饲粮中添加不同比例浮萍对蛋鸡血液指标的影响

李泽青　王晗　于海霞　窦广跃　王鸿英　闫峻

摘    要：為了研究浮萍不同添加比例对60～70周产蛋中后期蛋鸡血液常规、血清生化和抗氧化指标的等影响，采用单因素完全随机设计，选择2 000羽60周龄的产蛋中后期产蛋鸡，分成4组，在基础日粮中分别添加0%、3%、5%、7%浮萍，每组5个重复，每重复100羽蛋鸡，试验期60 d。试验结束后，对白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量、血小板数、淋巴细胞数、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）进行分析。结果表明：与对照组相比，添加适量的浮萍可以降低产蛋中后期蛋鸡MDA、BUN、TG、CHO含量，以及白细胞数和淋巴细胞数，升高了红细胞数、血红蛋白含量、血小板数、TP含量和总抗氧化能力。综上，蛋鸡饲粮中添加适量浮萍能改善产蛋中后期蛋鸡血液指标，促进机体代谢，提高机体抗氧化能力。

关键词：浮萍；蛋鸡；血液指标

中图分类号：S816.7       文献标识码：A      DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2023.S.010

Effects of Dietary Duckweed Supplementation with Different Proportions on Blood Indexes of Laying Hens

LI Zeqing1， WANG Han2， YU Haixia1， DOU Guangyue3， WANG Hongying1， YAN Jun2

（1.Tianjin Agricultural Development Service Center， Tianjin 300061， China; 2.Tianjin Key Laboratory of Animal Molecular Breeding and Biotechnology/Tianjin Engineering Research Center of  Animal Healthy Farming/Institute of Animal Science and Veterinary， Tianjin Academy of Agricultural Sciences， Tianjin 300381， China; 3.Agricultural and Rural Development Service Center of Tianjin Binhai New Area， Tianjin 300480， China）

Abstract： In order to study the effects of different addition ratios of duckweed on blood routine levels， serum biochemical parameters and antioxidant indexes of laying hens aged 60-70 weeks， single factor completely random design was used. A total of 2 000 laying hens aged 60 weeks were divided into 4 groups. Duckweed of 0%， 3%， 5%， and 7% was added to the basal diet with five replicates per group. The experiment lasted for 60 days per replicate of 100 laying hens. At the end of the experiment， leukocyte count， erythrocyte count， hemoglobin content， platelet count， lymphocyte count， malondialdehyde （MDA）， superoxide dismutase （SOD）， glutathione peroxidase （GSH-Px）， total antioxidant capacity （T-AOC）， total protein （TP）， albumin （ALB）， urea nitrogen （BUN）， creatinine （CRE）， uric acid （UA）， triglyceride （TG） and cholesterol （CHO） were analyzed. The results showed that compared with the control group， the contents of MDA， BUN， TG， CHO， leukocyte count and lymphocyte count of laying hens in the middle and later laying period were decreased， and erythrocyte count， hemoglobin content， platelet count， TP content and total antioxidant capacity of laying hens were increased after adding duckweed in the moderate amount. In conclusion， dietary duckweed supplementation can improve some blood indexes， promote metabolism and enhance antioxidant capacity of laying hens in the middle and later laying period.

Key words： duckweed; laying hens; blood index

随着社会的快速发展，人们对食品安全的关注也不断提升。长期滥用抗生素而导致的细菌耐药、药物残留、环境污染等问题层出不穷，迫使畜牧业急需开发一种安全高效、无残留、不易产生耐药性的天然绿色抗生素替代品。植物提取物是一类来源于天然植物的活性物质。众多研究表明，在动物饲料中添加单一或复合植物提取物对畜禽生长发育及生产性能具有促进作用，“营养活性物质组学”理论认为，这可能是多种营养活性物质之间的协同作用。浮萍（Lemna minor L.），浮萍科水面浮生植物，各地均有种植，是一种优质的饲料、食物和药用植物[1]。浮萍中的主要有效化学成分为芹菜素、木犀草素、荭草素、牡荆素[2-4]等，其在抗氧化、抗菌、抗寄生虫、免疫调节和促进修复方面均有一定作用[5-9]。浮萍的次级代谢产物中包括异黄酮，是一类豆科植物中的黄酮类化合物。有研究表明，42日龄的公鸡饲喂含异黄酮（10～80 mg·kg-1）的饲粮可显著降低血浆中MDA含量，提高血浆T-AOC和SOD活性[10]。还有研究证明，经芹菜素治疗能够明显提高AD大鼠海马组织SOD、GSH-Px活性并降低MDA含量，降低TNF-α、IL-1β、IL-6水平，提高Nrf2、HO-1蛋白表达量[11]。但是，在产蛋中后期蛋鸡饲粮中添加浮萍对蛋鸡血清中酶和免疫因子的变化缺乏研究和探讨。本试验通过在蛋鸡饲粮中添加不同比例的浮萍，研究其对产蛋中后期蛋鸡各种血液指标的影响，以期为浮萍在蛋鸡生产中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验使用的浮萍由华睿（天津）生态环境科技有限公司提供，风干物采用粉碎机粉碎后过40目筛，避光干燥保存备用。

1.2 试验设计

按照一定比例（0%、3%、5%、7%）将浮萍添加到产蛋鸡基础饲粮中。试验选择2 000羽60周龄的产蛋中后期产蛋鸡作试验动物，分为4组，每组500羽。其中，1组为对照组，其他3组为试验组。每个试验组随机分为5个重复，每个重复100羽蛋鸡。饲养试验过程包括预试验7 d，正式试验60 d。基础饲粮为正常的商业饲粮，营养成分见表1。

1.3 饲养管理

试验组和对照组的蛋鸡饲养在相同环境内，每日上午、下午喂料2次。所有试验蛋鸡自由采食、饮水，每日恒定光照16 h，温度平均21 ℃，相对湿度为40%～55%，自然通风。每日观察鸡群健康状况、记录死淘数，每日清粪、捡蛋各1次，保持鸡舍内的温度和湿度，每日对鸡舍通风，按常规程序进行鸡只免疫和栏舍消毒。

1.4 血清指标测定

试验第60天，每个重复随机选取3只体质量接近的健康蛋鸡，自由饮水但空腹12 h，翅静脉采血4 mL，其中2 mL血液加抗凝剂用于血常规指标测定；另外2 mL血液静置后，3 500 r·min-1离心10 min，分离血清样品用于血清生化指标测定。

抗凝血样品使用全自动血液分析仪进行血常规指标检测，检测指标为：白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量、血小板数和淋巴细胞数。

血清样品使用全自动生化分析系统测定，检测指标为：丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）。

1.5 数据统计分析

本研究数据采用Excel 2013软件进行整理，使用SPSS 24.0中单因素方差分析（one-way ANOVA）分析数据显著性，数据以平均值±标准误表示。P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 浮萍对产蛋中后期蛋鸡血常规的影响

如表2所述，与对照组相比，3%浮萍组白细胞数、血小板和淋巴细胞数显著降低（P<0.05）；5%浮萍组白细胞数显著降低（P<0.05）； 3%浮萍组、5%浮萍组、7%浮萍红细胞数和血红蛋白含量有升高趋势，但无显著差异（P>0.05）。

2.2 浮萍对产蛋中后期蛋鸡血清生化指标的影响

如表3所述，与对照组相比，3%浮萍组T-AOC、 TP和CRE水平显著升高（P<0.05），MDA、BUN、TG和CHO水平显著降低（P<0.05）；5%浮萍组T-AOC和CRE水平显著升高（P<0.05），MDA、BUN、 UA、TG和CHO水平显著降低（P<0.05）；7%浮萍组TG和CHO水平显著升高（P<0.05），BUN和UA水平显著降低（P<0.05）。各组别间血清中SOD和GSH-Px水平均无显著性差异（P>0.05）。

3 讨论与结论

3.1 浮萍对产蛋中后期蛋鸡血常规的影响

血液在促进新陈代谢和维持内环境稳态方面起着重要作用，其成分和含量的变化都可在一定程度上反映器官或组织的病理学改变[12]，因此血常规成为评价动物健康与否的重要依据。白细胞被称为机体第一道防线，当机体受到细菌侵袭或发生炎症会刺激白细胞数量急剧增多[13]。红细胞的主要功能是运输O2和CO2，此外还在酸碱平衡中起一定的缓冲作用。这2项功能都是通过红细胞中的血红蛋白来实现的。血小板的作用机制在于能够发挥较强的黏附血管内皮细胞的能力，负责机体凝血功能。本研究結果表明，随着饲粮中浮萍添加比例的升高，蛋鸡血清中白细胞数下降，红细胞数、血红蛋白含量和血小板数升高，提示浮萍可能提高产蛋中后期蛋鸡代谢水平和免疫水平。原因可能是浮萍中包含的活性物质芹菜素具有抗红细胞溶血的特性，亦或者是荭草苷和木犀草素对红细胞自然老化的保护作用，具体原因仍需要进一步研究。

3.2 浮萍对产蛋中后期蛋鸡血清生化指标的影响

血清生化指标的变化可以反映动物机体的物质代谢水平。超氧化物歧化酶（SOD）是体内抗氧化系统的第一道防线，它可以催化清除超氧阴离子自由基，使其发生歧化反应生成H2O2和O2，从而去除活性氧，维持氧代谢的平衡，然后在谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的作用下，清除由SOD产生的H2O2，把其转化为对机体无害的水和氢气，这些酶的活性可以反映自由基的清除能力。丙二醛（MDA）是自由基攻击多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化形成的终产物[14]。总抗氧化能力（T-AOC）代表体内酶类和非酶类抗氧化物的总体水平，是反映机体抗氧化作用的重要指标。研究表明，浮萍中的主要有效化学成分芹菜素可抑制对乙酰氨基酚诱导的大鼠肝毒性中的脂质过氧化水平，并显著增加酶抗氧化防御机制[15]。本研究结果也显示，在饲粮中添加浮萍可使血清中MDA含量下降，T-AOC升高，能够增强产蛋中后期蛋鸡抗氧化能力。

血清中的白蛋白（ALB）和总蛋白（TP）以及尿素氮（BUN）是动物机体氮代谢相关指标，在机体蛋白质的合成、运输与代谢过程中起着不可或缺的作用。白蛋白（ALB）主要参与动物机体组织修复和能量代谢，由肝脏实质细胞合成。总蛋白（TP）由白蛋白和球蛋白组成，具有维持血管内胶体渗透压和酸碱平衡的作用，与机体免疫力也有关联。一般来说，血清总蛋白、白蛋白含量升高提示肝脏蛋白质合成能力增强[16]。血清尿素氮（BUN）经肾小球滤过排出体外，肾小球受损后，滤过作用降低，会引起血清中尿素氮浓度升高。肌酐（CRE）是动物肌肉代谢过程中的小分子物质，主要经肾小球滤过排出体外，因此，血清尿素氮（BUN）和肌酐（CRE）含量都是临床评价肾功能的重要指标[17]。尿酸（UA）是动物机体内氨基酸或蛋白质的最终代谢产物，机体UA含量越低，表明蛋白质利用率越高。本研究结果表明，在饲粮中添加浮萍可提高血清总蛋白含量，降低尿素氮水平，增强产蛋中后期蛋鸡生产性能，增加经济效益。

血清中的胆固醇（CHO）和甘油三酯（TG）的含量与蛋鸡体内脂质代谢息息相关。胆固醇（CHO）和甘油三酯（TG）的含量越低，代表机体对脂质的吸收代谢越好，利用率越高。前人研究表明饲粮中添加10 mg·kg-1大豆黄酮有降低产蛋鸡血浆总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的作用[18]。本试验结果与以上结论一致，饲粮中添加3%、5%浮萍后降低了蛋鸡血清中胆固醇和甘油三酯的含量，说明添加3%～5%浮萍可以降低蛋鸡血清中胆固醇和甘油三酯含量，调节脂质代谢。

综上所述，蛋鸡饲粮中添加浮萍能改善产蛋中后期蛋鸡血液指标，促进机体代谢，提高机体抗氧化能力，研究结果可为进一步研发新型饲料添加剂提供参考依据。

参考文献：

[1] 张植元， 范泽， 李静辉， 等. 饲料浮萍水平对黄金锦鲤生长性能、消化酶活力及抗氧化能力的影响[J]. 大连海洋大学学报， 2017， 32（4）： 416-421.

[2] HUANG W J， LONG C L. 浮萍的化学成分及其生物活性（英文）[C]//第八届中国民族植物学学术研讨会暨第七届亚太民族植物学论坛会议文集. 呼和浩特： 中国植物学会， 2016： 206.

[3] 凌云， 何板作， 鲍燕燕， 等. 浮萍的化学成分研究[J]. 中草药， 1999， 30（2）： 88-90.

[4] 何文妮， 叶敏， 王宝荣， 等. 浮萍中黄酮类化学成分的分离与鉴定[J]. 沈阳药科大学学报， 2010， 27（11）： 871-875.

[5] 罗铁成， 侯恩太， 路锋， 等. 浮萍药用研究概况[J]. 安徽农业科学， 2010， 38（16）： 8423-8424.

[6] 朱新景， 张凡， 王星星， 等. 浮萍的药理作用研究进展[J]. 中医药导报， 2020， 26（14）： 29-33.

[7] 万思琦， 刘立亚， 刘梦思， 等. 荭草苷的药理作用机制研究[J]. 医学研究杂志， 2018， 47（6）： 183-186.

[8] 陈班， 李达欢， 李熙灿. 牡荆素保护DNA氧化损伤的活性评价及机制分析[J]. 食品与机械， 2018， 34（1）： 130-134.

[9] 程建忠， 黄金华. 牡荆素的镇痛及抗炎免疫作用研究[J]. 中国医药指南， 2016， 14（31）： 29-30.

[10] JIANG Z Y， JIANG S Q， LIN Y C， et al. Effects of soybean isoflavone on growth performance， meat quality， and antioxidation in male broilers[J]. Poultry Science， 2007， 86（7）： 1356-1362.

[11] 范红娟， 康凯宁， 栗志英. 芹菜素对Aβ1-42致阿尔茨海默病大鼠海马组织氧化应激和炎症反应的影响[J]. 中医学报， 2023， 38（3）： 602-608.

[12] 段明房， 胡红伟， 闫凌鹏， 等. 中草药益生菌复合制剂对生长猪血液常规、血清生化和血清免疫指标的影响[J]. 中国饲料， 2018（3）： 54-59.

[13] HASHEMIPOUR H， KERMANSHAHI H， GOLIAN A， et al. Effect of thymol and carvacrol feed supplementation on performance， antioxidant enzyme activities， fatty acid composition， digestive enzyme activities， and immune response in broiler chickens[J]. Poultry Science， 2013， 92（8）： 2059-2069.

[14] MASSUDI H， GRANT R， BRAIDY N， et al. Age-associated changes in oxidative stress and NAD+ metabolism in human tissue[J]. PLoS One， 2012， 7（7）： e42357.

[15] RA?KOVIC A， GIGOV S， ?APO I， et al. Antioxidative and protective actions of apigenin in a paracetamol-induced hepatotoxicity rat model[J]. European Journal of Drug Metabolism and Pharmacokinetics， 2017， 42（5）： 849-856.

[16] 张兴， 左晓红， 吴买生， 等. 灵芝和猴头菇菌糠对大沙杂交猪血液生理生化及免疫指标的影响[J]. 中国猪业， 2016， 11（5）： 62-66.

[17] 贺绍君， 刘德义， 李静， 等. 地塞米松对生长后期AA肉鸡生化指标的影响[J]. 中国兽医杂志， 2013， 49（10）： 25-27， 31.

[18] 尹靖东. 类黄酮对鸡蛋胆固醇及其氧化物形成的影响[D]. 北京： 中国农业科学院， 2000.

收稿日期：2023-03-25

作者簡介：李泽青（1983—），女，天津人，兽医师，硕士，主要从事畜禽健康养殖技术推广研究。

通讯作者简介：王鸿英（1970—），女，湖南宁乡人，推广研究员，硕士，主要从事生态健康养殖研究;

闫峻（1984—），江苏徐州人，副研究员，博士，主要从事饲料资源开发与评价、畜禽高效生产营养调控与优质风味猪肉开发研究。