宠物临床肿瘤病例与“动物肿瘤病理学”教学的结合与应用

翟少华 刘伟伟 李建龙 张毅 王菊梅

摘 要：随着21世纪宠物养殖行业的高速发展，以犬和猫为主的宠物临床肿瘤的患病率亦显著增加。与经济动物相比，宠物临床肿瘤的发生具有多系统性、多因素性、多形性的表现特征，临床诊断较为复杂。因此，对动物医学专业人才的培养、宠物临床肿瘤的病理诊断和肿瘤性质判定技能的掌握，需要对宠物肿瘤的病因、临床表现、诊断方法和治疗既作为当前动物医学专业人才培养体系的重要组成部分，也是宠物临床医生培养的重要教学内容，动物医学专业学生和宠物临床医师应当熟练掌握。本文阐述了宠物肿瘤疾病的发展趋势和特点、肿瘤诊断方法以及肿瘤样本在动物病理学教学中的应用，为动物医学专业教学和宠物临床医生的培养提供参考。

关键词：宠物；肿瘤病例；动物肿瘤病理学；教学；应用

随着现代人们生活水平的逐步改善，宠物作为伴侣动物已经成为人类生活不可分割的重要组成部分。人类对动物关爱重视程度的增加，也促进了宠物行业的迅猛发展。临床兽医作为一个为动物提供健康和诊断服务的行业，其临床诊疗条件和技术手段也得到了迅速发展。伴随着人类对宠物关爱程度的提高，宠物的生存年龄也显著延长，致使宠物的肿瘤、心血管疾病、糖尿病、肾衰竭等宠物衰老性疾病的发病率在临床上也显著增加。其中，宠物肿瘤的发病率最早引起了医生的关注［1］。然而，由于机体各系统器官肿瘤发生的复杂性、多发性和恶型性，给临床医师在确定肿瘤类型和制订治疗方案方面带来极大困难。因此，在小动物病理学教学过程中将临床收集的宠物肿瘤案例、标本、病理组织切片与动物病理学课程、临床医生培训相结合，不仅可以丰富动物病理学的教学素材，也可以使学生更为直接、更为全面地了解和掌握当前小动物肿瘤临床发病模式，将在动物医学教学体系中发挥着重要作用［2］。

1 动物肿瘤病理学在兽医学中的显著作用和地位

动物肿瘤病理学是动物医学教学体系中的一门新兴学科，是研究宠物肿瘤生物学、细胞学诊断、病理学诊断、肿瘤外科治疗、肿瘤化疗和肿瘤放疗技术在肿瘤诊断的临床应用，对宠物临床肿瘤特征、症状、病理和组织学特征进行系统阐明，为小动物临床肿瘤的诊断和治疗提供依据［3］。动物病理学主要是从形态学角度对疾病进行研究，阐述疾病发生的病因、发病机制、发病过程，以及机体在疾病过程中所表现的功能变化、代谢变化、形态学变化三者之间的关系。因此，动物病理学不仅是学习临床医学的重要基础，也在基础医学和临床医学之间发挥着重要桥梁作用。临床医学利用各种临床诊断、检测和治疗方法来诊断和治疗疾病，经常需要依靠活体组织检查、尸体剖检和动物试验等病理学研究方法来观察和研究疾病，提高临床治疗水平［4］。

2 宠物临床肿瘤疾病的病理诊断方法

近年来，在宠物的临床病例中，肿瘤的发病率已成为宠物各种老龄化疾病的首位。研究表明，宠物肿瘤的发生与遗传、品种、年龄、性别、内分泌系与免疫系统等因素密切相关［11］。掌握肿瘤的组织病理学诊断、细胞化学染色、免疫组织化学诊断、电子显微镜诊断等重要诊断技术，对宠物肿瘤能够进行更为精确的诊断和治疗。此外，随着现代生物技术的不断发展，抗体和血清检测技术也可以显著提高临床肿瘤诊断结果的准确性。

肿瘤的病理组织学诊断是区分肿瘤的组织学类型和肿瘤的性质（良性和恶性）重要的判定依据。并根据肿瘤的组织学特征对肿瘤的分化程度进行分级判定，如划分为低分化和高分化（如乳腺肿瘤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的临床分级），以判定肿瘤的低分化或者高分化程度及其对机体所产生影响。此外，病理组织学诊断还可以确定肿瘤侵害的程度，如消化道肿瘤。肿瘤侵袭消化道的解剖学结构决定了肿瘤的分期和大小，以及是否有血管和淋巴管的侵袭或转移。此外，病理组织学诊断还可以确定肿瘤手术切口边缘是否被完全切除，以及手术复发的程度［5］。

细胞化学是组织学的一个分支，根据细胞形态学检查细胞的生化成分、定位、定量和代谢功能状态。细胞化学染色主要用于临床实践，帮助确定肿瘤结构、组织成分、肿瘤细胞和炎症细胞类型。在病理条件下，血细胞中的化学物质组成和含量发生的变化，有助于对疾病的鉴别与诊断；病理状况得到纠正后，血细胞中化学物质的组成和含量会发生变化。细胞化学染色方法有多种，包括过氧化物酶染色、苏丹黑B染色、酯酶染色和骨髓铁染色。目前，上述着色方法也已被开发用于对同一样本进行双重着色，这可以提高诊断的准确性［6］。

免疫组织化学诊断是指抗原和抗体之间的特异性结合反应，将荧光或可染色化学物质与抗体结合，并利用免疫学原理检测细胞或组织中靶抗原的存在。免疫组织化学诊断可利用抗原和抗体的特异性结合来判定肿瘤的来源、特性、分化程度的较为准确可靠的技术手段，也是临床病理学诊断的金标准［7］。通常，我们只有通过病理检查才能确定患病动物是否患有恶性肿瘤，在确定恶性肿瘤后，对于肿瘤的类型和分化程度，需要免疫组织化学染色进行诊断。而提高使用特定的肿瘤标志物来筛选肿瘤，这在临床实践中被广泛使用。免疫组织化学染色诊断可用于恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断，也可用于特定肿瘤类型的进一步病理分类，还可确定转移性恶性肿瘤的原发位置判定。

透射电子显微镜肿瘤诊断技术，打破了低分辨普通光学显微镜的局限性，提高细胞生物学结构改变诊断疑难肿瘤的重要技术工具。在光学显微镜下难以明确诊断的非色素瘤、嗜酸性肿瘤、肌源性肿瘤、软组织腺泡肉瘤和神经内分泌肿瘤，主要通过超微结构的精细观察来寻找组织细胞的分化标志物，可以在电子显微镜下明确诊断，并对相应肿瘤类型进行诊斷和鉴别［8］。不同组织类型的细胞都有其独特的超微结构，即便是低分化的肿瘤细胞在很大程度上，也能够保留同源细胞的超微结构状态。基于这些状态，电子显微镜可以用于诊断和鉴别肿瘤细胞的组织类型和分化程度。如常见的鳞状细胞的原纤维和桥粒；腺上皮细胞的复合物和微绒毛；条纹肌细胞中的肌原纤维；平滑肌细胞的肌丝。

随着肿瘤抗体检测技术的快速发展，越来越多的研究表明，肿瘤患者血清中存在不同类型的细胞自身抗原抗体。这些与肿瘤发展相关的抗原被称为肿瘤相关抗原［9］。血清中肿瘤相关抗原抗体的检测可用于肿瘤的早期诊断和预后评估。例如，癌症患者中抑癌基因p53的突变率高达37%，蛋白质的构象的改变可以引起机体产生免疫反应，从而产生抗p53的自身抗体。研究表明，在肝癌病例中，p53抗体的检测率明显高于甲胎蛋白，大多数甲胎蛋白阳性患者（83.3%）都能检测到p53抗体，因此p53抗体不但可以作为额外的肿瘤标志物，还能提高甲胎蛋白的诊断价值［10］。

3 肿瘤病理标本在“动物肿瘤病理学”教学中的应用

在动物肿瘤的教学过程中，应针对肿瘤在机体各系统脏器中的肿瘤特有的形态、生长方式、侵害部位和转移特点进行阐述。因此，在肿瘤教学中，我们将采集的宠物肿瘤标本、病理组织学切片、典型临床肿瘤案例与“动物肿瘤病理学”理论和实验教学有机结合，使学生能够更直观、更全面地了解肿瘤的生物学状态，为临床肿瘤诊断打下坚实的基础。

动物肿瘤大体标本的观察识别是“动物肿瘤病理学”实验教学中最重要的方法之一。动物标本是最生动、最直观的教学工具，可以直观、形象地展示动物机体肿瘤的形态结构；也可以帮助学生学习辨别宠物形态特征，使学生更直接地理解形态、结构和功能之间的内在关系，加深学生对宠物与环境引发肿瘤关系的理解。这也是传统教学方法无法实现的［12］。宠物临床案例与动物病理学的结合，与以往的教学相比，具有以下优点：改变了动物病理学传统的教学模式，让学生由被动学习变为主动参与，激发了学生的学习兴趣和学习热情，活跃了课堂气氛，增强了师生之间的互动交流。

作为临床肿瘤病理诊断的一部分，我们不断收集典型的肿瘤材料，并根据系统器官典型的肿瘤制备教学样本。学生通过肿瘤标本的观察，加深学生对课堂知识的理解，充分调动学生的主观能动性，这对“动物肿瘤病理学”课程的实验教学改革具有十分重要的意义。动物病理学标本的开放式教学提高了实验教学的有效性，提高了学生知识的综合应用，有效地培养了学生的专业兴趣和创新思维［13］。

在“动物肿瘤病理学”课程实验部分，增加以宠物肿瘤为主的病理组织切片应用于教学中，既可以丰富病理实验教学内容，又符合当前动物医学临床以宠物肿瘤病理最为多见的实际情况［14］。在实验教学过程中，我们根据系统器官选择了宠物肿瘤的典型病理组织，并制作了教学切片，包括皮肤的10个肿瘤组织（毛母细胞瘤、纤维瘤）、消化系统（平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤）、生殖内分泌系统（复合性乳腺癌症、卵巢癌症）、呼吸系统（鳞状细胞癌），通过病理组织切片判读，可以确定肿瘤的组织来源、肿瘤组织结构、肿瘤实质和间质组成特征、肿瘤细胞分化程度、肿瘤恶性程度、肿瘤转移以及手术切口边缘判定肿瘤切除的完整性，肿瘤诊断与定性为临床治疗指明方向。为了使学生掌握肿瘤病理切片的判读和诊断能力，我们将切片解读作为“动物病理学”实验考核部分，并将其引入学生知识竞赛，以实现“以赛促学、以考促学”的学习目的。这不仅训练了对病理学知识的掌握，而且提高了其临床适用性，是宠物临床医师必须具备的诊断技能［15］。

临床案例与理论教学相结合，临床实践与课堂教学相结合，是当前高校本科生课程改革的重点。本着学以致用，理论联系实际的教学目的，我们将收集到的典型动物肿瘤案例与“动物肿瘤病理学”的理论知识点相结合。一方面，学生可以通过生动的案例演示使学生更好理解和掌握重要知识点；另一方面，能够使学生将他们所学的知识与临床实践相结合，从而实现学以致用、活学活用，多方式、多角度增强学生的实践能力。例如，有一只11岁的松狮犬，出现精神沉郁、食欲减退、不愿运动，腹部异常肿大，右侧第四乳头皮下结节性乳房肿块。经临床X射线影像显示犬腹腔出现的高密度与低密度交织的异常影像。经手术腹部切开，发现犬体内双侧卵巢肿大（左侧20×10×8cm、右侧8×5×4cm），小肠外壁出现囊肿（12×8×6cm），左侧乳房有肿块（5×3×3cm）。該松狮犬同时在不同的组织器官相继出现4个病理性肿块是典型的“多瘤症”的病理表现。通过手术分离的4个肿瘤组织经病理诊断，结果为左卵巢梭形细胞肉瘤、右卵巢囊肿、小肠梭形细胞瘤和乳腺管癌。因此，结合上述临床案例，当讲述“多瘤症”的知识点时，可以更生动地将理论知识与临床实践相结合，将案例法与课堂教学相结合，学生的学习兴趣浓厚，改变了以往教学中缺少实物或案例，部分知识点学生不理解或印象不深刻的弊端，也激发了学生对临床医学学习兴趣，以及对专业的热爱程度也显著提高。

通过临床案例与理论教学相结合的教学方法，有利于培养学生学习的积极性，锻炼学生分析问题和解决问题的能力，以及逻辑思维能力，能较显著提高学生的临床诊断能力和综合素质能力。实现了培养高素质动物医学专门人才的需要，但还应在今后的教学实践中，不断积极探索更加符合现代动物医学发展的教学内容、教学方法和教学手段，确保教学质量不断提高。

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［15］徐欣，黎雪.一本临床医生必备的工具书——《临床医嘱手册》［J］.铁道医学，1989（01）：40.

项目基金：新疆农业大学教研教改项目——教学质量提升项目

作者简介：翟少华（1981— ），男，汉族，黑龙江鸡西人，硕士研究生，副教授，研究方向：分子与免疫病理学；刘伟伟（1991— ），女，汉族，河南淮阳人，本科，助理讲师，研究方向：教学与实验室管理。