免疫荧光分析法检测ST2 蛋白的临床性能评价

赖秀娟（通信作者），陆建伟，蔡美玲，陆叶青，黄小华

1 巴迪泰（广西）生物科技有限公司 （广西南宁 530031）；2 广西中医药大学第一附属医院 （广西南宁 530022）

心力衰竭主要指心脏结构或功能发生障碍而引起的心脏循环障碍症候群，是心肌疾病、高血压、冠心病和心脏瓣膜病等心血管疾病的终末阶段体现。心力衰竭好发于老年人，在70 岁以上人群中的发病率高于10%[1-2]。近年来，随着人口老龄化不断加剧，心力衰竭等心血管疾病患病人数不断增加[3]。心力衰竭具有较高的发病率、复发率及病死率，严重影响人们的身体健康和生命质量。因此，对心力衰竭患者进行有效的早期诊断、控制病情恶化和预后评估具有十分重要的作用。临床主要依据患者的体征、症状、病史、影像学检查及实验室检查等资料诊断心力衰竭。随着临床检验技术的不断发展，生物标志物在预测及诊断心力衰竭中起到了重要的作用，目前应用较广泛的为N 末端脑钠肽前体（N terminal proB-type natriureticpeptide，NT-proBNP）及脑钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）。国内外研究发现，NT-proBNP 与心力衰竭患者病情﹑预后密切相关，可反映心室内压和容量负荷，诊断左心室活动异常的灵敏度和特异度均较高[4-9]。但NT-proBNP 水平易受年龄、性别、肾脏功能、体质量指数等多种因素的影响，无法准确反映心力衰竭发生、发展的全过程。有研究发现，ST2 蛋白在心力衰竭患者中表现出独特的生物学特征，对临床具有一定的指导作用[10]。ST2 蛋白具有单一阈值，方便解读，且几乎不受性别、年龄、体质量指数和肾功能等因素的限制，能够弥补常规生物标志物（NT-proBNP、BNP）的不足。联合检测ST2 蛋白及常规生物标志物可为心力衰竭的早期诊断、治疗监测、危险分层及预后评估提供更全面的信息。

目前，酶联免疫吸附法为检测ST2 蛋白的主要方法，市场上主流产品包括美国Critical Diagnostics 公司的Presage ST2 试剂等。彭剑桥[11]的研究结果显示，Presage ST2 检测ST2 蛋白的批内精密度分别为4.8%和2.8%，批间精密度分别为5.9%和6.7%，线性范围为0.000～206.622 ng/ml。为了验证巴迪泰（广西）生物科技有限公司生产的免疫荧光分析法ST2 蛋白检测试剂的性能，本研究以Presage ST2 试剂为对照，比较两种方法检验结果的相关性与一致性，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

血清样本：选取2022 年11 月至2023 年2 月广西中医药大学第一附属医院110 例患者的血清样本，排除黄疸、溶血、脂血、高浊度或采样量不足样本。患者年龄37～86 岁，男62 例，女48 例；心力衰竭阳性样本37 个，健康者血清样本73 个。

试剂与仪器：美国Critical Diagnostics 公司生产的Presage ST2 检测试剂及配套校准品、酶标仪；巴迪泰（广西）生物科技有限公司生产的ST2 蛋白检测试剂及配套的质控品、A5000 PLUS 全自动干式荧光免疫分析仪。

1.2 方法

1.2.1 试验前准备

（1）操作人员熟悉并掌握对照产品和验证产品的样本制备方法、检测仪器操作方法；（2）试验前，对各检测系统分别行质控检测，确保系统性能良好、检测数据可靠；（3）对超过试剂盒线性范围的样本，按要求进行稀释。

1.2.2 相关性分析

采用对照试剂和验证试剂同时测试110 个临床血清样本，使用线性回归法分析两种检测方法的相关性，拟合一元线性回归方程，计算相关系数r，一元线性回归方程斜率处于0.90～1.10 间，且r>0.975，说明线性相关良好。

1.2.3 一致性分析

采用Kappa检验分析两种方法检测结果的阳性符合率、阴性符合率（定性判断），Kappa≥0.75，认为一致性高。采用Bland-Altman Plot 分析两种方法定量检测结果的一致性，将对比方法和验证方法每个样本的检测值之差与相应两个方法的检测均值做散点图，平均值之差作为基准值，进行散点展示，观察离群值，90%在Mean±1.96s范围内即符合要求。

1.3 统计学处理

采用SPSS 22.0 统计软件进行数据分析。采用MedCalc（Version 19.4.0）作图。相关性采用一元线性回归分析，以相关系数r表示；一致性分析采用Kappa检验和Bland-Altman Plot 法。

2 结果

2.1 相关性分析

线性回归分析法拟合的一元线性回归方程为y=0.9878x+1.6977，斜率b=0.9878，相关系数r=0.9959，表明两种方法的相关性密切，见图1。

图1 对照方法与验证方法检测结果线性相关图

2.2 一致性分析

Kappa检验结果显示，Kappa系数为0.901，表明两种方法定性判断检测结果的一致性高。Bland-Altman Plot 分析显示，两种方法检测血清ST2 蛋白的结果位于Mean±1.96s内的数值占96.36%（106/110），符合占比≥90%的要求，见图2。

图2 对照方法与验证方法检测结果的Bland-Altman Plot 分析图

3 讨论

心力衰竭是由不同因素引起的心脏病的严重阶段，复发率和病死率均较高，不仅对患者的生命安全造成威胁，也加重了社会及家庭的负担。因此，实现对心力衰竭患者的早期诊疗，对抑制病情恶化和再次入院至关重要。除通过观察症状、体征及采用心电图、影像检查等手段对心力衰竭进行诊断筛查外，现代医学亦通过检测各种生物标志物实现对心力衰竭的诊治。生物标志物检测可快速、便捷、有效地对心力衰竭进行早期诊断、治疗监测和预后评估。研究发现，ST2 蛋白是心力衰竭的重要生物标志物，心力衰竭患者血清ST2 蛋白浓度显著升高，且与其病情严重程度、重复入院和病死风险等存在密切关联[12-14]。

酶联免疫吸附法为检测ST2 蛋白的主流方法，本研究以该法为对照，验证免疫荧光分析法检测ST2 蛋白的性能。结果显示，两种方法的线性相关系数r为0.9959，具有密切的相关性；Kappa定性分析结果显示，Kappa为0.901，一致性高；Bland-Altman Plot 定量分析结果显示，检测结果位于Mean±1.96s内的占比为96.36%，表明两种检测方法具有很高的一致性。

综上所述，巴迪泰（广西）免疫荧光分析法的ST2 试剂与酶联免疫吸附法的Presage ST2 试剂检测ST2 蛋白的相关性密切、一致性高，等效性良好，均可满足临床检验需求，临床可根据需要选择适合的检测方法。