基层兽医实验室存在的问题及建议

丁 丽，赵 亭，邵砚铭

（山东省曹县动物疫病预防控制中心，山东 曹县 274499）

在动物疫病防控体系中，动物疫病防控机构承担着更直接、更基础的工作，兽医实验室又是疫病防控体系中的关键部门，是动物疫病防控工作的技术支撑[1]。兽医实验室主要以CNAS-CL01：2018《检测和校准实验室能力认可准则》、GB/T 27025-2019/ISO/IEC 17025：2017《检测和校准实验室能力的通用要求》、GB 19489-2008《实验室生物安全通用要求》、农业部《兽医实验室生物安全管理规范》和其他法律政策为依据，以质量管理体系和生物安全管理体系作为支撑，以科学、公正、高效、服务的质量方针和以人为本、安全第一的生物安全管理方针进行实验室检测活动。目前，大部分兽医实验室建设比较完善，质量管理体系比较稳定，检测工作能较有序进行，但通过学习和同仁交流，仍存在问题和不足。本文简要分析了存在的问题并提出一些建议，以期为进一步了解我国基层兽医实验室近年来建设与发展情况，完善基层兽医实验室建设提供参考。

1 基层兽医实验室存在的问题

1.1 兽医实验室建设标准

基层兽医实验室大部分属于BSL-2级实验室，虽然面积上能达到200 m2的标准，但是布局、选址和设施环境等要求上不符合兽医实验室建设标准规定。功能区分布不合理，特别是病原学检测部分，其中的样品处理室、核酸提取室和PCR扩增室没有严格区分，没有单独存放化学试剂的存储室，血清学实验室洁净区和污染区没有严格区分，更衣室管理不规范，多数实验室没有门禁系统，人员自由出入，风险较大。

1.2 兽医实验室管理

1.2.1 人员问题 实验室人员有的不是全额编制，专业对口人员较少，一般至少需要3～4人才能正常运转，不仅需要熟练掌握检测技术，而且要掌握实验室质量体系和生物安全体系、检测标准和检测方法[2]。由于实验室人员年龄老化，学习知识的精气神不足，能力不够，不求进步的思想大有存在，阻碍着实验室质量控制[3]。

1.2.2 样品管理 在采样、送样、离心和制样等环节把控不严，采样不消毒，送样时包装不密闭，温度不控制，接样室没有必要设备，比如生物安全柜、紫外线灯等设施的缺乏，以致造成样品撒漏、污染现象。采样单填写不标准，不规范，特别是动物种类、免疫日期、免疫项目、疫苗厂家等应详细填写，以免影响检测效果和监测质量。

1.3 检测能力

大多数实验室人员能够按照动物疫病检测标准和检测方法进行检测，但是血清学检测中血凝和血凝抑制试验中，温度、湿度和环境控制不准，清洗红细胞的技术不高以及观察血凝抑制试验结果的时间和经验不足，导致结果有偏差。在酶联免疫吸附试验进行多个包被板37 ℃培养时，由于恒温箱开关频率较高，导致恒温箱温度有变化，每板的加样时间不一样，在测量并记录样品和对照的OD值时15 min有效，加入终止液后几分钟测量效果最好，时间经验不足，导致结果有偏差。在做病原学试验时，几个样品合成一个新样品最为合适？取液量多少最好？核酸浓度多高，能够检测出核酸阳性？诸如许多类似问题，检测经验不足。由于资金上的不足，实验室仪器设备未能完全校准，没有取得校准检验检测合格证，影响检测结果的准确性。口蹄疫非结构蛋白阳性问题是免疫次数引起的？还是与试剂敏感性和特异性有关？以及是否感染口蹄疫病毒？诸多原因还有待于进一步研究。

1.4 生物安全

实验室人员缺乏高学历和高级职称的检测人员，对生物安全的重要性和潜在风险没有充分认识，没有严格按照生物安全操作标准进行操作。每次试验结束后，实验室废水、废液和废物的处理，不能及时高压销毁，大部分实验室没有污水处理系统，生物安全风险增高。

1.5 流行病学调查

流行病学调查是采用询问、填写问卷调查表、实地查看、现场抽样和实验室检测等多种手段，系统地掌握疫情发生、发展和流行，进行综合分析和研判疫病情况，提出科学有效的动物疫病防控措施，为疫病预防、控制和扑灭提供技术支撑。在工作中，由于认识不足以及专业水平有限，认为就是问问情况填写养殖场调查信息表而已。没有真正从地理环境、养殖规模、畜禽品种、不同日龄、用途上等进行分类调查，不熟悉流行病学调查目的、内容和程序，没有经过专业培训，只是应付上级工作安排，对结果不能科学合理分析，认真写出调查报告，起不到流行病学调查应有的作用。

2 相关建议

2.1 加大基层实验室建设力度

各级政府及兽医主管部门应该加大对实验室人力、财力和物力的投入，将县级实验室改建成负压实验室。聘请专业设计人员根据实验室建设要求，对实验室合理规划、合理布局，对解剖室、接样室、办公室、档案室和检测室等进行细化分工，明确检测流程和工作责任，加大采样设施设备，比如采样车、采样工具、隔离衣、防护服、手套、鞋套等，提高检测质量，确保检测结果的正确性和有效性，保证检测活动的有序性。

2.2 加大人员培训力度

由于实验室人员大部分是现用现学，不用不学，专业检测人员少之又少，只会操作，不懂原理，知其然不知所以然，主管部门应加强对现有技术人员培训，通过外出学习交流、专家讲座以及主管部门技术指导等多种方式提高专业技术能力和职业素养，满足工作岗位需要，跟上时代步伐，为畜牧业健康稳定发展保驾护航。

2.3 加强实验室管理

加强实验室质量管理[4]和生物安全管理。质量管理方面按照科学、公正、高效、服务质量方针和兽医实验室质量管理体系文件要求，首先要确保按照样品管理制度的规定进行接收、标识、流转、保存和处理，保证样品在实验过程中具有代表性、完整性和有效性。接收样品时，应该认真检查样品包装、状态及是否符合运输及贮存条件，清点数量，核实无误后，进行编号，填写样品接收发放登记表，每批样品要有一个唯一编号，每个样品要有一个独立的编号。样品必须保持无损坏、混淆、变质。待检样品和已检样品要有明确的标识，两个冰箱存放，以便清楚辨认。检测后不需要保存的样品做好记录后应及时无害化处理。超过保存期的样品，上报后应及时进行无害化处理。无论是从样品的接收，分样、保存、试剂领取、检测、流转到样品的销毁，步步细心，记录清楚详实。还是从检测试剂、检测方法、原始记录的填写到检测报告的发放和副本的保存，做到规范有序，记录完整。通过人员比对和实验室比对，确保实验结果的正确性和真实性。生物安全管理方面以人为本，安全第一。做到四个只要和四个必须。只要有外来人员必须登记，只要做实验必须做好个人防护，只要实验结束必须进行消毒，只要离开实验室必须检查水电和门窗。

2.4 规范档案管理

实验室档案应有专人专柜保管，数据的一致性，材料的真实性，纵横一致，上下衔接。档案盒整体划一，目录清晰，类别分明，按序排放，及时找出，规范可溯。

2.5 加强流行病学调查队伍建设

基层实验室检测和诊断水平的提高，人才是关键[5]。招聘专业技术人才，主管部门加大业务技能培训，发挥特聘防疫专员的网格化作用，保障调查人员经费，交通补助，提高调查的积极性、主动性、真实性，不能坐在办公室随便打几个电话一问了之，一填了之，切实提高动物疫病应急处置能力，减少疫病的发生和流行，正确分析疫病发生、发展规律，科学评估疫病。

2.6 加强组织领导

建立考核机制，根据年度监测计划要求，明确责任，按时采样、送样，监测，记录，结果报送，结果反馈，不断持续改进，保证监测结果正确性、科学性、有效性，保质保量完成各项任务，努力提升动物疫病监测与流行病学调查能力，为动物疫病防控提供科学依据。

3 结语

基层兽医实验室工作是动物疫病防控关键环节，通过对动物疫病免疫抗体检测结果，准确判断效价高低，根据抗体效价与免疫动物保护关系，做到适时补免，更好预防疾病。通过对病原核酸检测，更好地诊断疫病，减少疫病发生和流行。不断提高兽医实验室检测能力和诊断水平，为动物疫病防控提供技术支撑和监测预警能力，更好地为畜牧业生产服务，保障动物和产品安全及公共卫生安全，保障人民健康。