除螨洗衣液中的除螨剂R301含量的测定——高效液相色谱法

王 娟 于 文

西安开米股份有限公司，陕西西安，710075

除螨剂R301是一种高效、广谱、安全的除螨杀菌剂，能够添加到肥皂、洗衣粉、洗衣液等洗涤用品中，起到除螨杀菌的作用。市面上有些除螨洗衣液中添加除螨剂R301类成分，但是却没有相应的检测方法，文献中大多是关于除螨剂R301的杀灭效果或者除螨洗衣液的合成工艺[1-2]。因此，研究并开发一个关于除螨洗衣液中防腐剂除螨剂R301含量的检测方法很有必要，可以检测除螨洗衣液中是否添加除螨剂R301及其含量，让消费者更放心地使用除螨洗衣液。为此，笔者采用高效液相色谱法，确定了适宜的检测波长，有效去除干扰，以期建立一种准确性高、可靠性强、适用性广的检测方法。

1 试验部分

1.1 仪器及试剂

仪器：UV6000LP（二极管阵列检测器）液相色谱仪，Thermo Finnigan公司。

甲醇：色谱纯，德国Merck公司。

除螨剂R301：标准品（纯度≥98.0%，上海轻工业研究所有限公司）。

冰醋酸：分析纯，重庆北碚精细化工厂。

超纯水：自制。

95%乙醇：分析纯。

1.2 色谱条件

色谱柱：AcclaimTM120A，250 mm×4.6 mm。

柱温：室温。

进样方式：20 μL阀进样。

检测波长：258 nm。

流速：1.0 mL/min。

流动相：甲醇∶纯水∶醋酸＝65∶35∶0.3，用0.45 μm滤膜过滤。

洗脱方式：等度洗脱。

1.3 溶液的配制及样品处理

1.3.1 流动相的配制

流动相：将甲醇、纯水、冰醋酸按65∶35∶0.3的比例混匀，用0.45 μm滤膜过滤，再用超声振荡脱气10 min，备用。

1.3.2 标准溶液的制备

称取1.048 5 g除螨剂R301标准样品于100 mL容量瓶中，用95%乙醇稀释至刻度，再继续稀释配制一系列不同质量浓度的样品（2.097 μg/mL、4.194 μg/mL、10.485 μg/mL、41.940 μg/mL、69.900 μg/mL、104.850 μg/mL、209.700 μg/mL）备用。

1.3.3 样品溶液的制备

精确称量5.0000 g样品于50 mL容量瓶中，用95%乙醇稀释，超声振荡，定容至刻度备用。

2 结果和讨论

2.1 流动相的选择

主要进行甲醇/水、甲醇/水/醋酸与乙腈/水、乙腈/水/醋酸的筛选，并根据实际情况调整其配比，以达到最佳分离效果并减少干扰，最后看哪个体系比较适合除螨洗衣液中除螨剂R301的检测。实际实验过程中发现乙腈/水/醋酸体系效果跟甲醇体系效果相似，但是乙腈成本高。经过综合比较分析，总结出流动相为甲醇∶纯水∶醋酸＝65∶35∶0.3（体积比，v/v）时，等度洗脱能达到最佳分离效果、基线平稳和减少干扰，比较适合本项目检测。

2.2 检测波长的选择

除螨剂R301最大吸收波长（图1）为233 nm和258 nm。选择258 nm作为检测波长，通过添加法，把除螨剂R301加入洗衣液样品中，得到样品中添加除螨剂R301的紫外色谱图，对比除螨剂R301的紫外色谱图（图2）、样品的紫外色谱图（图3）及添加除螨剂R301的样品溶液紫外色谱图（图4），判定出样品中除螨剂R301的色谱峰。其目标色谱峰与其他色谱峰分离度高，干扰峰少，提高了样品中除螨剂R301的检测精度，故选择258 nm作为检测波长。

图1 样品光谱图

图2 除螨剂R301的紫外色谱图

图3 样品的紫外色谱图

图4 样品中添加除螨剂R301的紫外色谱图

2.3 线性关系

在上述色谱条件下，待仪器基线稳定后，采用浓度-峰面积外标法定量，配制质量浓度为2.097 μg/mL、4.194 μg/mL、10.485 μg/mL、41.940 μg/mL、69.900 μg/mL、104.850 μg/mL、209.700 μg/mL的标准溶液进样分析。实验数据见表1。由实验得线性回归方程为y＝0.0002x-0.4479，R²＝1（图5），其中y为除螨剂R301浓度（μg/mL）、x为除螨剂R301峰面积、r为相关系数，r值大于0.99，说明在除螨剂R301浓度为2.097～209.7 μg/mL内线性关系良好，除螨洗衣液样品黏度较高，需要稀释定容后进样检测。

图5 除螨剂R301标准溶液的线性图谱

表1 标准曲线溶液

2.4 重复性

精确称取1.048 5 g含除螨剂R301的样品于100 mL容量瓶中，用95%乙醇溶解并稀释到刻度，摇匀；吸取1 mL上述溶液于250 mL容量瓶中，用95%乙醇稀释到刻度，摇匀，备用。按此方法配制6份溶液，进行6次检测，实验结果见表2。

表2 重复性实验

由表2中实验结果可知，此样品检测结果RSD为2.65%，说明方法误差小，具有良好的重复性。

2.5 精密度

精确称取1.048 5 g含除螨剂R301的样品于100 mL容量瓶中，用95%乙醇溶解并稀释到刻度、摇匀；吸取1 mL上述溶液于100 mL容量瓶中，用95%乙醇稀释到刻度，摇匀；再吸取1 mL上述溶液于25 mL容量瓶中，用纯水稀释到刻度，摇匀，备用。将此标准溶液检测6次，实验结果见表3。

表3 精密度实验

由表3中实验结果可知，RSD为2.16%，说明方法误差小，精密度比较好。

2.6 回收率

回收率实验采取在已知含量（除螨剂R301含量6.65 μg/mL）的市售样品1作为基质样品，加入已知质量浓度的除螨剂R301标准溶液2；精确称量5.000 0 g含除螨剂R301的样品于50 mL容量瓶中，加入2 mL或4 mL浓度为104.85 μg/mL除螨剂R301标准溶液2，用95%乙醇溶解并稀释至刻度，超声振荡，定容至刻度备用，利用选定的色谱条件进行分析，实验结果见表4。

表4 回收率实验（n＝6）

由表4可知，回收率在99.1%～100.5%，满足分析要求。

2.7 市售样品的测试结果

精确称量5.000 0 g市售样品于50 mL容量瓶中，用95%乙醇稀释，超声振荡，定容至刻度备用。测定样品中的除螨剂R301含量，实验结果见表5。

表5 样品中除螨剂R301的测试结果

由表5中的实验结果可知，两组市售样品的6次结果的RSD分别为1.72%和1.25%，说明方法误差小，平行性比较好。

3 结论

采用高效液相色谱法测定除螨洗衣液中除螨剂R301的含量，方法简便、迅速，精密度高。标准溶液在2.097～209.7 μg/mL线性相关，回收率为99.1%～100.5%。此方法精确、可靠，可作为产品质量控制的检测方法。