医院的病理PCR实验室可开展哪些检查项目

2024-04-19 04:15任伟民
家庭生活指南 2024年3期
关键词:医师标本荧光

任伟民

什么是病理P C R实验室

P C R实验室也称为基因扩增实验室,实时的荧光定量P C R技术是D N A定量技术的一个飞跃,是用来扩增特异的D N A片段,也可以看作生物体外的特异D N A复制。经过D N A基因追踪系统,可以快速了解患者体内特定D N A改变的情况,尤其是肿瘤,其准确度可达到纳米级别。而实时荧光定量P C R技术,就是实现此技术的重要载体。P C R试验也可用来检测结核、人乳头瘤病毒等感染性疾病,利用将病毒内含有的基因组进行扩增的方式,测定某些病毒浓度不高的感染者身上是否存在特异的病毒。P C R检测技术具备较高的灵敏度和特性,且操作简便快速,对样本没有过高的要求,所以,当前已受到临床医师的一致肯定,并在临床诊断中得到了广泛运用。但许多人可能并不清楚,病理P C R检测其实是病理检查的一部分。

什么是病理检查

那什么是病理检查呢?病理检查属于一种可靠且直观的肿瘤诊断技术,是直接把人体器官取下来的病灶制作成切片,放置于显微镜下观察,确定病变性质。倘若明确是恶性肿瘤,就应对肿瘤实施病理评估,如命名、分级、侵袭范围、是否充分切除、组织学疗效评价、预后等相关信息,这些均为临床制订和实施治疗方案的关键性依据。所以,病理检查也被称为肿瘤诊断的“金标准”。例如,人们闻到一股特殊的气味,表示空气中含有异常物质。但倘若需具体明确是何种物质,就需采用专业的实验室设备进行分析,病理检查就是这样的。

病理检查的步骤

(一)標本采集

病理检查的第一步是采集病理标本,包括活体组织、手术切除标本、细针穿刺标本等。标本的采集需要遵循一定的操作规范,以保证标本的完整性和质量。

(二)标本处理

采集到的病理标本需要进行一系列的处理步骤,包括固定、切片、染色等。固定是将标本中的细胞和组织固定在载玻片上,以保持其形态和结构的稳定性。切片是将固定的组织标本切割成非常薄的切片,以便于观察和分析。染色指通过染色剂对切片进行染色,以突出细胞和组织的结构特征。

(三)镜下观察

经过处理的标本切片会被放置在显微镜下,由病理医师进行观察和分析。病理医师通过观察切片中的细胞和组织形态学特征,来确定是否存在病理变化和病变类型。他们会注意细胞和组织的形状、大小、排列方式、染色性质等方面的变化。

(四)诊断和报告

根据观察和分析的结果,病理医师会进行诊断,并生成病理报告。病理报告中会详细描述标本的病理特征、诊断结果和可能的预后信息。这些报告会被发送给临床医生,作为辅助临床诊断和治疗的重要依据。

为什么必须要进行病理检查

病理检查实际上就是把切除的肿块送往实验室展开进一步检查,明确该肿块属于良性或者恶性,倘若属于良性肿块,手术切除就可以实现彻底治愈的目标,但倘若是恶性的,只通过手术切除是不行的,还应进一步扩大手术,术后还应到肿瘤科接受放疗和化疗干预。所以,病理医师就好比是一个法官,他的判定和患者的生存情况存在密切联系。外科医师根据病理检查结果,来确定是开展局部切除肿块的小手术,或是彻底性治愈的大手术。肿瘤内科医师根据病理结果,给患者制定药物治疗方案。在经过显微镜对检查组织进行形态评估后,会针对很多恶性肿瘤进行进一步分子病理评估,这就需要在病理P C R实验室来完成了。

P C R实验室可开展哪些检验项目

(一)病原体检测

P C R技术的提出和发展可以使病原体检测迅速、便捷地实施。因为此项技术的阳性率较高,仅需利用微量病原体即可获得阳性结果,这并不能作为诊断依据,只有存在相应数量的病原体后,才具备临床意义。所以,使用荧光技术P C R可以迅速获得精准的检测结果,对于模板精准定量具有非常重要的意义。针对免疫学检测的“窗口期”问题的处理,判定病症是否处于亚临床或者隐性状态,以及抗体检测无法判断属于既往感染或现症感染的情况,都能够通过P C R来明确。比如,新型冠状病毒核酸检测,以荧光P C R法作为方法学,用于体外定性检测感染新冠病毒的疑似肺炎病例、疑似聚集性病例,及诊断鉴别其他新型冠状病毒感染病。具体可以通过采集上呼吸道标本,包括咽拭子、鼻拭子等;也可以采集下呼吸道标本,包括呼吸道抽取物、肺泡灌洗液样本、肺组织活检标本等。其他病原体检测,如H IV、甲乙丙肝、H P V、肺支、肺衣、E B病毒、腺病毒、胞病毒、甲乙流、埃博拉病毒、B族链球菌等均可以使用P C R技术。

(二)遗传病检测

对于遗传性疾病来说,基因突变和拷贝数变异是关键的遗传学基础,也是检测遗传性疾病的重要指标。遗传性疾病的繁杂性,跟随基因突变的类型及数量变化而变化;基因拷贝数变异除呈现出复制与缺失外,缺失的部位、大小和复制倍数上也具有多样性。基因变异的复杂性,给遗传病的临床应用测定提供了技术挑战。实时P C R技术是目前应用最广泛的一种新型技术,使用荧光标记法或熔点分析,能够在同一个反应管内测定多种作用靶点。比如,检测人Y染色体A Z F区微缺失,以荧光P C R法为主要方法学。该产品适用于对男性全血样本中Y染色体无精子症因子进行定性检测。以往研究显示,Y染色体A Z F区的各种程度缺失可造成男性无精症、少精症、精子畸形症等,进而造成男性不育。

(三)基因突变检测

病理P C R实验室还可开展基因突变检测。基因突变是一种重要的遗传疾病原因,如遗传性肿瘤、遗传性心脏病等。病理P C R可以用于检测某些重要基因的突变,如B R C A 1 /2基因、E G F R基因等。对基因的突变情况进行检测,可以快速确定患者是否存在遗传性疾病的风险,为个体化治疗和遗传咨询提供重要依据。

(四)个性化用药

药物基因组学及药理学的进一步发展,明确了药物代谢与效应个体化差异的遗传特质,用药后出现不良反应的原因是药物代谢酶基因变异,造成酶活性失常,用药后体内药物无法被顺利代谢、吸收或排泄体外,导致体内药物含量过多或过少,达不到理想的医疗效果。这种特殊用药反应,可以通过检查与患者所使用药品有关的遗传基因,改变用药剂型或寻求替代方法,最大程度地制定出合理、可行、经济的用药处理方法。例如,对于心血管疾病的个体化用药,可以通过荧光P C R法来选择治疗心血管疾病的药物,如叶酸、氯吡格雷、华法林、硝酸甘油等,同时还可以通过生物检测来判断心血管用药的指导分子,明确基因类型。药学医师针对检测结果,且全方位考虑患者个体因素、临床诊断、联合用药等信息,为临床个体化用药提供科学依据。其他种类的个体化用药,比如他汀类药物、β受体阻滞剂、儿童安全用药、肿瘤靶向化疗个性化用药等均可采用P C R法。

(五)肿瘤研究

很多对原癌基因和抑癌基因的表达情况的测定均可发现致癌的可能性,而P C R方法学也有助于解决这些问题。比如,利用多重荧光定量P C R检查乳腺癌E S R、B R C A I、C D K N 2 A等基因,有助于乳腺癌的诊断及治疗。又比如乳腺癌2 1基因检测,主要是对乳腺癌患者肿瘤组织中的特异性基因表达水平进行定量测定,再通过计算公式转化为复发风险的评分,并通过评分对乳腺癌患者的复发风险、预后检测和治疗提供指导信息。

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