素/链霉素（美国Corning公司），PC12细胞（武汉普诺赛公司），胎牛血清（Thermo Fisher Scientific），无水乙醇（天津富宇精细化工有限公司），胰蛋白酶细胞消化液（LEAGENE）。

红景天在2021年8月采收于黑龙江大兴安岭，经黑龙江中医药大学药学院药用植物教研室樊锐锋副教授鉴定为景天科植物红景天(Hook. f. et Thoms.) H. Ohba的地上部分。原植物标本（20210827）保存在黑龙江中医药大学中药化学实验室。

2 方法

2.1 提取与分离

干燥的红景天药材（30 kg），用8倍量70%的乙醇回流提取3次，每次时间为2 h。合并提取液，减压浓缩，回收溶剂获得红景天提取物浸膏6.5 kg，出膏率为21.7%，浸膏（2.0 kg）经sp-825大孔树脂柱色谱，得到水洗脱组分（600.5 g）、40%乙醇洗脱组分（325.0 g）和95%乙醇洗脱组分（310.2 g）。

40%乙醇洗脱组分（325.0 g）通过硅胶作柱色谱（200～300目，二氯甲烷-甲醇100∶0→0∶:1）梯度洗脱，洗脱液经薄层硅胶板（TLC）检测合并斑点相同部分，最终得到9个组分（Fr. A～I）。

Fr. E经ODS柱色谱分离，得组分Fr. E1～E8，取其中的Fr. E7组分经制备型高效液相（甲醇-水14∶86）分离得化合物7（3.0 mg，R＝22.0 min）、9（6.0 mg，R＝37.0 min）、14（5.4 mg，R＝50.0 min）、15（2.7 mg，R＝26.0 min）、26（4.5 mg，R＝31.0 min）。

Fr. C经ODS柱色谱分离，得组分Fr. C1～ C16，其中Fr. C7经制备型高效液相（甲醇-水34∶66）分离得化合物19（3.4 mg，R＝24.0 min）。

Fr. H经ODS柱色谱分离，得组分Fr. H1～ H35，组分Fr. H5经制备型高效液相（甲醇-水30∶70）分离得化合物27（6.6 mg，R＝23.0 min）、33（3.8 mg，R＝41.0 min）、29（5.9 mg，R＝34.0 min）、Fr. H11经过制备液相（甲醇-水51∶49）分离得化合物1（4.5 mg，R＝21.0 min）、8（2.9 mg，R＝35.0 min）、13（3.6 mg，R＝30.0 min）。

Fr. G经ODS柱色谱分离，得组分Fr. G1～ G25，组分Fr. G9经制备液相（甲醇-水41∶59）得到化合物32（5.2 mg，R＝39.0 min），组分Fr. G14经制备液相（甲醇-水32∶68）得化合物21（3.3 mg，R＝21.0 min）、23（2.1 mg，R＝24.0 min）、24（9.7 mg，R＝35.0 min）、28（2.6 mg，R＝35.0 min），组分Fr. G4经制备液相（甲醇-水42∶58）得化合物16（3.3 mg，R＝50.0 min）、17（5.3 mg，R＝41.0 min），组分Fr. G8经制备液相（甲醇-水43∶57）得化合物5（4.4 mg，R＝27.0 min），组分Fr. G6经制备型高效液相（甲醇-水46∶54）分离得化合物4（5.4 mg，R＝25.0 min）、10（4.6 mg，R＝39.0 min），组分Fr. G21经制备型液相（甲醇-水49∶51）分离得化合物20（3.5 mg，R＝29.0 min）、37（4.4 mg，R＝26.0 min）。

Fr. I经ODS柱色谱分离，得组分Fr. I1～ I32，组分Fr. I4经制备型液相（甲醇-水41∶69）分离得化合物30（3.7 mg，R＝23.0 min），组分Fr. I8经制备型液相（甲醇-水40∶60）得化合物18（3.3 mg，R＝22.0 min）、35（3.7 mg，R＝33.0 min），组分Fr. I7经制备型液相得到化合物11（2.5 mg，R＝33.0 min）、31（4.3 mg，R＝36.0 min）、36（3.4 mg，R＝36.0 min），组分Fr. I12经制备型液相（甲醇-水44∶56）分离得化合物6（4.5 mg，R＝31.0 min）。

Fr. B1经制备型液相（甲醇-水23∶77）分离得化合物2（3.6 mg，R＝23.0 min），组分Fr. B3经制备型液相（甲醇-水59∶41）分离得化合物12（6.9 mg，R＝45.0 min）、34（2.3 mg，R＝35.0 min），组分Fr. B11经制备型高效液相（甲醇-水44∶56）分离得化合物3（3.3 mg，R＝30.0 min）。

2.2 抗缺氧损伤活性筛选

通过采用CoCl2对PC12细胞诱导低氧损伤为模型，研究红景天对PC12细胞的保护作用。利用1 mL含1% DMSO超声涡旋一定质量的化合物1～37单体粉末，制成2.0 mmol/mL的母液，母液过0.22 μmol/L滤膜滤过除菌，保存至−20℃中，使用时将其常温融化，吸取一定量体积的母液加入RPMI 1640完全培养基分别稀释至0.625、1.25、2.5、5、10、20 μmol/L达到工作浓度。将细胞分为RPMI 1640完全培养基（对照组）、CoCl2200 μmol/L（模型组）、CoCl2200 μmol/L＋NAC（阳性对照组，应在CoCl2处理之前加入NAC处理60 min[6]）、CoCl2200 μmol/L＋各浓度化合物（给药组）、RPMI 1640基础培养基（空白组）。除空白组外，其余各组中均接种100 μL对数生长期细胞（密度为1×104/mL），并在37 ℃、5% CO2条件下培养至细胞贴壁。给药组为将不同浓度（0.625、1.25、2.5、5、10、20 μmol/L）的化合物加入模型培养基1 h后，加入200 μmol/LCoCl2于37 ℃、5% CO2条件下培养22 h。培养结束后，加入10 μL CCK-8继续培养2 h。用酶标仪在450 nm下检测各孔吸光度（）值，并计算给药组细胞与对照组细胞活力的比值（均减去空白组）重复3次实验。根据公式计算其细胞存活率。选出具有较好体外抗缺氧损伤活性的化合物。

细胞存活率＝(p－0)/(c－0)

p为实验组吸光度值，c为对照组吸光度值，0为空白组吸光度值。

3 结果

3.1 结构鉴定

化合物1：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 163.053 1 [M＋H]+，分子式为C9H8O3；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.62 (1H, d,= 15.9 Hz，H-7), 7.45 (2H, m, H-2, 6), 6.82 (2H, m, H-3, 5), 6.29 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 171.1 (C-9), 161.0 (C-4), 146.7 (C-7), 131.1 (C-2), 131.1 (C-6), 127.2 (C-1), 116.8 (C-3), 116.8 (C-5), 115.6 (C-8)。以上数据与文献报道基本一致[7]，故鉴定化合物1为对羟基桂皮酸。

化合物2：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 179.035 2 [M－H]−，分子式为C9H8O4；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.55 (1H, d,= 2.0 Hz, H-7), 7.05 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 6.95 (1H, dd,= 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.80 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.24 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 171.1 (C-9), 149.4 (C-4), 147.0 (C-7), 146.8 (C-3), 127.8 (C-1), 122.8 (C-6), 116.5 (C-5), 115.6 (C-8), 115.1 (C-2)。以上数据与文献报道基本一致[8]，故鉴定化合物2为咖啡酸。

化合物3：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 207.065 7 [M＋H]+，分子式为C11H10O4；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.62 (1H, d,= 9.5 Hz, H-4), 6.85 (1H, d,= 5.2 Hz, H-5), 6.28 (1H, d,= 9.4 Hz, H-3), 3.95 (3H, s, 6-OCH3), 3.92 (3H, s, 7-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 161.6 (C-2), 153.0 (C-7), 150.2 (C-9), 146.5 (C-6), 143.4 (C-4), 113.7 (C-3), 111.6 (C-10), 108.1 (C-5), 100.2 (C-8), 56.5 (6-OCH3), 56.5 (7-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[9]，故鉴定化合物3为6,7-二甲氧基香豆素。

化合物4：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 327.143 3 [M＋H]+，分子式为C16H22O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.07 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.81 (1H, s, H-2), 6.71 (1H, d,= 8.2 Hz, H-6), 5.94 (m, H-8), 5.04 (1H, dd,= 17.0, 2.2 Hz, H-9), 4.84 (3H, s, H-1), 3.83 (3H, s, -OCH3), 3.32 (2H, d,= 6.7 Hz, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 150.8 (C-2), 146.3 (C-1), 139.0 (C-8), 136.4 (C-4), 122.1 (C-5), 118.2 (C-6), 115.8 (C-9), 114.1 (C-3), 103.0 (C-1), 78.2 (C-3), 77.8 (C-5), 74.9 (C-2), 71.3 (C-4), 62.5 (C-6), 56.7 (-OCH3), 40.7 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[10]，故鉴定化合物4为2-甲氧基-4-(2-丙烯基)苯基β吡喃葡萄糖苷。

化合物5：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 475.180 1 [M＋H]+，分子式为C21H30O12；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.15 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 7.08 (1H, d,= 1.3 Hz, H-2), 6.83 (1H, dd,= 8.2, 1.2 Hz, H-6), 5.93 (1H, m, H-8), 5.03 (1H, m, H-9), 4.82 (1H, d,= 7.5 Hz, H-1), 4.80 (1H, d,= 7.5 Hz, H-1), 3.33 (2H, m, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.2 (C-3), 147.5 (C-4), 138.8 (C-8), 137.4 (C-1), 124.8 (C-6), 120.9 (C-5), 120.9 (C-2), 116.0 (C-9), 104.3 (C-1), 104.2 (C-1), 78.2 (C-5), 78.2 (C-5), 77.8 (C-3), 77.8 (C-3), 75.1 (C-2), 75.1 (C-2), 71.3 (C-4), 71.3 (C-4), 62.4 (C-6), 62.4 (C-6), 40.6 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[11]，故鉴定化合物5为1,2-diβglucopyranosyl-4-allylbenzene。

化合物6：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 491.175 5 [M＋H]+，分子式为C21H30O13；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.66 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.44 (1H, d,= 1.8 Hz, H-6), 5.91 (1H, m, H-8), 5.06 (1H, dd,= 10.2, 1.8 Hz, H-9), 5.03 (1H, brd,= 10.2 Hz, H-9), 4.81 (1H, d,= 7.2 Hz, Glc1-H-1), 4.76 (1H, d,= 7.2 Hz, Glc2-H-1)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 151.9 (C-3), 151.7 (C-5), 138.5 (C-8), 38.1 (C-1), 134.4 (C-4), 116.2 (C-9), 112.2 (C-6), 110.2 (C-2), 106.6 (C-1), 103.5 (C-1), 78.2 (C-3), 78.2 (C-5), 78.2 (C-5), 75.3 (C-2), 75.3 (C-2), 71.3 (C-4), 71.3 (C-4), 62.4 (C-6), 62.4 (C-6), 41.0 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[12]，故鉴定化合物6为3,4,5-trihydroxy allylbenzene-3βglucopyranosyl-4βglucopyranoside。

化合物7：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 373.194 0 [M＋H]+，分子式为C17H24O9；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.55 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 6.33 (1H, dt,= 15.8, 5.6 Hz, H-8), 4.88 (1H, o, H-1), 4.21 (2H, dd,= 5.6, 1.3 Hz, H-9), 3.86×2 (6H, s, 3, 5-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 154.4 (C-6), 154.4 (C-2), 135.9 (C-7), 135.3 (C-1), 131.3 (C-4), 130.0 (C-8), 105.5 (C-3), 105.4 (C-5), 105.4 (C-1), 78.4 (C-5), 77.8 (C-3), 75.8 (C-2), 71.4 (C-4), 63.6 (C-9), 62.6 (C-6), 57.0 (C-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物7为刺五加苷B。

化合物8：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 343.139 1 [M＋H]+，分子式为C16H22O8；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.10 (1H, d,= 8.3 Hz, H-5), 7.06 (1H, d,= 1.9 Hz, H-2), 6.94 (1H, dd,= 8.3, 1.9 Hz, H-6), 6.54 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 6.27 (1H, dt,= 15.8, 5.7 Hz, H-8), 4.88 (1H, d,= 7.5 Hz, H-1), 4.20 (2H, dd,= 5.8, 1.4 Hz, H-9), 3.87 (3H, s, H-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 151.0 (C-3), 147.8 (C-4), 133.8 (C-1), 131.4 (C-7), 129.0 (C-8), 120.8 (C-6), 118.1 (C-5), 111.5 (C-2), 102.9 (C-1), 78.3 (C-3), 78.0 (C-5), 75.0 (C-2), 71.5 (C-4), 63.8 (C-9), 62.6 (C-6), 56.8 (-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[14]，故鉴定化合物8为松柏苷。

化合物9：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 297.133 5 [M＋H]+，分子式为C15H20O6；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.41 (1H, d,= 7.4 Hz, H-2,6), 7.29 (1H, d,= 7.4 Hz, H-3,5), 7.21 (2H, m, H-9), 6.68 (1H, d,= 16.0 Hz, H-4), 6.36 (1H, dt,= 16.0, 5.9 Hz, H-8), 4.52 (1H, ddd,= 12.8, 5.6, 1.2 Hz, H-7), 4.36 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 4.32 (1H, ddd,= 13.2, 6.4, 1.1 Hz, H-2), 3.88 (1H, dd,= 11.9, 2.3 Hz, H-5), 3.67 (1H, dd,= 11.9, 5.5 Hz, H-4), 3.28 (2H, m, H-6), 3.22 (1H, m, H-3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 138.2 (C-1), 133.8 (C-7), 129.6×2 (C-3, 5), 128.7×2 (C-2, 6), 127.5 (C-4), 126.6 (C-8), 103.3 (C-1), 78.1×2 (C-3, 5), 75.1 (C-2), 71.6 (C-4), 70.8 (C-9), 62.8 (C-6)。以上数据与文献报道基本一致[15]，故鉴定化合物9为肉桂基β吡喃葡萄糖苷。

化合物10：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 369.098 1 [M－H]−，分子式为C20H18O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.57 (2H, d,= 15.7 Hz, H-7, 7), 7.20×2 (2H, s, H-3, 3), 7.10×2 (2H, d,= 7.9 Hz, H-5, 5), 6.82×2 (2H, d,= 7.9 Hz, H-6, 6), 6.62 (1H, d,= 15.7 Hz, H-8,8), 3.90 (6H, s, H-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 184.8×2 (C-9, 9), 150.5×2 (C-1, 1), 149.4×2 (C-2, 2), 142.2×2 (C-7, 7), 128.6×2 (C-4,4), 124.1×2 (C-5, 5), 122.2×2 (C-8, 8), 116.6×2 (C-6, 6), 111.7×2 (C-3,3), 56.5×2 (2, 2-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[16]，故鉴定化合物10为1-feruloyloxy-2-methoxy cinnamic acid。

化合物11：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 361.165 1 [M＋H]+，分子式为C20H24O6；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.74 (1H, d,= 7.9 Hz, H-5), 6.67 (1H, s, H-2), 6.67 (1H, s, H-2), 6.60 (1H, d,= 8.0 Hz, H-6), 6.19 (1H, s, H-6), 3.78 (3H, s, -OCH3), 3.76 (3H, s, -OCH3), 3.70 (1H, m, H-9), 3.67 (2H, m, H-9), 3.39 (1H, m, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.0 (C-3), 147.2 (C-3), 145.9 (C-4), 145.2 (C-4), 138.6 (C-6), 134.1 (C-1), 129.0 (C-1), 123.2 (C-6), 117.3 (C-5), 116.0 (C-5), 113.7 (C-2), 112.3 (C-2), 65.9 (C-9), 62.2 (C-9), 56.4 (-OCH3,), 48.0 (C-7), 48.0 (C-8), 40.0 (C-8), 33.6 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[17]，故鉴定化合物11为异落叶松脂素。

化合物12：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 523.217 9 [M＋H]+，分子式为C26H34O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.01 (1H, d,= 1.9 Hz, H-2), 6.89 (1H, dd,= 8.1, 1.9 Hz, H-6), 6.79 (1H, s, H-6), 6.78 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.74 (1H, s, H-2), 5.61 (1H, d,= 6.4 Hz, H-7), 4.37 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.87 (3H, s, 3-OCH3), 3.84 (3H, s, 3-OCH3), 3.58 (2H, t,= 6.5 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 147.6 (C-3), 146.1 (C-4), 146.0 (C-4), 143.8 (C-3), 135.5 (C-1), 133.4 (C-1), 128.3 (C-5), 118.3 (C-6), 116.8 (C-6), 114.7 (C-5), 112.8 (C-2), 109.3 (C-2), 103.2 (C-1), 87.6 (C-7), 76.9 (C-5), 76.7 (C-3), 73.8 (C-2), 71.0 (C-9), 70.3 (C-4), 61.4 (C-6), 60.8 (C-9), 55.4 (3-OCH3), 55.0 (3-OCH3), 51.9 (C-8), 34.4 (C-8), 31.5 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[18]，故鉴定化合物12为(7,8)-dehydrodiconiferyl alcohol-9-β-glucopyranoside。

化合物13：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 521.202 2 [M＋H]+，分子式为C26H32O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.99 (1H, s, H-6), 6.96 (1H, brs, H-2), 6.96 (1H, brs, H-2), 6.81 (1H, d,= 8.1 Hz, H-6), 6.79 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.62 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 6.24 (1H, d,= 15.8, 6.1 Hz, H-8), 5.54 (1H, d,= 6.3 Hz, H-7), 4.51 (2H, dd,= 12.5, 5.8 Hz, H-9a), 4.31 (2H, dd,= 12.4, 6.8 Hz, H-9b), 4.39 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.87 (3H, s, 3-OCH3), 3.82 (3H, s, 3-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.3 (C-4), 149.0 (C-3), 147.5 (C-4), 145.4 (C-3), 134.4 (C-1), 134.2 (C-7), 132.2 (C-1), 130.3 (C-5), 124.2 (C-8), 119.7 (C-6), 116.6 (C-6), 116.2 (C-5), 112.1 (C-2), 110.5 (C-2), 103.1 (C-1), 89.3 (C-7), 78.0 (C-3), 77.9 (C-5), 75.1 (C-2), 71.6 (C-4), 71.0 (C-9), 64.8 (C-9), 62.8 (C-6), 56.7 (3-OCH3), 56.4 (3-OCH3), 55.0 (C-8)。以上数据与文献报道基本一致[19]，故鉴定化合物13为(7,8)-脱氢双松柏醇-9-β葡萄糖苷。

化合物14：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 523.217 3 [M＋H]+，分子式为C26H34O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.95 (1H, s, H-2), 6.83 (1H, d,= 7.7 Hz, H-6), 6.78 (1H, d,= 10.0 Hz, H-5), 6.77 (1H, s, H-2), 6.75 (1H, s, H-6), 5.54 (1H, d,= 6.2 Hz, H-7), 4.25 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.93 (1H, dt,= 9.7, 6.3 Hz, H-9), 3.86 (3H, s, 3-OCH3), 3.84 (1H, m, H-9), 3.82 (3H, s, 3-OCH3), 3.76 (1H, dt,= 10.7, 7.1 Hz, H-9), 3.55 (1H, m, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.0 (C-3), 147.5 (C-4), 147.5 (C-4), 145.2 (C-3), 136.9 (C-1), 134.9 (C-1), 130.0 (C-5), 119.7 (C-6), 118.1 (C-6), 116.1 (C-5), 114.3 (C-2), 110.6 (C-2), 104.5 (C-1), 89.0 (C-7), 78.2 (C-3), 77.9 (C-5), 75.2 (C-2), 71.7 (C-4), 69.9 (C-9), 65.0 (C-9), 62.8 (C-6), 56.8 (3-OCH3), 56.4 (3-OCH3), 55.5 (C-8), 33.0 (C-7), 32.9 (C-8)。以上数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物14为(7,8)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol-9′βgluco- pyranoside。

化合物15：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 509.202 1 [M＋H]+，分子式为C26H34O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.95 (1H, d,= 1.9 Hz, H-2), 6.83 (1H, dd,= 8.2, 1.7 Hz, H-6), 6.77 (1H, s, H-6), 6.76 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.75 (1H, s, H-2), 5.49 (1H, d,= 6.3 Hz, H-7), 4.25 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.93 (1H, m, H-9b), 3.86 (3H, s, 3-OCH3), 3.84 (1H, m, H-9a), 3.82 (3H, s, 3-OCH3), 3.76 (1H, m, H-9b), 3.53 (1H, m, H-9a)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.1 (C-3), 147.5 (C-4), 147.5 (C-4), 145.2 (C-3), 136.8 (C-1), 134.8 (C-1), 129.9 (C-5), 119.7 (C-6), 118.1 (C-6), 116.1 (C-5), 114.2 (C-2), 110.6 (C-2), 104.5 (C-1), 89.0 (C-7), 78.2 (C-3), 78.0 (C-5), 75.2 (C-2), 71.7 (C-4), 69.9 (C-9), 65.0 (C-9), 62.8 (C-6), 56.8 (3-OCH3), 56.4 (3-OCH3), 55.4 (C-8)。以上数据与文献报道基本一致[21]，故鉴定化合物15为(7,8)-7,8-dihydro-9′-hydroxyl-3′-methoxyl-8-hydroxy-methyl-7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1′-benzofuran- propanol 9′βglucopyranoside。

化合物16：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 523.217 4 [M＋H]+，分子式为C26H34O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.14 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5), 7.03 (1H, d,= 1.3 Hz, H-2), 6.93 (1H, dd,= 8.4, 1.4 Hz, H-6), 6.72×2 (2H, d,= 10.5 Hz, H-2, 6), 5.55 (1H, d,= 5.8 Hz, H-7), 4.88 (1H, d,= 7.3 Hz, H-1), 3.88 (3H, s, 3-OCH3), 3.83 (3H, s, 3-OCH3), 3.57 (2H, t,= 6.5 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 151.0 (C-3), 147.6 (C-4), 147.5 (C-4), 145.3 (C-3), 138.4 (C-1), 137.1 (C-1), 129.6 (C-5), 119.4 (C-6), 118.1 (C-5), 118.0 (C-2), 114.2 (C-6), 111.2 (C-2), 102.8 (C-1), 88.5 (C-7), 78.2 (C-3), 77.9 (C-5), 74.9 (C-2), 71.4 (C-4), 65.1 (C-9), 62.5 (C-6), 62.3 (C-9), 56.7 (3, 3-OCH3), 55.7 (C-8), 35.8 (C-8), 32.9 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[22]，故鉴定化合物16为(7,8)-dihydrodehydrodi coniferyl alcohol 4βglucopyranoside。

化合物17：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 539.211 7 [M＋H]+，分子式为C26H34O12；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.08 (1H, s, H-2), 7.03 (1H, s, H-2), 6.92 (1H, brd,= 8.0 Hz, H-6), 6.86 (1H, dd,= 8.4, 1.0 Hz, H-6), 6.76 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5), 6.70 (1H, d,= 8.3 Hz, H-5), 6.61 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 6.27 (1H, dt,= 15.8, 6.1 Hz, H-8), 4.36 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.89 (3H, s, 3-OCH3), 3.80 (3H, s, 3-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 151.7 (C-3), 149.4 (C-4), 148.8 (C-3), 147.2 (C-4), 133.8 (C-7), 133.6 (C-1), 132.9 (C-1), 125.3 (C-8), 121.0 (C-6), 120.7 (C-6), 118.7 (C-5), 115.8 (C-5), 111.7 (C-2), 111.3 (C-2), 103.3 (C-1), 87.0 (C-8), 78.1 (C-5), 78.0 (C-3), 75.1 (C-2), 74.0 (C-7), 71.7 (C-4), 70.9 (C-9), 62.8 (C-6), 61.9 (C-9), 56.6 (3-OCH3), 56.3 (3-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[23]，故鉴定化合物17为hyuganoside IIIa。

化合物18：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 569.223 5 [M＋H]+，分子式为C27H36O13；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.11 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.95 (1H, dd,= 8.1, 1.8 Hz, H-6), 6.79×2 (2H, s, H-3, 5), 6.78 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.58 (1H, m, H-7), 6.36 (1H, dt,= 15.8, 5.6 Hz, H-8), 4.61 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1), 3.90 (6H, s, 2, 6-OCH3), 3.88 (3H, s, -OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 154.5 (C-2, 6), 148.5 (C-3), 147.2 (C-4) 136.1 (C-1), 135.0 (C-4), 131.8 (C-1), 131.8 (C-7), 130.0 (C-8), 121.3 (C-6), 115.6 (C-5), 112.6 (C-2), 105.2 (C-1), 104.9 (C-3, 5), 87.0 (C-8), 82.2 (C-7), 78.0 (C-3), 77.8 (C-5), 75.6 (C-2), 71.4 (C-4), 63.5 (C-9), 62.5 (C-9), 61.2 (C-6), 56.7 (-OCH3×2), 56.4 (C-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[24]，故鉴定化合物18为3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-[4-(3-hydroxy-1-()-propenyl)-2,6-dimethoxyphenoxy] propyl-βglucopyranoside。

化合物19：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 521.201 6 [M＋H]+，分子式为C26H32O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.60 (1H, d,= 15.8Hz, H-7), 7.06 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 6.96 (1H, dd,= 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.78 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.69 (1H, d,= 3.0 Hz, H-2), 6.68 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.57 (1H, dd,= 8.0, 2.0 Hz, H-6), 6.28 (1H, d,= 15.8 Hz, H-8), 5.19 (1H, d,= 1.4 Hz, H-1), 4.63 (1H, d,= 1.3 Hz, H-1), 4.37 (1H, d,= 7.9 Hz, H-1), 3.98 (1H, m, H-8a), 3.74 (1H, m, H-8b), 2.79 (2H, m, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 168.0 (C-9), 149.8 (C-4), 148.0 (C-7), 146.8 (C-3), 146.1 (C-4), 144.7 (C-3), 131.4 (C-1), 127.6 (C-1), 123.2 (C-6), 121.3 (C-6), 117.1 (C-2), 116.5 (C-5), 116.3 (C-5), 115.2 (C-2), 114.7 (C-8), 104.3 (C-1), 103.0 (C-1), 102.3 (C-1), 81.6 (C-3), 76.2 (C-2), 74.7 (C-5), 73.9(C-4), 73.8 (C-4), 72.4 (C-2), 72.3 (C-8), 72.3 (C-2), 72.0 (C-3), 72.0 (C-3), 70.4 (C-4), 70.4 (C-5), 69.9 (C-5), 67.5 (C-6), 36.7 (C-7), 18.4 (C-6), 18.0 (C-6)。以上数据与文献报道基本一致[25]，故鉴定化合物19为金石蚕苷。

化合物21：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 285.133 9 [M＋H]+，分子式为C14H20O6；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.25 (4H, m, H-2, 3, 5, 6), 7.17 (1H, m, H-4), 4.36 (1H, d,= 7.9 Hz, H-1), 4.11 (1H, m, H-8), 3.76 (1H, m, H-2), 2.95 (2H, m, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 139.6 (C-1), 129.8 (C-3, 5), 129.1 (C-2, 6), 127.0 (C-4), 103.9 (C-1), 77.6 (C-3), 77.4 (C-5), 74.6 (C-2), 71.5 (C-4), 71.2 (C-8), 62.4 (C-6), 36.9 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[27]，故鉴定化合物21为苯乙醇β吡喃葡萄糖苷。

化合物22：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 301.127 7 [M＋H]−，分子式为C14H20O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.02 (2H, d,= 8.4 Hz, H-2, 6), 6.70 (2H, d,= 8.4 Hz, H-3, 5), 3.61 (2H, t,= 7.1 Hz, H-8), 2.67 (2H, t,= 7.1 Hz, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 157.6 (C-4), 134.2 (C-1), 130.8 (C-2), 130.8 (C-6), 117.8 (C-3), 117.8 (C-5), 102.5 (C-1), 78.0 (C-3), 78.0 (C-5), 74.9 (C-2), 71.4 (C-4), 64.3 (C-8), 62.5 (C-6), 39.4 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[28]，故鉴定化合物22为Icariside D2。

化合物23：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 301.128 2 [M＋H]+，分子式为C14H20O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.08×2 (2H, d,= 8.3 Hz, H-2, 6), 6.71 (2H, d,= 8.3 Hz, H-3, 5), 4.31 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 156.8 (C-4), 130.9 (C-2), 130.9 (C-6), 130.7 (C-1), 116.1 (C-3), 116.1 (C-5), 104.4 (C-1), 78.1 (C-5), 77.9 (C-3), 75.1 (C-2), 72.1 (C-8), 71.6 (C-4), 62.7 (C-6), 36.4 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[29]，故鉴定化合物23为-hydroxyphenethylβglucopyra- noside。

化合物24：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 453.138 4 [M＋H]−，分子式为C21H24O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.09 (2H, s, Glc-H-2), 6.96 (2H, d,= 8.4 Hz, H-2, 6), 6.64 (2H, d,= 8.4 Hz, H-3, 5), 3.91, 3.69 (2H, m, H-8), 2.78 (2H, m, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 168.4 (C-7), 156.6 (C-1), 146.5 (C-2), 146.5 (C-6), 139.8 (C-1), 130.9 (C-4), 130.6 (C-3), 130.6 (C-5), 121.4 (C-4), 116.1 (C-2), 116.1 (C-6), 110.2 (C-3), 110.2 (C-5), 104.4 (C-1), 77.9 (C-3), 75.4 (C-5), 75.0 (C-2), 72.2 (C-8), 71.7 (C-4), 64.7 (C-6), 36.4 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[30]，故鉴定化合物24为对羟基-苯乙基-6没食子酰-β-葡萄糖苷。

化合物25：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 417.175 5 [M＋H]+，分子式为C19H28O10；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.26 (4H, d,= 3.2 Hz, H-2, 3, 5, 6), 7.17 (1H, d,= 3.5 Hz, H-4), 4.30 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1, 1), 3.85 (2H, d,= 12.3 Hz, H-8), 2.93 (2H, t,= 7.2 Hz, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 140.1 (C-1), 130.0 (C-3), 130.0 (C-5), 129.4 (C-2), 129.4 (C-6), 127.2 (C-4), 105.1 (C-1), 104.4 (C-1), 77.9 (C-3), 76.9 (C-5), 75.0 (C-2), 74.2 (C-3), 72.4 (C-2), 71.8 (C-8), 71.6 (C-4), 69.5 (C-6), 69.4 (C-4), 66.7 (C-5), 37.2 (C-7)。以上数据与文献报道基本一致[31]，故鉴定化合物25为苯乙醇-β-巢菜糖苷。

化合物26：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 275.090 9 [M＋H]+，分子式为C15H14O5；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.04 (2H, d,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.73 (2H, d,= 8.5 Hz, H-3, 5), 5.85 (2H, s, H-3, 5), 3.26 (2H, t,= 1.3 Hz, H-α), 2.84 (2H, t,= 8.1 Hz, H-β)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 206.4 (C＝O), 166.1 (C-4), 165.8×3 (C-2, 6), 156.5 (C-4), 134.0 (C-1), 130.3×2 (C-2, 6), 116.1×2 (C-3, 5), 105.3 (C-1), 95.8×2 (C-3, 5), 47.3 (C-α), 31.5 (C-β)。以上数据与文献报道基本一致[32]，故鉴定化合物26为根皮素。

化合物27：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 465.103 8 [M＋H]+，分子式为C21H20O12；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.71 (1H, s, H-2), 7.59 (1H, dd,= 8.3, 1.1 Hz, H-6), 6.87 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5), 6.40 (1H, s, H-8), 6.21 (1H, s, H-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 179.5 (C-4), 166.2 (C-7), 163.1 (C-5), 159.0 (C-9), 158.5 (C-2), 149.9 (C-4), 145.9 (C-3), 135.6 (C-3), 123.2 (C-6), 123.1 (C-1), 117.6 (C-5), 116.0 (C-2), 105.7 (C-10), 104.3 (C-1), 99.9 (C-6), 94.7 (C-8), 78.4 (C-5), 78.1 (C-3), 75.7 (C-2), 71.2 (C-4), 62.6 (C-6)。以上数据与文献报道基本一致[33]，故鉴定化合物27为异槲皮苷。

化合物28：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 449.108 3 [M＋H]+，分子式为C21H20O11；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 8.14 (2H, d,= 8.6 Hz, H-2, 6), 6.93 (2H, d,= 8.6 Hz, H-3, 5), 6.78 (1H, s, H-8), 6.48 (1H, d,= 1.7 Hz, H-6), 5.08 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 177.5 (C-4), 164.5 (C-7), 162.2 (C-5), 160.8 (C-4), 157.7 (C-9), 148.8 (C-2), 137.5 (C-3), 130.9 (C-2), 130.9 (C-6), 123.5 (C-1), 116.3 (C-3), 116.3 (C-5), 106.3 (C-10), 101.6 (C-1), 100.2 (C-6), 95.6 (C-8), 78.4 (C-5), 77.8 (C-3), 74.8 (C-2), 71.3 (C-4), 62.5 (C-6)。以上数据与文献报道基本一致[34]，故鉴定化合物28为山奈酚-7葡萄糖苷。

等值线转换为空间曲面的关键点是将已有等值线离散化，提取等值点，然后按离散点转换空间曲面模型生成参数栅格(如瓦斯压力、瓦斯含量、煤厚、埋深线)。从等值线生成不规则三角网(TIN)或规则网格(如ArcGIS中的Raster)有以下2种方法：

化合物29：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 443.097 0 [M＋H]+，分子式为C22H18O10；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.96 (1H, d,= 11.3 Hz, H-2), 6.95 (2H, s, H-2, 6), 6.80 (1H, d,= 8.1 Hz, H-6), 6.70 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 5.96 (2H, s, H-6, 8), 5.51 (1H, s, H-3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 167.6 (C-7), 157.8 (C-7), 157.2 (C-5, 9), 146.3 (C-3), 146.3 (C-5), 146.0 (C-4), 145.9 (C-3), 139.8 (C-4), 131.4 (C-1), 121.4 (C-1), 119.4 (C-6), 116.0 (C-5), 115.1 (C-2), 110.2 (C-2, 6), 99.4 (C-10), 96.6 (C-8), 95.9 (C-6), 78.6 (C-2), 70.0 (C-3), 26.8 (C-4)。以上数据与文献报道基本一致[35]，故鉴定化合物29为表儿茶素-3没食子酸酯。

化合物30：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 249.133 0 [M＋H]+，分子式为C11H20O6；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.37 (1H, m, H-2), 4.32 (1H, dd,= 6.4, 11.8 Hz, H-1a), 4.27 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 4.22 (1H, dd,= 6.4, 11.8 Hz, H-1b), 1.75 (3H, s, H-4), 1.69 (3H, s, H-5)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 138.5 (C-3), 121.7 (C-2), 102.7 (C-1), 78.1 (C-3), 78.0 (C-5), 75.0 (C-2), 71.6 (C-4), 66.3 (C-1), 62.7 (C-6), 25.9 (C-4), 18.0 (C-5)。以上数据与文献报道基本一致[36]，故鉴定化合物30为3-methyl-but-2-en-1-yl βglucopyranoside。

化合物31：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 249.133 5 [M＋H]+，分子式为C11H20O6；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.04 (1H, dd,= 14.3, 10.9 Hz, H-2), 5.21 (1H, d,= 17.7 Hz, H-1a), 5.10 (1H, d,= 10.9 Hz, H-1b), 4.32 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 1.37 (3H, s, H-4), 1.33 (3H, s, H-5)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 145.4 (C-2), 114.3 (C-1), 99.6 (C-1), 79.1 (C-3), 78.2 (C-5), 77.6 (C-3), 75.1 (C-2), 71.7 (C-4), 62.8 (C-6), 27.8 (C-4), 26.6 (C-5)。以上数据与文献报道基本一致[37]，故鉴定化合物31为大花红天素。

化合物32：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 401.143 9 [M＋H]+，分子式为C18H24O10；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.10 (1H, s, H-3, 7), 5.99 (1H, dd,= 17.6, 10.9 Hz, H-2), 5.18 (1H, d,= 17.6 Hz, H-1a), 5.02 (1H, d,= 10.9 Hz, H-1b), 4.35 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 168.3 (C-1), 146.5 (C-4), 146.5 (C-6), 145.1 (C-2), 139.9 (C-5), 121.4 (C-2), 114.5 (C-1), 110.2 (C-3), 110.2 (C-7), 99.6 (C-1), 79.2 (C-3), 78.1 (C-3), 75.2 (C-2), 75.1 (C-5), 72.1 (C-4), 65.1 (C-6), 27.6 (C-4), 26.8 (C-5)。以上数据与文献报道基本一致[38]，故鉴定化合物32为taxilluside A。

化合物33：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 333.190 0 [M＋H]−，分子式为C16H28O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.19 (1H, d,= 17.5 Hz, H-1a), 4.96 (1H, d,= 10.9 Hz, H-1b), 1.91 (2H, m, H-4a, 5a), 1.77 (2H, m, H-4b, 5b), 1.29 (3H, s, H-10), 1.21 (3H, s, H-9), 1.18 (3H, s, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 145.2 (C-2), 112.2 (C-1), 98.7 (C-1), 86.9 (C-6), 84.7 (C-3), 80.7 (C-7), 77.8 (C-3), 77.6 (C-5), 75.1 (C-2), 71.7 (C-4), 62.7 (C-6), 38.5 (C-4), 28.4 (C-5), 26.2 (C-10), 24.1 (C-8), 20.8 (C-9)。以上数据与文献报道基本一致[39]，故鉴定化合物33为-linalool-3,6-oxide-βglucopyranoside。

化合物34：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 193.060 3 [M＋H]+，分子式为C9H8N2O3；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.85 (1H, d,= 9.4 Hz, H-8), 7.11 (1H, s, H-5), 6.77 (1H, s, H-2), 6.20 (1H, d,= 9.4 Hz, H-7), 3.91 (3H, s, -OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 164.1 (C-6), 152.9 (C-10), 151.4 (C-9), 147.1 (C-3), 146.1 (C-8), 112.6 (C-7), 109.9 (C-5), 104.0 (C-2), 56.8 (-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[40]，故鉴定化合物34为xylogranatinin。

化合物35：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 391.196 2 [M＋H]+，分子式为C17H26O10；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.38 (1H, s, H-3), 5.26 (1H, d,= 4.5 Hz, H-1), 4.62 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 4.03 (1H, t,= 4.4 Hz, H-7), 3.68 (3H, s, -OCH3), 2.77 (1H, t,= 7.0 Hz, H-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 169.6 (C-11), 152.1 (C-3), 114.0 (C-4), 100.0 (C-1), 97.7 (C-1), 78.3 (C-3), 78.0 (C-5), 75.0 (C-7), 74.7 (C-2), 71.6 (C-4), 62.7 (C-6), 51.7 (-OCH3), 46.5 (C-9), 42.7 (C-6), 42.1 (C-8), 32.1 (C-5), 13.4 (C-10)。以上数据与文献报道基本一致[41]，故鉴定化合物35为马钱苷。

化合物36：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 357.190 1 [M＋H]+，分子式为C18H28O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.35 (1H, t,= 6.4 Hz, H-7), 5.87 (1H, s, H-4), 4.37 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1), 4.05 (1H, m, H-9), 2.33 (2H, s, H-2), 2.13 (2H, s, H-13), 1.29 (6H, s, H-11, 12), 1.26 (3H, d,= 6.1 Hz, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 202.2 (C-3), 159.4 (C-5), 143.1 (C-6), 135.5 (C-7), 125.4 (C-4), 102.4 (C-1), 78.1 (C-5), 78.0 (C-3), 75.7 (C-9), 75.1 (C-2), 71.9 (C-4), 63.1 (C-6), 54.6 (C-2), 39.2 (C-1), 38.6 (C-8), 29.1 (C-11), 29.1 (C-12), 22.7 (C-13), 20.1 (C-10)。以上数据与文献报道基本一致[42]，故鉴定化合物36为(6)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-oneβglucopyranoside。

化合物37：白色无定型粉末，HR-ESI-MS/: 373.221 8 [M＋H]+，分子式为C19H32O7；1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.84 (1H, s, H-4), 4.37 (d,= 7.7 Hz, H-1), 3.90 (1H, m, H-9a), 3.29～3.42 (1H, m, H-9b), 2.49 (1H, d,= 17.4 Hz, H-2), 2.08 (3H, d,= 5.0 Hz, H-13), 1.22 (3H, d,= 6.1 Hz, H-10), 1.11 (3H, s, H-11), 1.04 (3H, s, H-12)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 202.4 (C-3), 170.1 (C-5), 125.2 (C-4), 101.9 (C-1), 77.8 (C-3), 77.5 (C-5), 75.5 (C-9), 74.8 (C-2), 71.5 (C-4), 62.7 (C-6), 52.1 (C-6), 47.9 (C-2), 37.5 (C-8), 37.1 (C-1), 29.0 (C-12), 27.5 (C-11), 26.6 (C-7), 25.0 (C-13), 19.9 (C-10)。以上数据与文献报道基本一致[43]，故鉴定化合物37为blumenyl C βglucopyranoside。

3.2 抗缺氧损伤活性筛选结果

根据实验结果可知，不同浓度（0.625～20 μmol/L）苯丙素类、苯乙烷类和黄酮类化合物均能保护CoCl2损伤的PC12细胞，且当浓度为20 μmol/L时，苯乙烷类化合物对CoCl2损伤的PC 12细胞保护作用最显著，因此，选择浓度20 μmol/L为给药浓度。化合物20和23的保护作用最好，实验结果见表1。

表1 化合物1～37在20 μmol·L−1下对CoCl2损伤PC 12细胞的保护作用(, n = 3)

与模型组比较：*＜0.05**＜0.01。

*< 0.05**0.01model group.

4 讨论

本研究对红景天进行了系统的化学成分分离，采用1D-NMR及2D-NMR波谱手段并结合HR-ESI-MS质谱数据，共分离鉴定出37个化合物，化合物1～19为苯丙素类化合物，化合物20～25为苯乙烷类化合物，化合物26～29为黄酮类化合物，化合物30～37为其他类化合物，其中7、10、17～19、35为首次从景天科植物中分离得到，化合物4、6、26、28、32～34、36、37为首次从景天属中分离得到。苯乙烷类化合物为红景天植物中最主要的有效成分之一，含量较大，且结合文献报道在保护缺氧损伤细胞方面具有较好活性。故本实验采用CoCl2对PC 12细胞诱导低氧损伤为模型，研究红景天对PC 12细胞的保护作用。结果表明，苯丙素类，苯乙烷类，黄酮类化合物均能保护CoCl2损伤的PC 12细胞，且当浓度为20 μmol/L时，苯乙烷类化合物20和23对CoCl2损伤的PC 12细胞具有显著保护作用。本实验丰富了红景天的化学成分和抗缺氧活性研究，为今后红景天的利用与开发提供了实验基础。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

[1] 中国药典[S]. 一部. 2020: 162.

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Chemical consituents of

LIU Yan, YAO Junhan, MEI Yu, PAN Juan, GUAN Wei, LI Mengmeng, KUANG Haixue, YANG Bingyou

Key Laboratory of Basic and Application Research of Beiyao, Ministry of Education, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China

To study the chemical constituents of the dried roots of, a plant of the Crassulaceae, and to investigate the anti-hypoxic damage effects of the chemical constituents from.The chemical components were systematically isolated and purified using silica-gel, ODS, and HPLC chromatography methods. The structures of the isolated chemical components were identified by UV, IR, NMR, and MS. The protective effect of the isolated compounds on CoCl2induced PC 12 cells was evaluated using the CCK-8 method.A total of 37 compounds were isolated and identified from the 70% ethanol extract of roots of, including 19 phenylpropanoids, named-hydroxycinnamic acid (1), caffeic acid (2), 6,7-dimethoxycoumarin (3), 2-methoxy-4-(2-propenyl)phenyl β--glucopyranoside (4), 1,2-di--β--glucopyranosyl-4-allylbenzene (5), 3,4,5-trihydroxy allylbenzene-3--β-glucopyranosyl-4--β--glucopyranoside (6), syringin (7), abietin (8), cinnamy--β--glucopyranoside (9), 1-feruloyloxy-2-methoxy cinnamic acid (10), isolariciresinol (11), (7,8)-dehydrodiconiferyl alcohol 9-β-glucopyranoside (12), (7,8)-dehydrodiconiferyl alcohol 9-β--glucoside (13), (7,8)-dihydro-dehydrodiconiferyl alcohol 9′--β--glucopyranoside (14), (7,8)-7,8-dihydro-9′-hydroxyl-3′-methoxyl-8-hydroxymethyl-7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1′-benzofuranpropanol 9′--β--glucopyranoside (15), (7,8)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4--β--glucopyranosid (16), hyuganoside IIIa (17), 3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-[4-(3-hydroxy-1-()-propenyl)-2,6-dimethoxyphenoxy] propyl-β--glucopyranoside (18), poliumoside (19); six phenylethanes, named tyrosol (20), phenethanol--β--glucopyranoside (21), icariside D2(22),-hydroxyphenethyl--β--glucopyranoside (23), 4-hydroxy-phenylethyl-6'--galloyl-β-glucoside (24), phenethanol-β-cycloside (25); four flavonoids, named phloretin (26), isoquercetin (27), kaempferol-7--β--glucoside (28), epicatechin-3--gallate (29); and eight others, named 3-methyl-but-2-en-1-yl-β--glucopyranoside (30), crenulatin (31), taxilluside A (32),-linalool-3,6-oxide-β--glucopyranoside (33), xylogranatinin (34), loganin (35), (6Z)-4-(3-hydroxybutylidene)-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexene-1-one--β--glucopyranoside (36), blumenyl C-β--glucopyranoside (37). At 20 μmol/L, phenylpropanoids, phenylethanes, and flavonoids all showed significant anti-hypoxic damage effects.Compounds 7, 10, 17—19 and 35 were isolated from the family Sedum for the first time, and compounds 4, 6, 26, 28, 32—34, 36 and 37 were isolated from the genus Sedum for the first time.anti-hypoxia injury activity experiments showed that phenylethane compounds 20 and 23 had the best protective effect on PC 12 cells damaged by CoCl2at 20 μmol/L, and the cell survival rate was higher.

Crassulaceae;(Hook. f. et Thoms.) H. Ohba;2-methoxy-4-(2-propenyl)phenyl β--glucopyranoside; syringin; kaempferol-7--β--glucoside; loganin

R284.1

A

0253 - 2670(2024)09 - 2875 - 12

10.7501/j.issn.0253-2670.2024.09.003

2023-12-04

黑龙江省重点研发计划项目（GA21D008）；黑龙江省“头雁”团队（[2019]5号）；黑龙江省“双一流”学科协同创新成果建设项目（LJGXCG2022-096）

刘 艳（1987—），博士，教授，主要研究方向为中药药效物质基础研究。E-mail: lifeliuyan@163.com

通信作者：杨炳友（1970—），博士，教授，主要研究方向为中药药效物质基础研究。Tel: (0451)82193007 E-mail: ybywater@163.com

[责任编辑 王文倩]