■ 刘宇宇 谭景晨,2 张淑炜,3 张 莉 唐燕华 席 溢*
(1.贵州大学动物科学学院,贵州贵阳 550025;2.山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊 261061;3.铜仁市烟草公司思南县分公司,贵州铜仁 565100)
随着我国农业结构的深化调整和畜牧业的快速发展,饲草饲料作为畜牧业发展的保障,对改善生态环境,提高养殖生产效益,增加农民收入以及促进种植业和养殖业产业结构的调整具有重要作用[1]。我国是畜禽养殖大国,鸡肉消费量位于全球第二。因鸡肉具有高蛋白、低脂肪和低胆固醇且能提供人体生长发育所需的各种必需氨基酸、脂肪酸、无机盐和维生素等多种营养物质的特点[2-3],肉鸡在我国畜禽养殖业中占有重要地位。玉米和豆粕是肉鸡配合饲料的主要构成部分,其中玉米占50%~60%,豆粕占25%~30%,但由于畜牧业的发展和工业化用粮的增加,以及贸易摩擦影响等问题,我国玉米豆粕的供需矛盾日益突出,进而导致饲料价格上涨,养殖成本提高。针对这一现状,调整和优化饲料的配方结构,充分挖掘现有饲料的资源价值;同时丰富饲料来源,寻找并选用低价优质的饲草资源来替代玉米豆粕或作为饲料添加剂对促进畜禽养殖业的发展极为重要[4]。
葛藤(Pueraria lobata)为多年生蔓生豆科植物,适应性强,生长快[5],具有食用[6]、药用[7]和生态价值[8]。目前对葛藤的研究主要集中于青贮效果及葛根的药用价值方面,其地上部分利用研究较少,易造成资源浪费。此外,葛藤茎叶营养丰富,产量高,总黄酮含量与葛根相近。茎和叶除富含粗蛋白外,还含有丰富的镁(Mg)、钙(Ca)及微量元素铜(Cu)、锌(Zn)、铁(Fe)等,适口性好,是牛、羊、鸡、猪皆喜食的优良饲草[9]。因此,试验在基础饲粮中添加地上部葛藤草粉,研究其对肉鸡生长性能、免疫器官指数、肌肉营养成分、血液生理生化指标的影响,旨在为开发新的饲料资源、促进葛藤在禽畜养殖业中的应用提供理论参考。
试验用鸡购于贵州贵阳汇丰禽业养殖公司,品种为大型K9 麻黄肉鸡。试验草料为葛藤草粉,由贵州大学校内天然野葛的地上部茎和叶,经105 ℃杀青20 min、65 ℃烘干48 h、粉碎机粉碎制成。经测定,葛藤营养物质含量:粗蛋白(CP)为21.17%、粗纤维(CF)为28.90%、粗脂肪(EE)为3.03%、粗灰分(Ash)为9.54%、中性洗涤纤维(NDF)为44.50%、酸性洗涤纤维(ADF)为35.08%。
选用30日龄体重相近、健康的K9肉鸡120羽,随机分为3 组,每组4 个重复,每个重复10 羽。对照组(CK 组)饲喂100%基础饲粮、5%组饲喂5%葛藤草粉+95%基础饲粮、7%组饲喂7%葛藤草粉+93%基础饲粮。基础饲粮参照《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)配制,组成及营养水平见表1。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
试验期60 d,地点为贵州大学农业技术基地。试验期间,按照常规程序进行免疫并保持鸡舍清洁。肉仔鸡每日饲喂两次,保证足量饮水。
1.4.1 生长性能
试验期间观察试验鸡的生长情况,称重并记录各试验组肉鸡的初重和末重,计算每组鸡的平均日增重(ADG)。参照王璐等[10]家禽料重比测定方法,计算料重比(F/G)。
料重比=总耗料量÷(活重+死淘禽重-总初重)
1.4.2 免疫器官指数
试验期结束后禁食12 h,屠宰取出肉鸡的肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊分别称重记录,通过计算免疫器官重(mg)与活体重(g)的比值,即得免疫器官指数。
1.4.3 肌肉营养成分
屠宰后,称取新鲜胸肌肉样本,采用凯氏定氮法测定CP、索氏抽提法测定EE、烘干法测定干物质(DM)、高效液相色谱法测定肌苷酸指标,总胆固醇(TC)采用江莱生物科技有限公司酶联免疫试剂盒测定。
1.4.4 血清生化指标
肉鸡在屠宰前先禁食12 h,翅静脉采血5 mL,3 000 r/min 离心20 min 取上清液。血清生化指标包括总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、三酰甘油(TG)、TC、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和血糖(Glu)含量,采用全自动生化分析仪检测。
采用TOPSIS 综合评价法,分析添加葛藤草粉不同处理对肉鸡饲喂效果的优劣。先将肉鸡生长性能、器官指数、营养成分和血清指标等21 个指标数据正向化处理后,利用归一化公式将数据无量纲化至[0,1]区间上。归一化公式如下:
式中:X——参试材料在相应指标下的实测值;
Xmax、Xmin——所有材料在某一指标中对应的最大值和最小值。
然后根据TOPSIS 方法步骤,依次求出标准化矩阵数值,确定最优劣方案,计算正负理想解距离和向最优贴合度值,得出结论[11]。
数据通过Excel 整理,采用统计软件SPSS 25.0 中的one-way ANOVA 进行方差分析检验组间差异显著性,Duncan’s 法进行组间多重比较,结果用“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异显著。
由表2 可知,各处理组间K9 肉鸡初重和末重差异均不显著(P>0.05)。添加不同比例葛藤草粉对肉鸡的ADG 和F/G 的影响也不显著(P>0.05),但添加葛藤草粉均较CK组提高了平均日增重、降低了料重比。
表2 葛藤草粉对肉鸡生长性能的影响
由表3 可知,与CK 组相比,添加葛藤草粉均提高了肉鸡的胸腺和法氏囊指数,其中7%组胸腺指数显著高于CK 组(P<0.05),5%组法氏囊指数显著高于其余各组(P<0.05)。
表3 葛藤草粉对肉鸡免疫器官指数的影响(mg/g)
由表4 可知,7%组的CP 含量显著高于对照组(P<0.05)。DM 含量,5%组显著高于CK 组(P<0.05)。添加葛藤草粉均未对肉鸡的EE 和TC 产生显著影响(P>0.05)。与CK 组相比,添加7%葛藤草粉显著提高了肉鸡的肌苷酸含量(P<0.05)。
表4 葛藤草粉对肉鸡肌肉营养成分的影响
由表5 可知,与CK 组相比,添加葛藤草粉对K9肉鸡的TP 含量均有提高作用,其中5%组差异显著(P<0.05),7%组差异不显著(P>0.05)。随着葛藤比例的增加,肉鸡的TC 和LDL-C 含量有降低的趋势,HDL-C 含量有升高的趋势,但差异不显著(P>0.05)。
表5 葛藤草粉对肉鸡血清生化指标的影响
添加不同比例的葛藤草粉对肉鸡的饲喂效果不尽相同,参试指标众多,为避免各指标间比较的片面性和复杂性,因此选用TOPSIS 法来综合评价不同比例葛藤草粉对肉鸡的饲喂效果。通过计算各试验组肉鸡的初重等21 项指标的标准化矩阵数值,确定正负理想解,最后以向最优贴合度C 值的大小来反映各试验组之间的差距,见表6。
表6 葛藤草粉饲喂肉鸡TOPSIS法综合评价结果
根据表6 中21 项指标计算值可确定各指标的正负理想解(最优劣方案),正理想解(最优方案)为(0.737,0.707,0.795,0.868,0.992,0.894,0.857,0.986,0.984,0.904,0.868,0.880,0.853,0.852,0.980,0.870,0.973,0.885,0.813,0.976,0.778),负理想解(最劣方案)均为0。可以看出,最优方案多集中于7%组,最劣方案多集中于CK组。
D+值(正理想解距离)表示评价对象与正理想解的距离情况,D-值(负理想解距离)表示评价对象与负理想解的距离情况。C 值(贴合度)=D-/(D++D-)表示评价对象与最优方案的贴近程度。通常D-值越大,D+越小,则C值越大,表明该方案或处理越好。由表6可知,各处理的C 值:CK 组<5%组<7%组,表明添加7%的葛藤草粉饲喂肉鸡的效果最好。
经试验测定,葛藤营养丰富,价格低廉,因而具有成为优良蛋白饲料的巨大潜力。研究表明,饲粮中添加一定量的葛藤草粉能够提高动物的生长性能。李俊年等[12]在饲粮中添加75%葛藤草粉,发现山羊的日增重明显提高,料重比最佳。试验结果显示,添加葛藤草粉对K9 肉鸡的生长性能无不良影响且不同程度提高了K9 肉鸡的日增重,降低了料重比。葛藤茎叶中总黄酮与葛根相近,刘博等[13]研究发现饲粮中添加葛根总黄酮对肉鸡的日增重和料重比无显著影响,但有一定程度的提高,与本试验结果类似。庞天德等[14]研究发现,饲喂发酵葛藤均降低了肉鸡的日增重和料重比,这与本试验提高日增重的结果不一致,推测其原因可能是葛藤中的某类物质发酵后影响肉鸡的消化吸收或发酵葛藤的特殊气味抑制肉鸡对其采食等,具体原因有待更多研究。综上,添加葛藤草粉一定程度上能促进肉鸡的生长发育。
免疫器官指数是衡量机体免疫状况的方法之一。一般来说,免疫器官质量和指数增加是机体细胞免疫和体液免疫机能增强的表现[15]。胸腺是细胞免疫的中枢器官、法氏囊是禽类特有的体液免疫器官。试验结果显示,添加5%葛藤草粉对提高法氏囊指数有显著作用,添加7%葛藤草粉显著提高了K9肉鸡的胸腺指数。表明饲粮中添加葛藤草粉可以增强机体抵抗力和免疫功能。研究表明,黄酮类化合物对肉鸡的免疫器官、体液免疫和细胞免疫均有不同程度的影响,在缓解免疫应激方面具有显著作用[16]。吴洪新等[17]发现,饲粮中添加达乌里胡枝子提取物可以显著提高肉鸡法氏囊和胸腺指数,这与胡枝子提取物中的黄酮等活性物质密切相关。吕梦云[18]研究发现葛藤茎和叶中含有大量的异黄酮化合物,其成分以葛根素、大豆苷为主,且在饲粮中添加0.21%的葛藤黄酮提取物可显著提高21日龄AA肉鸡的法氏囊指数,对42日龄肉鸡无显著影响。汪纪仓等[19]在日粮中添加葛根素,均未对AA 肉鸡的胸腺指数、法氏囊指数产生显著影响。造成这些差异的原因可能是肉鸡的品种、生长阶段(日龄)或不同的添加剂量等,具体原因有待进一步研究。颜陶等[20]报道,饲料中添加葫芦巴粉对21日龄及42 日龄肉鸡胸腺指数、法氏囊指数均无显著影响,与本研究结果不一致,葫芦巴粉对肉鸡免疫器官的发育产生的效应,主要有效成分为黄酮类化合物,这可能与黄酮类化合物的来源种类和活性成分有关。
肌肉营养成分是评价鸡肉品质的重要参数,主要包含CP、EE、水分[21]。肌肉中的水分含量与干物质含量呈负相关,水分含量越低,其干物质比例越高,蛋白质含量也高,则鸡肉的营养价值越好[22-23]。试验结果显示,饲粮中添加葛藤草粉可提高鸡肉中CP和DM含量,添加量为7%时,CP 提高显著;添加量为5%时,DM 提高显著。表明葛藤草粉能够提高鸡肉的营养价值。肌苷酸是评价畜禽肉质鲜味的重要指标[24]。研究表明,黄酮类物质对肉鸡肌苷酸含量的提高具有显著作用[25]。庞天德等[14]研究发现,饲粮中添加8%发酵葛藤能显著提高肉鸡肌苷酸的含量。试验结果显示,添加7%葛藤草粉较CK组显著提高了肌肉中肌苷酸含量,表明葛藤草粉可以改善鸡肉鲜味,增强食欲,这可能是葛藤草粉中的黄酮类物质具有抗氧化性,阻止了细胞膜受损,从而保护了肌苷酸代谢过程中相关酶的活性[26]。
血清生化指标是反映机体营养代谢功能和组织器官是否正常运作,从而判断动物机体健康状况的重要指标之一[27]。血清TP 由ALB 和GLO 组成,主要反映机体内蛋白质的吸收与免疫代谢状况[28]。试验发现,与CK 组相比,添加葛藤草粉均能提高肉鸡的TP、ALB 和GLO 含量,其中5%组TP 含量提高显著,表明添加葛藤草粉促进了K9 肉鸡对蛋白质的合成与沉积,有利于增强机体免疫机能,这可能与异黄酮的作用有关[29]。血清中TG、TC、HDL-C 和LDL-C 是反映体内脂肪代谢的重要指标,这些特定物质含量的变化对畜禽的饲养管理具有重大意义[30]。高密度胆固醇(HDL)可将肝外组织中过多的胆固醇转运到肝脏代谢以防胆固醇过多聚集,HDL-C 浓度升高有利于血脂的降低,同时具有抗氧化和抗炎的作用[31]。试验研究显示,添加葛藤草粉不同程度降低了K9 肉鸡的TG、TC 和LDL-C 含量,提高了HDC-L 含量。说明葛藤的添加可以降低肉鸡的血脂水平。龚建平等[32]研究发现,添加3%的葛叶粉显著降低了肉鸡TG、TC 和HDL-C 含量,提高了LDL-C 含量,这与本研究结果不一致。有研究表明,葛藤黄酮类物质具有调节血清和肝脏脂质代谢的作用,如葛根素黄酮物质具有降低胆固醇和血脂、改善血液微循环、升高高密度脂蛋白的作用[33]。由于葛藤的茎和叶中均含有黄酮类物质,说明适量的黄酮类物质可以促进肉鸡脂质代谢,具体原因还有待进一步探讨研究。在本试验中,添加葛藤草粉对肉鸡的血清生化指标均无负面作用,且饲喂7%葛藤草粉,肉鸡TC、LDL-C 含量最低而HDL-C 含量最高,因此添加7%效果较好。
添加葛藤草粉对K9 肉鸡的生长性能无不良影响,且能在一定程度上增强肉鸡的免疫机能,提升肉质营养与风味,改善机体健康状况;说明葛藤草粉可以作为玉米-豆粕饲粮部分替代物饲喂肉鸡,开发前景十分广阔。应用TOPSIS 法综合评价各试验指标,表明葛藤草粉的添加比例为7%时,肉鸡饲喂效果较好。