保妇康栓联合干扰素治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证的临床观察

贾金峰,高 峰,吕晓霞

(山西省临汾市尧都区人民医院,山西 临汾 041000)

人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA 病毒,具有嗜上皮性,特异性较高,可通过感染皮肤黏膜处鳞状上皮,使其异常增生,持续的高危型HPV(HR-HPV)感染是导致宫颈高级别癌前病变及宫颈癌的主要原因[1]。据统计,我国每年新发宫颈癌患者13.15 万人,在世界总宫颈癌新发病例中占25%,严重威胁患者的生命,需及时进行防治[2]。干扰素具有广谱抗病毒作用,可调节免疫,抑制炎性反应。保妇康栓是中药制剂,具有清热燥湿、消肿止痛的功效,常用于治疗湿热瘀滞型带下病。本研究观察保妇康栓联合干扰素治疗宫颈HR-HPV 感染下焦湿热证的临床疗效,现报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择2020年1月至2022年1月在临汾市尧都区人民医院治疗的86例宫颈HR-HPV 感染下焦湿热证患者,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组43例。对照组年龄22~69岁,平均(51.41±3.02)岁;病程2~7个月,平均(5.15±0.31)个月。观察组年龄21~57岁,平均(51.53±3.15)岁;病程1~7个月,平均(5.06±0.22)个月。两组患者一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经临汾市尧都区人民医院医学伦理委员会批准(伦理审批号:20A7758)。

1.2 诊断标准

(1)西医诊断标准 参照《妇产科学》制定诊断标准[3]。症状:阴道分泌物增多,有气味,分泌物呈淡黄色或脓性,可在妇科指检或性生活后产生接触性出血,伴随分泌物刺激,导致外阴瘙痒或不适。体征:妇科检查示子宫颈糜烂样改变,或伴随光滑、充血现象。宫颈脱落细胞HR-HPV 的DNA 检测结果示存在1种或多种亚型(HPV33、52、39、59、35、31、68、66、58、56)。符合上述标准,即可诊断为宫颈HR-HPV 感染。

(2)中医诊断标准 参考《中医妇科学》中带下病下焦湿热证的辨证标准[4]。带下量多质稠如脓,臭秽,或夹血色,或阴部红肿灼痛,或阴中灼痛,或发热汗出,或少腹疼痛拒按,口干饮少,或头昏重痛,或脘腹胀满,大便干结,或小便黄热或有尿痛,舌红,苔黄腻而厚,脉滑数或弦数。

1.3 纳入标准 符合上述诊断标准;确诊后病情持续1年及以上;依从性良好;参与本研究后1年内无生育计划;患者及家属签署知情同意书。

1.4 排除标准 合并凝血功能障碍、脏腑功能不全、其他感染、免疫系统疾病、恶性肿瘤者;精神障碍,无法正常沟通者;对本研究所用药物过敏或存在禁忌证者;参与本研究前6个月使用过激素、抗病毒药物或免疫调节剂治疗者;妊娠期或哺乳期女性;有盆腔放射治疗、子宫切除和宫颈手术史者。

2 治疗方法

2.1 对照组 采用重组人干扰素α2b凝胶[兆科药业(合肥)有限公司,国药准字S20010054,5 g/支]治疗,每次1支,每日4次,涂于阴道,每次涂药后按摩2~3 min。连续治疗3个月。

2.2 观察组 在对照组基础上采用保妇康栓(海南碧凯药业有限公司,国药准字Z46020058,1.74 g/粒)治疗,每晚睡前使用1粒,即洗净外阴部,将栓剂塞入阴道深部。连续治疗3个月。

3 疗效观察

3.1 观察指标 ①T 淋巴细胞亚群指标[CD+4、CD+8、Foxp3+调节性T 细胞(Foxp3+Tregs)]及免疫球蛋白M(Ig M)水平。采用流式细胞仪(上海寰熙医疗器械有限公司)检测两组患者治疗前后CD+4、CD+8、Foxp3+Tregs水平,采用免疫比浊法检测两组患者Ig M 水平。②巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、Toll样受体4(TLR4)水平。采用酶联免疫吸附法(试剂盒由深圳市科润达生物工程有限公司提供)检测两组患者治疗前后 M-CSF、SDF-1、TRAF6、TLR4水平。③氧化应激指数(OSI)、总还原态(TAS)、总氧化态(TOS)、活性氧(ROS)水平。采用全自动生化分析仪(济南博鑫生物技术有限公司)检测两组患者治疗前后OSI、TAS、TOS 水平。采用Fenton法(试剂盒由上海生物工程有限公司提供)检测两组患者治疗前后ROS水平。④HPV-DNA 水平。通过无菌棉签刮取两组患者治疗前后宫颈上皮组织,采用聚合酶链反应(PCR)法检测HPV-DNA 水平。

3.2 疗效评定标准 参照《中医病证诊断疗效标准》拟定疗效评定标准[5]。痊愈:诸症消失,阴道分泌物量、气味、颜色等均恢复正常,实验室指标正常;好转:诸症减轻,阴道分泌物量、气味、颜色等均好转,实验室指标明显改善;无效:临床症状,阴道分泌物量、气味、颜色及实验室指标均无改善。总有效率=(痊愈例数+好转例数)/总例数×100%。

3.3 统计学方法 采用SPSS 23.0统计软件分析数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示,组内比较采用配对样本t检验,组间比较采用独立样本t检验;计数资料用百分率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

3.4 结果

(1)CD+4、CD+8、Foxp3+Tregs、Ig M 水平比较治疗前,两组患者CD+4、CD+8、Foxp3+Tregs、Ig M 水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者CD+4、Foxp3+Tregs、Ig M 水平均较治疗前升高,且观察组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者CD+8水平均较治疗前降低,且观察组CD+8水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后T淋巴细胞亚群指标及免疫球蛋白M 水平比较(±s)

表1 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后T淋巴细胞亚群指标及免疫球蛋白M 水平比较(±s)

注:1.Foxp3+Tregs,Foxp3+调节性T 细胞;Ig M,免疫球蛋白M。2.与本组治疗前比较,△P<0.05;与对照组治疗后比较,▲P<0.05。

组别 例数 时间CD+4(%)CD+8(%)Foxp3+Tregs(%)Ig M 水平(g/L)观察组 43 治疗前11.12±1.23 12.82±1.80 8.42±1.10 1.21±0.28治疗后17.11±2.09△▲ 11.05±1.01△▲10.95±2.01△▲ 1.77±0.35△▲对照组 43 治疗前11.15±1.35 12.75±1.75 8.30±1.15 1.25±0.25治疗后14.14±1.65△ 11.84±1.39△ 9.84±1.59△ 1.51±0.31△

(2)TRAF6、M-CSF、TLR4、SDF-1水平比较 治疗前,两组患者TRAF6、M-CSF、TLR4、SDF-1 水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者TRAF6、M-CSF、TLR4、SDF-1水平均较治疗前降低,且观察组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后巨噬细胞集落刺激因子、基质细胞衍生因子1、肿瘤坏死因子受体相关因子6、Toll样受体4水平比较(±s)

表2 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后巨噬细胞集落刺激因子、基质细胞衍生因子1、肿瘤坏死因子受体相关因子6、Toll样受体4水平比较(±s)

注:1.TRAF6,肿瘤坏死因子受体相关因子6;M-CSF,巨噬细胞集落刺激因子;TLR4,Toll样受体4;SDF-1,基质细胞衍生因子1。2.与本组治疗前比较,△P<0.05;与对照组治疗后比较,▲P<0.05。

组别 例数 时间 TRAF6水平(ng/mL)M-CSF水平(mg/L)TLR4水平(pg/mL)SDF-1水平(ng/mL)观察组 43 治疗前 2.58±0.59 17.45±4.89 32.18±5.17 7.45±1.40治疗后 0.66±0.14△▲ 6.45±1.84△▲ 5.96±0.94△▲ 2.98±0.82△▲对照组 43 治疗前 2.43±0.65 17.56±4.94 32.63±5.55 7.53±1.45治疗后 1.12±0.33△9.32±2.63△ 10.51±2.33△ 4.06±1.21△

(3)OSI、TAS、TOS、ROS水平比较 治疗前,两组患者OSI、TAS、TOS、ROS水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者OSI、TOS、ROS水平均较治疗前降低,观察组OSI、TOS、ROS水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者TAS水平均较治疗前升高,观察组TAS水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后氧化应激指数及总还原态、总氧化态、活性氧水平比较(±s)

表3 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后氧化应激指数及总还原态、总氧化态、活性氧水平比较(±s)

注:1.OSI,氧化应激指数;TAS,总还原态;TOS,总氧化态;ROS,活性氧。2.与本组治疗前比较,△P<0.05;与对照组治疗后比较,▲P<0.05。

组别 例数 时间OSI TAS 水平(mmol Trolox Eq/L)TOS水平(μmol H2 O2 Eq/L)ROS水平(μmol/L)观察组 43 治疗前121.93±25.88 1.03±0.02 132.05±21.01 650.20±30.95治疗后27.62±6.59△▲ 1.15±0.09△▲ 40.16±10.03△▲423.61±20.08△▲对照组 43 治疗前120.62±26.15 1.05±0.03 130.04±20.01 652.31±32.01治疗后52.35±9.61△ 1.09±0.07△ 61.12±12.02△ 450.93±25.56△

(4)HPV-DNA 水平比较 治疗前,两组患者HPV-DNA 水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者HPV-DNA 水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后人乳头瘤病毒-DNA水平比较(±s)

表4 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者治疗前后人乳头瘤病毒-DNA水平比较(±s)

注:与本组治疗前比较,△P<0.05;与对照组治疗后比较,▲P<0.05。

组别例数治疗前水平治疗后水平观察组43 5.38±1.09 1.26±0.24△▲对照组43 5.32±1.03 1.65±0.35△

(5)临床疗效比较 观察组总有效率为97.67%(42/43),高于对照组的86.05%(37/43),差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。

表5 两组宫颈高危型人乳头瘤病毒感染下焦湿热证患者临床疗效比较

4 讨论

HPV 是一种嗜上皮组织的环状双链DNA 病毒,主要由病毒基因组DNA 及两种病毒衣壳蛋白组成,无包膜[6]。持续的宫颈HR-HPV 感染可引发宫颈癌,严重影响患者的生命安全[7]。HPV 的主要感染部位为黏膜上皮及皮肤上皮,其中HPV 的E2、E1蛋白调节病毒基因组DNA 的复制及转录,E4 蛋白促进病毒成熟。HR-HPV 中含有多种早期致癌蛋白,对宫颈上皮细胞有刺激生长和转化作用。HPV 感染早期,机体免疫系统可将HPV 清除,但当人体免疫防御机制发生障碍,或宿主、病毒产生基因突变时,HPV 中的DNA 片段会侵入宿主细胞染色体,调控相关基因,产生HPV 持续感染,诱导疾病产生[8]。干扰素是广谱抗病毒药物,不仅能抑制病毒增殖,调节机体免疫功能,还能进入单核细胞,抑制肿瘤细胞增殖、分裂[9]。

宫颈HR-HPV 感染归属中医“带下病”范畴。先天禀赋不足,无力抵御湿、热、毒邪侵袭,加之情志不畅、饮食不节,郁久化热,湿浊内生,阻滞经络,毒邪无法排出,侵犯冲任二脉,发为带下病,治疗以清热燥湿为主[10]。保妇康栓的主要成分为莪术油、冰片,其中莪术油属于冰羟基莪术油,具有清热解毒、燥湿杀虫的功效,冰片具有清热解毒、止痛生肌作用。药理学研究表示,莪术油中含有莪术醇、莪术酮、莪术双酮等有效成分,具有抗病毒、抗癌、提升机体免疫力等作用[11]。冰片中含有龙脑、异龙脑成分,具有抗菌、抗炎、镇痛作用[12]。外治法安全性高,毒副作用少,可避免药物服用的肝脏首过效应,减少胃肠刺激。

宫颈HR-HPV 感染患者免疫功能低下,CD+8属于抑制性T 淋巴细胞,CD+4属于辅助性T 淋巴细胞,Ig M 与免疫功能呈正相关,Foxp3+Tregs水平低下可提示免疫系统功能紊乱[13]。本研究结果显示,治疗后,观察组CD+4、Foxp3+Tregs、Ig M 水平均高于对照组,CD+8水平低于对照组,表明保妇康栓联合干扰素治疗宫颈HR-HPV 感染下焦湿热证患者,可改善免疫功能。M-CSF主要由巨噬细胞、纤维细胞等分泌,可参与免疫应答及炎性反应[14];SDF-1由肝窦内皮细胞、肝星状细胞等产生,是一种小分子蛋白,广泛表达于干细胞、免疫细胞,可诱导机体发生炎性反应[15];TRAF6、TLR4可激活干扰素-κB(NF-κB)信号通络,促进炎症产生[16]。本研究结果显示,治疗后,观察组TRAF6、TLR4、M-CSF、SDF-1水平均低于对照组,表明保妇康栓联合干扰素治疗宫颈HR-HPV 感染下焦湿热证患者,可抑制炎性反应。HR-HPV 感染常伴随氧化应激反应[17]。OSI、TOS、ROS、TAS与氧化应激反应相关。本研究结果显示,治疗后,观察组OSI、TOS、ROS 水平均低于对照组,TAS 水平高于对照组,表明保妇康栓联合干扰素治疗宫颈HR-HPV 感染下焦湿热证患者,可抑制氧化应激反应。本研究结果还显示,治疗后,观察组HPV-DNA 水平低于对照组,总有效率高于对照组,表明保妇康栓联合干扰素治疗宫颈HR-HPV 感染下焦湿热证患者,可降低HPVDNA 水平,提升临床疗效。

综上所述,保妇康栓联合干扰素治疗宫颈HRHPV 感染下焦湿热证,可改善患者的免疫功能,抑制机体的炎性反应及氧化应激反应,降低HPV-DNA 水平,疗效优于单独使用干扰素,值得临床借鉴。