影响猪伪狂犬病毒疫苗效果的因素

文│陈学杰 王艳凤 李芳 祝洪伟 郭宝 （青岛易邦生物工程有限公司）

伪狂犬病最早在美国等西方国家暴发，可感染包括猪、牛、绵羊在内的多种哺乳动物，其中对生猪的危害最大，可使不同日龄生猪有高热、神经共济失调、繁育生殖障碍等症状，传播快、致死率高、危害巨大，是全球公认的严重影响生猪产业发展的疫病之一。科学接种疫苗是防控猪伪狂犬病毒病的最有力手段，笔者对影响疫苗免疫效果的因素进行总结概述，以期为生猪伪狂犬疫苗免疫程序的制定提供参考。

猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）又名奥耶斯基氏病（Aujeszky's disease, AD），其病原为疱疹病毒科、水痘病毒属的伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV），可经接触病猪或其排泄物通过口鼻呼吸道途径感染，其中仔猪临床表现为高热、腹泻、呕吐、精神沉郁等症状，感染率和死亡率最高可达100%，妊娠母猪以流产、产死胎等生殖系统障碍为主，生长育肥猪表现为咳嗽、流鼻涕等呼吸道症状为主，成年猪多为隐性感染但可终身带毒，2022年我国新修订的《一、二、三类动物疫病病种名录》将其调整为3类动物疫病。

自1947年猪伪狂犬病在我国首次发现以来，因其广泛的动物易感性和复杂剧烈的临床症状曾多次给我国生猪生产带来毁灭性打击，被认为是除猪瘟和口蹄疫外危害最大的生猪疫病，结合国外防控经验，引入疫苗Bartha-K16，发病情况得到有效控制，但至2011年，全国范围内出现已免疫猪场伪狂犬病疫情的集中暴发，引发严重的“流产风暴”，造成巨大经济损失和社会影响，这与PRV的变异有关，新病毒毒株毒力和感染性明显增强，染病动物症状和病理变化更加严重，目前已分离到HeN1、JS-2012、TJ、ZJ01、HNX、ZY-2014等多个地方流行变异毒株。与其他病毒引发的疫病一样，目前尚无有效治疗手段，研发和应用新型有效的应对PRV变异株的疫苗十分重要，现将影响PRV疫苗免疫效果的几大因素概述如下。

一、疫苗种类

伪狂犬病毒疫苗研究主要围绕不同的毒力蛋白展开，已有关于伪狂犬病毒亚单位疫苗、DNA疫苗等的相关研究和报道，目前灭活疫苗、传统弱毒疫苗和基因工程疫苗（基因缺失苗）已有商品疫苗上市可供养殖业主选择。

由表1可知，不同生产工艺、不同生产厂家、不同毒株来源生产出的疫苗在免疫原性、安全性上存在较大差异，是影响免疫效果的首要因素。整体上看，弱毒活疫苗能有效激活体液和细胞免疫双途径、产生效果快，可用于首次免疫或紧急接种；灭活疫苗存在作用时间长、安全性高、受母源抗体影响小等特点，可与其他疫苗同时接种。养殖业主在选择疫苗的时候应综合考虑成本、本地毒株流行情况、免疫程序等因素，科学搭配和选择疫苗种类。

二、接种程序

不同的疫苗，接种程序对疫苗效果有很大影响，应按照规范操作，以SA215和HB-98株活疫苗为例（表2），针对不同日龄的生猪免疫方式不同，滴鼻仅适用于仔猪，操作简单，可用于首次免疫；弱毒活疫苗效果易受母源抗体影响，不同疫苗的间隔接种时间也不同，不可一概而论。

三、群体情况

在实际生产中，养殖业主往往仅注重疫苗接种，认为免疫后理所应当地产生有效的保护，而对疫苗的真实效果缺乏客观的认识。监测群体病毒存续情况和免疫效果（抗体水平）有利于掌握群体病毒感染和抗体水平，对科学制定接种程序，及时开展补免或紧急接种至关重要。在研究母源抗体水平对伪狂疫苗效果的影响时发现，高水平的母源抗体会对疫苗产生中和作用，使机体抗体效价迅速降低且持续时间较长，抗体水平回升速度慢，间隙长。研究发现，在猪圆环病毒2型感染的影响下，猪伪狂犬疫苗免疫应答（包括体液免疫的抗体和细胞免疫的T细胞）明显降低，说明机体在猪圆环病毒等免疫抑制病原的存在下疫苗效果影响明显。对某野毒感染阳性场进行抗体监测发现，gE抗体阳性率随日龄（30～150日龄以内）逐渐上升，从14%上升到100%，说明保育和肥育阶段再次感染伪狂犬病野毒的风险较大，提示仔猪转群是猪伪狂犬病野毒的又一攻击点，应在此前加强防控。当前我国使用的猪伪狂疫苗多为gE基因缺失苗，接种后机体不产生对应的gE抗体，目前已有猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒和猪伪狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒可作为野毒感染和疫苗接种抗体的区别鉴定。

四、保存和运输条件

疫苗除目标微生物外还包括相关的化学稳定剂和佐剂，不同种类的疫苗对周边环境要求不同。其中灭活苗多为混悬液，应在2～8℃保存；弱毒活疫苗多为冻干苗，在-20℃以下保存。若运输过程中温度不稳定，造成病毒反复冻融，易造成病毒蛋白结构的改变，进而影响免疫原性；另一方面，保存运输不当造成疫苗包装受损、佐剂水相分离、变质或霉变不仅影响疫苗效果，甚至会造成严重的副反应。对伪狂犬病活疫苗（Bartha-K61）进行不同保存条件下的效果测定发现，温度对病毒含量的影响十分明显，疫苗在-20℃保存时，病毒含量可长时间保持稳定，一旦升至0℃以上保存后，有效保存时间不超过8小时。

伪狂犬病毒因其具有严重的致死率、隐性感染、潜伏感染等特性，净化难度大，实际生产中与繁殖障碍呼吸症、猪圆环病毒等混合感染情况普遍，严重威胁生猪产业健康可持续发展。科学开展免疫接种虽不能完全消除猪伪狂风险，但对减少病毒排放、减轻症状、增强机体抵抗具有不可替代的意义，充分了解影响疫苗效果的相关因素有利于科学实施免疫，最大化地发挥疫苗的免疫功效。