RS402007 基因多态性与脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块易损性及降脂疗效的关系

马媛媛，张彩霞，张丽丽，杨丽华，侯志刚，丁建

沧州市人民医院神经内科一区，河北沧州 061000

颈动脉粥样硬化斑块的形成与脂质代谢失调、血管炎症反应密切相关。颈动脉粥样硬化斑块不稳定可导致动脉栓塞，从而引起脑组织缺血，增加了脑梗死的风险［1-2］。因此，探讨颈动脉粥样硬化斑块的形成和稳定性影响因素对预测早期脑梗死的发生以及病情严重程度评估有重要意义。研究显示，解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）在细胞黏附、细胞迁移、基质降解和血栓形成等多种生物学过程中发挥关键作用。与其他蛋白酶一样，ADAMTS-1基因也具有多态性，可导致蛋白质结构或功能变化，从而对个体生理状况产生影响。研究表明，ADAMTS-1参与基质的降解和细胞迁移，与动脉硬化和斑块形成有关［3-4］。RS402007（G/C）是ADAMTS-1的一个多态性位点，该位点的多态性可改变ADAMTS-1的功能，从而影响动脉粥样硬化斑块的形成及稳定性，导致相关心血管事件的发生。近年来，我们对RS402007基因多态性与脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块易损性及降脂疗效的影响进行了探讨。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019 年7 月—2023 年7 月沧州市人民医院收治脑梗死患者114 例，根据颈动脉粥样硬化性情况分为稳定斑块组56 例和易损斑块组58 例。纳入标准：①符合《中国脑梗死中西医结合诊治指南》［5］中的脑梗死诊断；②实验室或影像学检查提示存在颈动脉粥样硬化；③临床资料完整。排除标准：①合并其他严重神经系统疾病；②合并心肾疾病或血液系统疾病；③有颈动脉手术史；④无法进行影像学检查。患者均知情并签署同意书，本研究通过医院伦理委员会批准。

1.2 降脂治疗及疗效判定 患者入院后完善各项检查并给予降脂治疗，阿托伐他汀口服每次20 mg，每日1 次，治疗4 周评定疗效。有效：治疗后患者头晕、记忆力下降、思维模糊等症状和体征有所改善，血液LDL-C、HDL-C、TG 和TC 水平恢复正常；无效：治疗后患者症状、体征无明显变化，LDL-C、HDL-C、TG 和TC 水平较治疗前无明显变化。有效率=有效例数/总例数×100%。

1.3 血脂水平检测 治疗前、治疗4周清晨取患者静脉血5 mL，静置后3 000 r/min离心10 min（半径15 cm）。采用Elisa试剂盒检测LDL-C、HDL-C、TG和TC。

1.4 基因多态性检测 抽取患者空腹静脉血2 mL，测定DNA 浓度后选择目标DNA 样本。随后在PCR 仪中设置以下反应条件：预变性95 ℃ 2 min、95 ℃ 45 s、56 ℃ 45 s、72 ℃ 1 min，循环35次，72 ℃延伸10 min，对目标DNA进行扩增。引物序列：正向引物：5'-GGCGTCTTTGGGATGGAA-3'，反向引物：5'-CAGGAGACACCGCTCGTAG-3'。通过凝胶电泳分析PCR 产物特性，确认扩增是否成功。回收目的DNA 片段，并进行DNA 测序，以获取基因信息。

1.5 统计学方法 采用SPSS20.0 统计软件。计量资料以±s表示，多组间比较采用方差分析；两组间或治疗前后比较采用t检验；计数资料以例（%）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前临床及血液生化指标比较 两组治疗前性别、年龄、合并症、血液及血清HDL-C、TG水平差异均无统计学意义（P均>0.05），血清LDL-C、TC水平差异有统计学意义（P均＜0.05）。见表1。

表1 两组治疗前临床及血液生化指标比较

2.2 两组基因型及等位基因频率 两组RS402007（G/C）位点基因型符合Hardy-Weinberg 平衡（P>0.05），表明研究对象具有群体代表性。RS402007（G/C）基因位点测序结果见图1，两组基因型比较差异有统计学意义（P均＜0.05）。见图1、表2。

图1 RS402007（G/C）基因位点测序结果

表2 两组基因型及等位基因频率比较

2.3 不同基因型患者降脂治疗前后血脂水平变化 与治疗前比较，GG、GC、CC 基因型患者治疗后血清LDL-C、TG、TC 水平降低，HDL-C 水平升高（P均＜0.05）；治疗后比较，CC 基因型患者血脂水平与GG 基因型、CC 基因型患者差异有统计学意义（P均＜0.05）。见表3。

表3 不同基因型患者降脂治疗前后血脂水平比较（mmol/L，± s）

表3 不同基因型患者降脂治疗前后血脂水平比较（mmol/L，± s）

注：与本组治疗前比较，*P＜0.05。

基因型GG GC CC n 31 41 42 F P LDL-C治疗前2.72 ± 0.77 2.57 ± 0.75 2.71 ± 0.73 0.109>0.05 HDL-C治疗前1.33 ± 0.30 1.30 ± 0.28 1.32 ± 0.32 0.271>0.05 TG治疗前1.71 ± 0.83 1.65 ± 1.03 1.69 ± 0.95 0.191>0.05 TC治疗前4.91 ± 0.87 4.75 ± 1.01 4.89 ± 0.96 0.185>0.05治疗后3.76 ± 0.62*3.57 ± 0.84*3.25 ± 0.68*1.429＜0.05治疗后2.02 ± 0.86*1.84 ± 0.81*1.77 ± 0.63*0.334＜0.05治疗后1.71 ± 0.45*1.74 ± 0.44*1.88 ± 0.47*0.808＜0.05治疗后0.98 ± 0.59*0.91 ± 0.62*0.85 ± 0.60*1.379＜0.05

2.4 不同基因型患者降脂疗效比较 GG、GC、CC基因型患者降脂治疗有效率分别分别为80.65%（25/31）、84.62%（33/41）、88.64%（39/42）。CC 基因型患者有效率高于GG 基因型、CC 基因型患者（P均＜0.05），GG基因型、GC基因型患者有效率差异无统计学意义（P>0.05）。

3 讨论

ADAMTS-1 是一种属于ADAMTS 家族的蛋白酶，参与基质降解、细胞迁移等生物学过程，近年来该蛋白酶与脑梗死、颈动脉粥样硬化的相关性已引起学者们的广泛关注［6］。颈动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病，其发生过程中动脉内膜受损、脂质聚积形成斑块［7-8］。ADAMTS-1活性与动脉内膜基质降解有关，可通过其活性变化发挥动脉壁组织修复和重塑作用，影响斑块稳定性，增加血栓形成风险［9］。颈动脉粥样硬化斑块导致的血栓形成，可阻塞脑动脉，从而引发脑梗死，因此，动脉粥样硬化是脑梗死的一种潜在危险因素［10］。

RS402007 是ADAMTS-1 基因的一个重要位点，其多态性可能导致蛋白质结构或功能的变化，从而对心血管疾病的发生发展产生影响。研究表明，RS402007 基因变异可能与颈动脉斑块形成和动脉硬化进程相关；RS402007基因型影响颈动脉粥样硬化斑块的稳定性，增加了血栓形成风险，从而促进了颈动脉粥样硬化的发展［11-12］。本研究显示，颈动脉粥样硬化稳定斑块患者与易损斑块患者RS402007基因型频率比较差异有统计学意义，提示RS402007基因多态性对颈动脉粥样硬化斑块的稳定性有一定影响。另有研究提示，RS402007基因多态性与脑梗死患者降脂治疗效果有关；不同RS402007基因型脑梗死患者ADAMTS-1 功能差异对动脉斑块形成、斑块易损性及血栓形成的作用不同，从而对降脂治疗效果产生影响。

阿托伐他汀通过降低血清LDL-C|、TG水平，抑制动脉粥样硬化斑块形成，从而降低心脑血管事件的发生风险，目前被广泛用于预防和治疗动脉粥样硬化、心肌梗死、脑梗死等心脑血管疾病［13-14］。本研究中，阿托伐他汀治疗4周后各基因型患者治疗前后血脂水平差异有统计学意义，CC基因型患者血脂水平改善优于GG基因型、CC基因型患者，同时CC基因型患者降脂有效率高于GG基因型、CC基因型患者。刘艳辉等［15］研究表明，APOE 基因多态性能影响阿托伐他汀疗效；邹佳等［16］研究发现，PCSK9基因RS562556位点显性模型能提高汉族人急性缺血性脑卒中的发病风险；CAI等［17］使用他汀类药物治疗高脂血症患者研究发现，ApoE4 基因携带者的ApoE 蛋白表达与E2 或E3 基因携带者的表达存在统计学差异，并且ApoE4携带者的他汀类药物疗效较非ApoE4基因携带者更好。本研究结果与上述研究一致，证实RS402007（G/C）位点多态性影响阿托伐他汀的降脂疗效。

综上所述，RS402007 基因多态性与颈动脉粥样硬化性斑块易损性相关，且对药物的降脂疗效有一定影响。但本研究样本量小、观察时间较短，研究结果的客观性有待多中心、大样本及更长时间的观察研究加以证实。