B超引导下经腹绒毛与羊膜腔穿刺术在地中海贫血产前诊断中的应用

张兰兰 黄芬芳 龚菲菲 蔡海延 胡雪梅 黄艳华 梁佩 陈艺娟

[摘要] 目的 探討B超引导下经腹绒毛与羊膜腔穿刺术在地中海贫血产前诊断中的临床应用，寻找适合钦州市地中海贫血产前诊断的方法。方法 选取2021年3月至2022年4月在钦州市妇幼保健院医学遗传与产前诊断科就诊的531例单胎妊娠有生育重型或中间型地中海贫血患儿的高风险孕妇进行研究。根据取材方法分为对照组（羊膜腔穿刺取材，n=415）和研究组（经腹绒毛穿刺取材，n=116），比较两组患者的穿刺成功率、并发症发生率等。结果 对照组穿刺成功率100%，术后2周内流产2例，诊断为重型α-地中海贫血17例，重型β-地中海贫血10例及中间型地中海贫血64例；中间型及重型地中海贫血引产48例。研究组穿刺成功率100%，诊断为重型α-地中海贫血10例，重型β-地中海贫血4例及中间型地中海贫血17例；中间型及重型地中海贫血引产26例。两种方法在穿刺成功率及流产率方面比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 两种穿刺术取材方法均安全、有效，但经腹绒毛穿刺取材术可在孕早期发现胎儿地中海贫血情况，临床上更值得推广应用。

[关键词] 地中海贫血；经腹绒毛穿刺术；羊膜腔穿刺术；产前诊断

[中图分类号] R71    [文献标识码] A     [DOI] 10.3969/j.issn.1673-9701.2024.03.004

Application of B-ultrasound-guided transabdominal villus and amniocentesis in prenatal diagnosis of thalassemia

ZHANG Lanlan， HUANG Fenfang， GONG Feifei， CAI Haiyan， HU Xuemei， HUANG Yanhua， LIANG Pei， CHEN Yijuan

Department of Medical Genetics and Prenatal Diagnosis， Qinzhou Maternal and Child Health Hospital， Qinzhou 535000， Guangxi， China

[Abstract] Objective To explore the clinical application of ultrasound-guided transabdominal villus and amniocentesis in the prenatal diagnosis of thalassemia， and to find a suitable method for the prenatal diagnosis of thalassemia in Qinzhou. Methods A total of 531 high-risk pregnant women with severe or intermediate thalassemia during single pregnancy who were treated in the Department of Medical Genetics and Prenatal Diagnosis， Qinzhou Maternal and Child Health Hospital from March 2021 to April 2022 were selected for the study. According to different sampling methods， they were divided into control group （amniocentesis， n=415） and study group （transabdominal villus puncture， n=116）. The success rate， complication rate of the two groups were compared. Results The success rate of puncture in the control group was 100%， 2 cases were aborted within 2 weeks after surgery， 17 cases were diagnosed with severe alpha-thalassemia， 10 cases with severe β-thalassemia and 64 cases with intermediate thalassemia， 48 cases with moderate and severe thalassemia induced labor. The success rate of puncture in the research group was 100%， 10 cases were diagnosed with severe alpha-thalassemia， 4 cases with severe β-thalassemia and 17 cases with intermediate thalassemia， and 26 cases with moderate severe thalassemia were induced labor. There was no significant difference in puncture success rate and abortion rate between the two methods （P>0.05）. Conclusion Both methods are safe and effective. Transabdominal villus sampling can detect fetal thalassemia in early pregnancy， and it is worth promoting and applying in clinical practice.

[Key words] Thalassemia; Transabdominal villus; Amniocentesis; Prenatal diagnosis

地中海贫血是最常见的单基因遗传病，全世界约7%的人群为地中海贫血基因携带者[1]。根据珠蛋白基因的缺陷，地中海贫血分为α-地中海贫血和β-地中海贫血两大类。重型α-地中海贫血通常以孕晚期胎儿宫内死亡或刚出生后死亡为特征；重型β-地中海贫血患儿主要表现为慢性进行性溶血性贫血，于出生后3～12个月开始出现症状，需反复输血治疗等，如不治疗大多数患者在9岁前死亡[2-6]。地中海贫血给家庭及社会造成较大压力，防止重型地中海贫血患儿出生是目前公认的地中海贫血防控策略[7]。本研究探讨B超引导下经腹绒毛與羊膜腔穿刺术在地中海贫血产前诊断的临床应用，为广西钦州地区夫妻双方同型地中海贫血基因携带者并有生育重型或中间型地中海贫血患儿高风险的孕妇提供临床参考。

1  资料与方法

1.1  基本资料

选取2021年3月至2022年4月在钦州市妇幼保健院医学遗传与产前诊断科就诊的夫妻双方均为同型地中海贫血基因携带者，有生育重型或中间型地中海贫血患儿高风险的单胎妊娠孕妇531例。根据穿刺取材方法分为对照组（n=415）和研究组（n=116）。研究组孕妇（孕11～14周）采用经腹绒毛穿刺取材，孕妇年龄17～38岁，平均（27.87±4.83）岁；对照组孕妇（孕17～24周）采用羊膜腔穿刺取材，孕妇年龄15～44岁，平均（27.71±5.87）岁。两组孕妇的年龄比较，差异无统计学意义（P>0.05）。纳入标准：①夫妻双方均为同型地中海贫血基因携带者；②有生育重型或中间型地中海贫血患儿高风险的孕妇；③单胎妊娠。排除标准：①合并其他疾病的孕妇；②多胎妊娠；③夫妻为不同型地中海贫血。本研究经钦州市妇幼保健院伦理委员会审批通过（伦理审批号：QSFYL[2022]03-16）。

1.2  方法

1.2.1  研究组采用经腹绒毛穿刺取材  取材时间为妊娠11～14周，采用经腹Ｂ超引导下定位，常规消毒后用19G活检针快速穿刺至绒毛部位；连接含2～4ml氯化钠溶液（内含少量肝素）的20ml注射器，抽取绒毛组织约10mg放置无菌采集瓶内送实验室检测。

1.2.2  对照组采用羊膜腔穿刺取材  取材时间为妊娠17～24周，在Ｂ超引导下定位，常规消毒后用一次性麻醉用针（型号规格：AN-S 0.7×90）快速穿刺到达羊膜腔；抽取羊水1～2 ml丢弃，以防止羊水被母血污染，再抽取约20ml羊水放置无菌采集瓶内送实验室检测。

样本送检后，检验人员抽取DNA，检测胎儿是否有地中海贫血基因变异。

1.3  观察指标

观察两组孕妇的穿刺时间、穿刺成功率、诊断情况、并发症发生率等。地中海贫血基因检测实验方法：①缺失型：采用裂口聚合酶链式反应（gap polymerase chain reaction，Gap-PCR）；②点突变：采用聚合酶链式反应-反向点杂交（polymerase chain reaction-reverse dot blot，PCR-RDB），检测胎儿是否为中重型地中海贫血。

1.4  统计学方法

采用SPSS 26.0统计学软件对数据进行处理分析。计量资料以均数±标准差（）表示，组间比较采用独立样本t检验；计数资料以例数（百分率）[n（%）]表示，组间比较采用c2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  两组孕妇的穿刺成功率比较

研究组中115例孕妇穿刺一次成功，1例孕妇穿刺两次成功；对照组中414例孕妇穿刺一次成功，1例孕妇穿刺两次成功。两组孕妇穿刺成功率比较，差异无统计学意义（c2=0.932，P=0.334）。

2.2  两组孕妇的并发症及安全性比较

术后两组孕妇均未出现穿刺部位渗血、血肿、宫内感染、胎心率减慢等现象。术后两周内研究组孕妇未发生流产，对照组2例孕妇发生流产，两组孕妇流产率比较，差异无统计学意义（c2=0.561，P=0.454）。

2.3  两组孕妇的检查结果比较

两组孕妇检查培养成功率均为100%。研究组中胎儿中间型、重型地中海贫血31例，其中重型地中海贫血14例，阳性率26.72%（31/116）；胎儿中间型、重型地中海贫血引产26例。对照组中胎儿中间型、重型地中海贫血91例，其中重型地中海贫血27例，阳性率21.92%（91/415）；胎儿中间型、重型地中海贫血引产48例；两组孕妇的阳性结果比较，差异无统计学意义（c2=1.179，P=0.278）。

3  讨论

地中海贫血是常染色体隐性遗传病，父母双方均为同型地中海贫血基因携带者，每次妊娠胎儿有1/4的概率患地中海贫血[8]。广西钦州地区人群中地中海贫血基因携带率约为25%，每出生200～250个胎儿就有1例重型地中海贫血[9]。

本研究中，研究组中115例孕妇手术穿刺一次成功，对照组中414例孕妇手术穿刺一次成功，两组孕妇穿刺成功率比较，差异无统计学意义；与Ann等[10]研究结果基本一致。本研究对照组中有2例孕妇在2周内流产，流产率0.48%，两组孕妇均未发生宫内感染、胎心率改变等并发症，说明手术安全性较高，与既往研究结论一致[11-12]。本研究中共122例胎儿为中间型、重型地中海贫血，孕妇及家属通过咨询后有74例选择优生引产，包括41例重型地中海贫血胎儿均在产前得到干预，有效提高了钦州地区出生人口素质。经腹绒毛穿刺取材时间在妊娠11～14周，羊膜腔穿刺取材时间在妊娠17～24周；若产前诊断明确，尽早采取干预措施，可有效降低中晚期妊娠引产并发症的发生。

综上所述，羊膜腔穿刺取材和经腹绒毛穿刺取材均安全、有效，可用于地中海贫血产前诊断；但经腹绒毛穿刺取材可早发现、早诊断，并能实施早干预，在时间上更有优势，在临床上可推广应用。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。

[参考文献]

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（收稿日期：2023–05–01）

（修回日期：2024–01–10）