兰花辟瘟喷剂空气消毒效果应用

马飞云， 牛 阳，2， 马文英

（1.宁夏医科大学，银川 750004； 2.宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室，银川 750004）

空气是致病微生物传播的重要途径之一，空气消毒作为预防疾病、防止感染的重要措施日益受到重视[1]。目前常用的空气消毒方法有以过氧化物类为主的化学制剂的熏蒸和喷洒法，以及紫外线灯、臭氧发生器、机械通风过滤器处理等物理方法[2]。这些方法能够快速杀灭致病微生物，但也存在不同程度的毒性和刺激性且费用高昂。例如，与人体接触紫外线灯消毒可造成损害，且消毒效果维持时间短，停止照射后细菌数回升快[3]；化学药物具有腐蚀性，对人体皮肤、黏膜、呼吸道有一定的刺激，易对人体造成不良影响[4]。研究[5]表明，化学消毒剂与环境中的物质发生反应会产生多种消毒副产物（DBPs），DBPs 可能导致人类出现细胞毒性、遗传毒性、皮疹、哮喘、结肠癌和膀胱癌。

中药用于防治疫病和消毒的历史悠久，应用广泛。人们通过佩戴或者悬挂具有芳香气味的药物来驱赶害虫，防治疫病[6]。《肘后备急方》中首次明确提出了空气消毒法，利用中草药的烧熏达到对空气环境消毒的目的，并记载了许多烧熏法的辟瘟疫方[7]。中药空气消毒法相较其他消毒方法，具有可杀灭或抑制多种病原微生物，无毒、无腐蚀性、无刺激性，适合在人员较密集、易污染的环境中运用等优点。兰花辟瘟喷剂根据中医温病“芳香辟秽、清热解毒”理论，结合《慈航集三元普济方》，选用具有良好抑菌作用的中药制成。本研究参照2002 版《消毒技术规范》要求，采用兰花辟瘟喷剂进行空气消毒，观察其对室内空气的消毒效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 实验材料

1）仪器：超声雾化器（江苏鱼跃医疗设备股份有限公司）、电子分析天平、冰箱、磁力搅拌器、自动双重纯水蒸馏器、电热恒温培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）、全自动高压蒸汽灭菌器、超净工作平台等。2）试剂：普通灭菌营养琼脂培养基（90 mm 无菌玻璃平皿）、2%过氧乙酸、75%乙醇。

1.2 兰花辟瘟喷剂的制备

1）组方：佩兰、金银花、生黄芪、藿香等。2）制备：将上述中药研成细末，取其中一份加入5 份80 ℃热水，然后在室温下浸泡24 h，过滤取药液。再在此药末中加入75%乙醇（乙醇量为中药滤过药液量的1/3），加盖浸泡48 h，过滤后取液，与中药液混匀，浓缩至每毫升药液中含0.5 g 中药材（0.5 g·mL-1），备用。3）性状：本品为气味芳香的淡棕褐色液体。4）保存：紧闭封口置于5 ℃条件下冷藏备用。

1.3 实验方法

1.3.1 实验场所 按照实验设计，选择宁夏医科大学容积（8.5 m×7.0 m×3.5 m）相同，室内结构（门、窗、室内设施）完全一致的教室作为消毒对象。实验开始前将待消毒的教室内物品摆放整齐，密闭门窗，室内温度为15～20 ℃。

1.3.2 不同剂量兰花辟瘟喷剂空气灭菌实验 为了检测不同剂量兰花辟瘟喷剂对室内空气中自然菌的灭杀效果，将兰花辟瘟喷剂按照高剂量组（6 mL·m-3）、中剂量组（4 mL·m-3）、低剂量组（2 mL·m-3）通过超声雾化器进行喷雾空气消毒。

1.3.3 兰花辟瘟喷剂与2%过氧乙酸对照空气灭菌实验 为了检测兰花辟瘟喷剂对室内空气中自然菌的灭杀效果与其他消毒剂的差异，分别采用兰花辟瘟喷剂（2 mL·m-3）、2%过氧乙酸（2 mL·m-3）通过超声雾化器进行喷雾空气消毒。

1.3.4 正常人流量下兰花辟瘟喷剂空气灭菌实验 为了检测兰花辟瘟喷剂对正常人流下量室内空气中自然菌的灭杀效果，将兰花辟瘟喷剂（2 mL·m-3）、无菌蒸馏水（2 mL·m-3）通过超声雾化器分别在正常人流量室内进行喷雾空气消毒，并参照2002 版《消毒技术规范》的要求和步骤[8]，自制问卷对在场人员对兰花辟瘟喷剂消毒的气味接受度（完全接受、一般接受、不接受）以及气道反应耐受度（轻微呛咳为耐受，严重呛咳为不耐受）进行调查，调查人员性别、年龄等一般资料差异均无统计学意义（P 均＞0.05）。

1.3.5 采样方法 采用平板沉降法，分别在每间教室设东、西、南、北4 角及中央共5 个点，其中东、西、南、北均距墙1 m，离地面1 m 处放入90 mm玻璃平皿，打开平板，盖子搁于平皿边缘，使平皿暴露在空气中，0.5 h 后盖上平板。每组实验于消毒前0.5 h 及消毒后0.5、1、2、4 h 各采集空气中细菌标本7 次，将采集好空气细菌标本的培养基置于37 ℃电热恒温培养箱培养48 h，观察并计数菌落数。

1.3.6 空气细菌菌落总数计算[9]及评定标准[10]空气细菌菌落总数（cfu·m-3）=50 000 N/A·T，其中A 为平皿面积（cm2），T 为平皿暴露时间（min），N为平皿平均菌落总数（cfu/平皿）。评定标准参照文献[11]，即空气细菌菌落总数≤10 cfu·m-3符合Ⅰ类环境标准；空气细菌菌落总数≤200 cfu·m-3符合Ⅱ类环境标准；空气细菌菌落总数≤500 cfu·m-3符合Ⅲ类环境标准。

1.4 统计学方法

采用SPSS 23.0 统计学软件进行数据处理，计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用方差分析（ANOVA），组间两两比较采用LSD－t 检验进行。P≤0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同剂量兰花辟瘟喷剂空气消毒效果比较

消毒后0.5、1、2、4 h，低、中、高剂量组空气细菌菌落总数均低于消毒前（P 均＜0.05），其中消毒后1、2 h 空气细菌菌落总数较其他时间段少（P 均＜0.05），并且细菌菌落总数均≤200 cfu·m-3，符合Ⅱ类环境标准，见表1。

表1 不同剂量兰花辟瘟喷剂消毒前后空气细菌菌落总数比较（±s，cfu·m-3）

表1 不同剂量兰花辟瘟喷剂消毒前后空气细菌菌落总数比较（±s，cfu·m-3）

与消毒前0.5 h 比较*P＜0.05；与消毒后0.5 h 比较#P＜0.05。

组别消毒前0.5 h消毒后0.5 h消毒后1 h低剂量组711.14±35.24419.20±37.05*123.51±18.30*#中剂量组707.40±37.05407.21±33.60*114.15±19.60*#高剂量组692.42±45.02393.00±21.39*99.19±12.78*#消毒后2 h 132.87±17.62*#125.39±24.92*#95.44±14.57*#消毒后4 h 431.71±26.65*427.97±33.86*396.74±35.24*

2.2 兰花辟瘟喷剂与2%过氧乙酸空气消毒效果的比较

消毒后1、2、4 h，兰花辟瘟喷剂和2%过氧乙酸组空气细菌菌落总数均低于消毒前0.5 h（P均＜0.05）；消毒后0.5 h，2%过氧乙酸组空气细菌菌落总数低于兰花辟瘟喷剂组（P＜0.05）。见表2。

表2 兰花辟瘟喷剂与2%过氧乙酸消毒前后空气细菌菌落总数比较（±s，cfu·m-3）

表2 兰花辟瘟喷剂与2%过氧乙酸消毒前后空气细菌菌落总数比较（±s，cfu·m-3）

与消毒前0.5 h 比较*P＜0.05；与兰花辟瘟喷剂组消毒后0.5 h 比较#P＜0.05。

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2.3 兰花辟瘟喷剂与无菌蒸馏水在正常人流量下消毒前后空气细菌菌落总数比较

在正常人流量下，兰花辟瘟喷剂和无菌蒸馏水组消毒前0.5 h 空气中细菌菌落总数差异无统计学意义（P＞0.05）。无菌蒸馏水组消毒前后空气中细菌菌落总数差异无统计学意义（P 均＞0.05），而消毒后0.5、1、2 和4 h 的兰花辟瘟喷剂组空气细菌菌落总数均低于消毒前0.5 h（P 均＜0.05），且消毒后1、2 h 空气细菌菌落总数均≤200 cfu·m-3，符合Ⅱ类环境标准，但消毒后4 h 未达到Ⅲ类环境标准，见表3。对在场70 名人员进行调查，其中对兰花辟瘟喷剂消毒气味完全接受的人数占74.29%，一般接受的人数占20.00%，不接受的人数占5.71%，接受度为94.29%；在兰花辟瘟喷剂现场消毒未出现呛咳的人数占81.43%，可耐受人数（出现轻微呛咳）占17.14%，不能耐受（出现严重呛咳）人数占1.43%，兰花辟瘟喷剂气道反应耐受度为98.57%。

表3 兰花辟瘟喷剂与无菌蒸馏水在正常人流下消毒前后空气细菌菌落总数比较（±s，cfu·m-3）

表3 兰花辟瘟喷剂与无菌蒸馏水在正常人流下消毒前后空气细菌菌落总数比较（±s，cfu·m-3）

与消毒前0.5 h 比较*P＜0.05。

组别消毒前0.5 h消毒后0.5 h消毒后1 h兰花辟瘟喷剂组711.14±36.60495.93±34.18*166.56±24.76*无菌蒸馏水组707.40±36.27724.24±33.58720.50±42.78消毒后2 h 183.40±28.30*729.86±33.58消毒后4 h 521.60±26.49*731.73±31.57

3 讨论

兰花辟瘟喷剂继承了中国古代医家的防疫思想，在传统中医理论指导下，结合现代医学知识，优选具有清热解毒、芳香避秽、扶助正气的佩兰、金银花、生黄芪、藿香等中药，采用现代工艺提取药物有效成分配制而成。

许多中草药都具有很强的抗菌、抗病毒作用，在空气消毒方面具有广泛的应用价值[12]。本研究结果显示，兰花辟瘟喷剂的消毒效果良好，以2 mL·m-3的剂量对密闭空间和正常人流量下的室内空间进行超声雾化消毒，消毒后1、2 h 的空气细菌菌落总数均能达到Ⅱ类环境标准要求，而且无刺激性、污染性等毒副反应，充分发挥了中医药在防疫上的优势，值得推广应用。