多囊卵巢综合征孕妇血清PCSK9、CRTC3水平及对不良妊娠的预测价值

饶杨,赵轶男,何紫红,贺群芳,卢佩佩,谢茂华

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是常见的内分泌紊乱导致的慢性疾病,患者临床主要表现为多毛、排卵障碍或稀发排卵、肥胖、月经异常、雄激素异常升高等症状,发病机制较为复杂[1-3]。PCOS若不及时干预容易发生不良妊娠结局,故探寻能够预测PCOS患者不良妊娠的血清标志物,对于PCOS的治疗具有重要意义。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)与糖尿病、高脂血症等疾病的发生发展紧密相关,能通过减少低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)的降解,加重脂质代谢紊乱[4-6]。环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控的转录共激活因子3(CREB regulated transcription coactivator 3,CRTC3)是CRTC蛋白家族成员,有研究发现2型糖尿病和腹型肥胖患者的血清CRTC3水平异常升高,其升高程度与糖脂代谢紊乱、脂联素降低的程度和胰岛素抵抗有关[7-8]。基于此,本研究分析了PCSK9、CRTC3在PCOS患者血清中的表达及其对不良妊娠的预测价值,为临床诊治PCOS提供一定的参考依据,报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 纳入2020年12月—2022年9月武汉市第三医院产科收治的PCOS孕妇123例为研究组,同期医院孕检并生产的健康孕妇120例作为对照组,2组年龄、BMI、孕周、吸烟史、饮酒史、高血压史比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,研究组患者睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR)显著升高(P<0.01),见表1。本研究经过医院医学伦理委员会审核批准(2020-0563),受试者及家属知情同意并签署知情同意书。

表1 对照组与研究组孕妇临床资料比较

1.2 病例选择标准 (1)纳入标准:①符合2008年中华医学会制定的PCOS诊断标准[9];②年龄≥18岁;③超声检查显示孕妇卵巢呈多囊性变化,且具有雄激素异常升高的表现;④配合完成相关检查者;⑤临床资料完整者。(2)排除标准:①合并其他妇科疾病者;②合并全身感染性疾病者;③合并恶性肿瘤者;④由遗传、免疫、有害物质等其他原因引起的不良妊娠者;⑤近3个月内服用影响激素、血脂、血糖水平的药物者;⑥伴有心、肝、肾等重要脏器功能障碍者;⑦合并严重慢性基础性疾病者;⑧合并精神类疾病者;⑨过敏性体质者。

1.3 观测指标与方法

1.3.1 ELISA法检测研究对象血清PCSK9、CRTC3水平:孕妇入组后采取空腹肘静脉血5 ml,静置10 min后3 500 r/min离心10 min留取血清,于EP管中进行分装,置于-20℃保存待测。以人血清PCSK9 ELISA试剂盒(购自上海联迈生物工程有限公司)、人血清CRTC3 ELISA试剂盒(购自美国Sigma公司)说明书方法检测血清PCSK9、CRTC3水平。

1.3.2 随访:随访调查,记录自然流产、早产、死胎、死产、葡萄胎、出生缺陷、极低出生体质量儿、新生儿严重窒息等不良妊娠结局[10]。通过电话、门诊的方式自孕妇入院起,随访至产后72 d,根据孕妇是否发生不良妊娠结局,将PCOS孕妇分为不良妊娠亚组32例与妊娠良好亚组91例。

2 结 果

2.1 2组血清PCSK9、CRTC3水平比较 与对照组比较,研究组患者血清PCSK9、CRTC3水平均显著升高(P<0.01),见表2。

表2 对照组与研究组血清PCSK9、CRTC3水平比较

2.2 2亚组血清PCSK9、CRTC3水平比较 研究组患者出现不良妊娠结局32例(26.02%)。与妊娠良好亚组比较,不良妊娠亚组PCOS患者血清PCSK9、CRTC3水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 不良妊娠亚组与妊娠良好亚组血清PCSK9、CRTC3水平比较

2.3 PCOS患者血清PCSK9与CRTC3水平的相关性分析 Pearson法分析显示,PCOS患者血清PCSK9与CRTC3水平呈正相关(r=0.639,P<0.001)。

2.4 多因素Logistic回归分析PCOS患者发生不良妊娠结局的影响因素 以PCOS孕妇是否发生不良妊娠结局为因变量(发生=1,未发生=0),以PCSK9、CRTC3为自变量(实测值),进行多因素Logistic回归分析,结果显示:高PCSK9、高CRTC3是PCOS孕妇发生不良妊娠结局的危险因素(P<0.01),见表4。

表4 多因素Logistic回归分析PCOS患者发生不良妊娠结局的影响因素

2.5 血清PCSK9、CRTC3水平预测PCOS孕妇发生不良妊娠结局的价值分析 绘制血清PCSK9、CRTC3水平与二者联合预测PCOS孕妇发生不良妊娠结局的ROC曲线,并计算AUC,结果显示:血清PCSK9、CRTC3水平与二者联合预测PCOS孕妇发生不良妊娠结局的AUC分别为0.852、0.823和0.961,二者联合预测不良妊娠结局的AUC优于血清PCSK9水平、CRTC3水平单独预测(Z/P= 2.618/0.009、3.104/0.001),见表5、图1。

图1 血清PCSK9、CRTC3水平预测PCOS孕妇发生不良妊娠结局的ROC曲线

表5 血清PCSK9、CRTC3水平对PCOS孕妇发生不良妊娠结局的预测价值

3 讨 论

PCOS是常见的妇科内分泌性疾病,患者通常会出现糖脂代谢异常、卵泡发育不成熟、排卵障碍、胰岛素抵抗、月经紊乱、高雄激素血症等主要症状[11]。PCOS病因复杂,发病机制目前也尚未阐明,且研究发现,PCOS合并妊娠的妇女经促排卵而成功妊娠后较正常孕妇更容易发生不良妊娠结局,早孕流产率高达30%～50%[12-13]。因此,探寻高效准确的生物标志物有助于及时评估妊娠结局,对于减少PCOS患者的不良妊娠结局、保障患者与胎儿的生命安全具有重要意义。本研究结果显示,与对照组比较,研究组PCOS患者T、LH、HOMA-IR显著升高,说明PCOS患者会出现不同程度的高雄激素血症和胰岛素抵抗,这与以往文献报道一致。

PCSK9是一种前蛋白转换酶,由肝脏合成和分泌,在肝脏、肾脏、小肠等组织中表达,与脂质代谢密切相关,能通过降解LDL受体而影响LDL的代谢,还参与调控细胞周期、炎性反应、氧化应激等过程[14]。林少玲等[15]研究发现PCSK9在妊娠期糖尿病患者血清中呈高表达,与妊娠期糖尿病患者的糖脂代谢和IR密切相关,其可能参与了妊娠期糖尿病的发生与发展。刘志文等[16]研究发现PCSK9参与2型糖尿病并发大血管病变的过程,对于疾病的高效诊断具有重要作用。Wu等[17]研究发现妊娠期糖尿病患者循环PCSK9水平显著高于正常糖耐量的孕妇,PCSK9与血脂异常、妊娠期糖尿病的发生密切相关。本研究中,与对照组、妊娠良好亚组比较,研究组、不良妊娠亚组的PCOS患者血清PCSK9水平均显著升高,这可能提示PCSK9在PCOS病情进展中起着重要的作用,高表达的PCSK9可能通过引起糖脂代谢异常和胰岛素抵抗来促进PCOS的发生与发展,促进不良妊娠的发生。

CRTC3是CRTC家族的一员,在人体多种组织中均有表达,在脂肪组织中表达较高,能够参与调节细胞和组织的能量代谢,对于脂肪组织具有调节作用[18]。刘秀娟等[19]研究发现妊娠期糖尿病患者血清CRTC3水平显著升高,血清CRTC3水平的升高程度与糖脂代谢和不良妊娠结局密切相关。Liu等[20]研究发现CRTC3的过表达通过上调肌内和皮下脂肪细胞中的钙离子—环磷酸腺苷信号通路来促进脂肪的分化,说明CRTC3参与调节了猪脂肪细胞的脂质代谢和成脂分化。同样,本研究中与对照组、妊娠良好亚组比较,研究组、不良妊娠亚组的PCOS患者血清CRTC3水平均显著升高,说明高表达的CRTC3水平可能影响脂肪代谢,参与PCOS的发生发展,引起不良妊娠结局的发生。

本研究还通过Pearson分析发现,PCOS患者血清PCSK9与CRTC3水平呈正相关,说明血清PCSK9与CRTC3水平可能通过正反馈调节的方式加速PCOS的进程。多因素Logistic回归分析结果显示,PCSK9、CRTC3是PCOS孕妇发生不良妊娠结局的危险因素,因此推测血清PCSK9、CRTC3水平的升高可能促进PCOS疾病的发生。此外,本研究结果发现血清PCSK9、CRTC3联合预测PCOS患者发生不良妊娠结局的AUC为0.961,均高于血清PCSK9、CRTC3单独预测,这些结果提示血清PCSK9、CRTC3联合预测PCOS不良妊娠结局的有效性提高,对临床预测和治疗PCOS具有一定的参考价值。

综上所述,PCOS患者血清中PCSK9、CRTC3水平显著增加,两者的升高与妊娠结局密切相关,二者联合检测对预测不良妊娠结局具有重要价值。但PCSK9、CRTC3在PCOS中的作用机制还尚未明确,后期将设计实验进行论证。

利益冲突：所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明

饶杨:设计研究方案,实施研究过程,论文撰写;赵轶男、贺群芳、卢佩佩:实施研究过程,进行统计学分析;何紫红:数据收集及分析整理;谢茂华:论文审核修改