血清PIVKA-Ⅱ、AFP在中晚期肝癌患者中的表达及对预后的预测价值

王远闽

（永安市立医院检验科，福建 永安 366000）

肝癌（HCC）是我国最常见发生于肝脏的恶性肿瘤，主要分为原发性和继发性两大类，其中原发性HCC包括肝细胞癌、肝内胆管癌和混合型HCC，其中肝细胞癌占比85.00%～90.00%及以上[1]。发展中国家HCC的发病率高出西方国家HCC发病率的2～3倍，而我国HCC发病率高居全球首位，病死率高居全球第3位[2]。由于早期HCC通常无症状或者症状不典型，当患者察觉身体明显不适时，病情已经进入中晚期[3]。相关报道显示，晚期肝癌患者的5年生存率不超过15%，严重影响患者的生活质量[4]。随着医学科技的发展，临床上对于HCC的诊疗也逐渐取得了进展，但在整体预后方面仍然达不到患者想要的效果。血清异常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）主要在肝脏进行合成，当肝功能受到损伤后其水平会产生相应的变化[5]。甲胎蛋白（AFP）作为肿瘤的标志物，在HCC患者中发挥着必不可少的作用[6]。因此，本研究探讨PIVKA-Ⅱ、AFP在中晚期HCC患者中的表达及对预后的预测价值，以期为临床诊疗进一步提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 根据研究需要进行分组，将2018年1月至2020年12月我院收治的300例中晚期HCC患者分为中晚期HCC组，95例良性肝脏疾病患者分为良性肝病组，同时间段至医院体检的100名健康人员分为健康组；同时根据患者的预后情况分为预后良好组（存活）213例、预后不良组（死亡）87例。中晚期HCC组（n=300）：男158例，女142例；年龄35～80（65.36±3.01）岁。良性肝病组（n=95）：男50例，女45例；年龄36～79（65.41±2.99）岁；健康组（n=100）：男52例，女48例；年龄35～78（65.39±3.02）岁；预后良好组（n=213）：男109例，女104例；年龄35～79（65.36±2.99）岁；预后不良组（n=87）：男45例，女42例；年龄36～80（65.39±3.01）岁。据统计学分析，各组中性别、年龄等差异均无统计学意义（P＞0.05）。本研究经本院医学伦理委员会批准。纳入标准：①符合《原发性肝癌规范化诊治的专家共识》中[7]关于中晚期肝癌的诊断标准。②所有患者及家属签署知情同意书。③预计生存时间在3个月以上者。④近期2个月内未接受放化疗治疗。排除标准：①合并其他重要脏器肿瘤者。②处于妊娠期的妇女。③合并严重血液系统或免疫功能障碍疾病者。④合并严重认知或精神障碍疾病者。

1.2 研究方法 收集所有受试者临床资料。①向患者及家属详细了解患者的一般资料，包括年龄、既往病史、手术史等。②详细记录所有受试者的血标本结果以及预后情况。③出院后对所有受试者进行随访，每3个月随访1次，观察发生预后不良的情况。

1.3 观察指标和评价标准

1.3.1 血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平 采集所有受试者空腹静脉血4 mL，采用中佳低速离心机（型号：SC-04）3 000 r/min，离心10 min，离心半径15 cm，离心后取和光纯药工业株式会社全自动电泳荧光免疫分析仪（uTASWako i30）检测血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平。

1.3.2 预后不良结局 从入组开始，对所有受试者进行随访，每3个月随访1次，随访2年，观察记录预后不良（死亡）发生情况。

1.4 统计学分析 采用SPSS22.0软件包进行统计学分析，计数数据用百分比（%）表示，采用χ2检验分析；符合正态分布计量资料用（）表示，采用独立样本t检验；非正态性分布计数资料用M（P25，P75）表示，采用Mann-WhitneyU检验；建立ROC曲线分析血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对诊断中晚期HCC及预测预后不良事件的价值，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 比较3组研究对象血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平 中晚期HCC组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平均较良性肝病组及健康组高（P＜0.05），良性肝病组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平均高于健康组（P＜0.05）。见表1。

表1 比较3组研究对象血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平[M（P25，P75）]

2.2 血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对中晚期HCC的诊断价值 建立ROC曲线分析显示，血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平联合诊断中晚期HCC患者的敏感度、特异度、AUC分别为93.3%、82.6%、0.851，均高于单个指标的诊断效能（P＜0.05）。见表2、图1。

图1 血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对中晚期HCC的ROC曲线

表2 血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对中晚期HCC的诊断价值

2.3 比较两组预后情况血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平 预后不良组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平均显著高于预后良好组（P＜0.05）。见表3。

表3 比较两组预后情况血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平（）

表3 比较两组预后情况血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平（）

2.4 血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对预后不良情况的预测价值 建立ROC曲线分析显示，血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平联合诊断预后不良情况的敏感度、特异度、AUC分别为89.7%、93.4%、0.927，均高于单个指标的诊断价值（P＜0.05）。见表4、图2。

图2 血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对预后不良情况的ROC曲线

表4 血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对预后不良情况的预测价值

3 讨论

临床上常通过手术治疗HCC，然而早期HCC症状不明显，且在诊断方面有待提高，严重影响患者的预后[8]。及时有效的诊断HCC，可以快速高效制订治疗方案、提升预后效果。临床上将影像学作为诊断HCC的首要方法，CT、超声、磁共振等检查对诊断HCC的分期及分型有一定的作用[9]，但当HCC的影像学特征不明显时，实验室血清肿瘤标志物便成为辅助诊断的重要方法，其中AFP在肿瘤中通常呈现高表达的状态，与HCC患者病情发展和疾病特征有着密不可分的关系，但其单一指标对检测HCC的敏感性较低[10]。而血清PIVKA-Ⅱ是凝血酶原的前身，细胞异常合成凝血酶原便会导致缺乏维生素K，增加合成PIVKA-Ⅱ，与HCC的发生发展关系密切[11]。因此，进一步探索血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平在中晚期HCC患者中的表达及对预后的预测价值。

本研究针对中晚期HCC组、良性肝病组患者及健康组人群的血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平进行比较，结果显示中晚期HCC组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平均较良性肝病组及健康组高，良性肝病组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平均高于健康组，说明血清PIVKA-Ⅱ、AFP在中晚期HCC患者中呈现出高表达水平，且良性肝病患者的血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平高于健康人。同时，建立ROC曲线分析显示，血清PIVKA-Ⅱ、AFP联合诊断中晚期HCC患者的敏感度、特异度、AUC分别为93.3%、82.6%、0.851，均高于单个指标的诊断效能，说明血清PIVKA-Ⅱ、AFP二者联合对中晚期HCC患者具有较好的诊断价值。推测其原因可能是血清PIVKA-Ⅱ主要来源于肝脏，是一种不具备活性的凝血酶原，在正常人的机体内凝血酶原在肝细胞内高尔基体和内质网中合成，10个谷氨酸残基存在于凝血酶N-末端，其在辅酶维生素K和γ-谷氨酰羧化酶的催化作用下完全转化为γ-羧基谷氨酸，与钙结合转化为具有活性的凝血酶原，当没有完全转化时就会形成脱γ-羧基凝血酶原，即为异常的凝血酶原[12]。HCC患者的肿瘤组织中由于维生素K代谢紊乱，导致其含量降低，从而造成谷氨酸残基不能完全转化为γ-羧基谷氨酸与钙正常结合形成有活性的凝血酶原，从而导致血清PIVKA-Ⅱ水平升高[13]。同时，肝癌的癌细胞可以合成与分泌AFP并将其释放入血，导致血液中AFP持续性、明显升高[14]。因此，在中晚期HCC患者中血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平呈现出高表达状态，且对诊断HCC具有一定的临床价值。

本研究对于预后方面，结果显示预后不良组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平均显著高于预后良好组，说明预后不良患者的血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平比预后良好患者高。同时，建立ROC曲线分析显示，血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平联合诊断中晚期HCC患者预后不良情况的敏感度、特异度、AUC分别为89.7%、93.4%、0.927，均高于单个指标的诊断价值，说明血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平对中晚期HCC患者的预后具有较好的预测价值，且联合诊断效能高于单个指标诊断效能。推测其原因是AFP是一种在肝脏合成的糖蛋白，可以调节免疫抑制、生长因子表达、诱导T淋巴细胞的凋亡等，与HCC患者疾病发展及病理体征密切相关，但其单独检测HCC的敏感度不高，可能是AFP易受外界因素干扰，在机体内不稳定，从而导致敏感度较低[15]。此外，肿瘤细胞不断增殖，对机体进行侵袭，严重影响凝血功能造成异常凝血酶表达，其中血清PIVKA-Ⅱ作为异常凝血功能合成的物质，在HCC患者中呈现较高表达，不断促进患者疾病的发展及恶化，最终造成不良预后结局[16-17]。因此，血清PIVKA-Ⅱ、AFP对中晚期HCC患者具有一定的预后价值。

综上所述，血清PIVKA-Ⅱ、AFP在中晚期HCC患者中呈高表达状态，对诊断中晚期HCC及预测预后不良事件具有一定的价值，进一步为临床诊断和治疗提供依据。