果蔬维生素C的提取剂条件及含量比较

李慧婧 苏畅 马锐

摘 要：目的：测定4种不同种类果蔬中的维生素C含量，比较不同提取剂条件对测定结果的影响。方法：采用2，6-二氯靛酚钠滴定法测定不同果蔬中维生素C的含量。结果：草酸、盐酸和醋酸均在浓度为2%时维生素C提取量最高，草酸的提取效果最佳；果蔬中维生素C的最佳提取温度为25 ℃。最适提取条件下青椒、橘子、青提和上海青油菜的维生素C含量分别为58.87 mg/100 g、26.88 mg/100 g、15.36 mg/100 g、40.32 mg/100 g。结论：2，6-二氯靛酚钠滴定法测定维生素C的含量具有终点易于判断、操作简便等优势，可作为测定不同果蔬中维生素C含量的方法。

关键词：维生素C；果蔬；2，6-二氯靛酚钠滴定法；提取剂

Abstract： Objective： To determine the content of vitamin C in four different types of fruits and vegetables， and compare the effects of different extraction conditions on the determination results. Method： The content of vitamin C in different fruits and vegetables was determined using 2，6-dichloro indophenol sodium titration method. Result： When the concentration of oxalic acid， hydrochloric acid and acetic acid was 2%， the extraction amount of vitamin C was the highest， and the extraction effect of oxalic acid was the best; the optimal extraction temperature for vitamin C in fruits and vegetables is 25 ℃. The optimal extraction conditions for vitamin C in green pepper， orange， green extract， and Shanghai green rapeseed are 58.87 mg/100 g， 26.88 mg/100 g， 15.36 mg/100 g， and 40.32 mg/100 g， respectively. Conclusion： The 2，6-dichloro indophenol sodium titration method for determining the content of vitamin C has the advantages of easy endpoint determination and simple operation， and can be used as a method for determining the content of vitamin C in different fruits and vegetables.

Keywords：vitamin C; fruits and vegetables; 2，6-dichlorophenol sodium titration; extractant

维生素C是一种己糖醛基酸，具有抗坏血病的作用，故又称抗坏血酸，是一种小分子有机化合物，在新鲜蔬菜、水果中广泛存在。维生素C具有参与人体内胶原蛋白的合成，提升血管壁弹性，预防心血管疾病；促进胆固醇的排泄，有效预防动脉硬化；将三价铁还原为二价铁，可以促进铁元素被吸收、利用，有助于治疗缺铁性贫血；促进免疫细胞和免疫分子生成，提升人体免疫力；可与金属离子结合由尿排出体外，有效缓解重金属中毒[1]。果蔬中维生素C的含量高低是判断该果蔬营养价值的关键指标之一，其测定显得尤为重要。维生素C在水或乙醇中易溶，而在油剂中不溶，在水中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件下较为稳定。因此，在提取维生素C的实验中，破碎果蔬组织的同时需加入提取剂，以减少维生素C的消耗，增加实验的准确性，常用的提取剂有草酸溶液、盐酸溶液、偏磷酸溶液和醋酸溶液等。

2，6-二氯靛酚钠滴定法测定果蔬中维生素C含量具有准确度高、仪器设备简单、终点易判断和可操作性强等优点，在教学及科研分析中被广泛应用[2]。本实验采用2，6-二氯靛酚钠滴定法测定果蔬中抗坏血酸的含量，拟考察实验室较为常见的3种提取剂对果蔬中抗坏血酸的提取效果，从中选取较优的提取剂及提取条件。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

上海青油菜、青椒、橘子和青提，均购买于当地水果店；2，6-二氯吲哚酚钠盐，合肥巴斯夫生物有限公司；碳酸氢钠、草酸，分析纯，莱阳市双双化工有限公司；L-抗壞血酸（维生素C），分析纯，上海中秦化学试剂有限公司；白陶土，上海麦克林生化科技有限公司；37%盐酸，分析纯，白银良友化学试剂有限公司；99.5%醋酸，分析纯，天津市大茂化学试剂厂；蒸馏水。

1.2 仪器与设备

AL204型电子天平，梅特勒-托利多仪器；HH-4型数显恒温水浴锅，国华电器有限公司；碱式滴定管。

1.3 实验方法

1.3.1 试剂配制

①草酸溶液。取1.3 g、2.8 g、5.5 g、11.1 g和13.9 g草酸分别用蒸馏水溶解并定容至100 mL，配制成浓度分别为1%、2%、4%、8%和10%的草酸溶液，现配现用。②盐酸溶液。取2.27 mL、4.55 mL、9.10 mL、18.20 mL和22.75 mL的盐酸分别用蒸馏水稀释并定容至100 mL，配制成浓度分别为1%、2%、4%、8%和10%的盐酸溶液，现配现用。③醋酸溶液。取0.95 mL、1.91 mL、3.82 mL、7.65 mL和9.57 mL的醋酸分别用蒸馏水稀释并定容至100 mL，配制成浓度分别为1%、2%、4%、8%和10%的醋酸溶液，现配现用[3]。④维生素C标准溶液。准确称取100 mg L-抗坏血酸于烧杯中，用2%草酸溶解后，移入100 mL容量瓶中，用2%草酸定容至100 mL，得到维生素C标准中间液。吸取10 mL维生素C标准中间液移入100 mL容量瓶中，用2%草酸稀释并定容至100 mL，得到浓度为0.1 mg·mL-1的维生素C标准溶液，现配现用。⑤2，6二氯靛酚钠溶液。准确称取0.21 g碳酸氢钠和0.26 g 2，6二氯吲哚酚钠盐于烧杯中，用蒸馏水溶解后定容至1 000 mL，过滤后装入棕色试剂瓶，现配现用。

1.3.2 2，6-二氯靛酚钠溶液浓度的标定

准确移取10 mL 0.1 mg·mL-1维生素C标准溶液于锥形瓶中，用2，6-二氯靛酚钠溶液进行滴定，边滴定边摇晃使染料与维生素C标准溶液完全反应。滴定过程中观察到锥形瓶内溶液的颜色变为粉红色且15 s内不褪色即为终点，停止滴定，记录2，6-二氯靛酚钠溶液的消耗体积，重复操作3次取平均值[4]。2，6-二氯靛酚钠溶液滴定度的计算公式为

式中：T为2，6-二氯靛酚钠溶液的滴定度，mg·mL-1；C为维生素C标准溶液的浓度，mg·mL-1；V1为移取维生素C标准溶液的体积，mL；V2为2，6-二氯靛酚钠溶液的消耗体积，mL。

1.3.3 样品预处理

将青椒、上海青油菜、橘子、青提4种果蔬用清水洗净，吸水纸吸干表面水分。

1.3.4 维生素C的提取

每次称取果蔬10 g于研钵中，加入一定浓度的提取剂充分研磨，用纱布进行过滤，再加入该提取剂继续用滤纸过滤，获得滤液备用。为减少终点判断误差，增大实验准确性，加入适量白陶土进行脱色，将提取液和白陶土充分混匀，静置数分钟后用滤纸进行过滤[5]。白陶土脱色时会吸附少量提取剂，此时补滴2～3滴所用提取剂，以减少实验误差。将上述滤液转移到100 mL容量瓶中用该提取剂稀释并定容至100 mL。用移液管移取10 mL稀释后的滤液至锥形瓶中，立即进行滴定。

1.3.5 样品滴定

移取样品溶液10 mL至锥形瓶中，用移液管准确移取2，6-二氯靛酚钠溶液25 mL于碱式滴定管中，滴定样品液，边滴定边摇晃，使染料与样品溶液完全反应。当观察到锥形瓶内溶液的颜色变为粉红色且15 s内不褪色即为终点，停止滴定，记录2，6-二氯靛酚钠溶液的消耗体积。果蔬样品中维生素C含量的计算公式为

式中：X为样品中维生素C含量，mg/100 g；V为2，6-二氯靛酚钠溶液的消耗体积，mL；T为2，6-二氯靛酚钠溶液的滴定度，mg·mL-1；C为样品提取液总体积，mL；100为转化系数；W为样品质量，g；D为滴定时所取的样品提取液的体积，mL。

1.3.6 提取剂及其浓度筛选

以浓度分别为1%、2%、4%、8%和10%的草酸、盐酸和醋酸作为提取剂，以蒸馏水为对照，分别处理样品，过滤后得到滤液，滴定后计算不同浓度、不同种类的提取剂提取维生素C的含量，考察提取剂对维生素C提取的影响。

1.3.7 提取剂温度筛选

使用水浴锅，以15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃和35 ℃为提取温度，分别处理样品，过滤后得到滤液，在1.3.6所得最適提取剂及提取浓度条件下滴定，滴定后计算在不同温度条件下提取维生素C的含量，考察提取温度对维生素C提取的影响[6]。

2 结果与分析

2.1 2，6-二氯靛酚钠溶液的滴定度

3次滴定测试中，2，6-二氯靛酚钠溶液的消耗体积分别为11.8 mL、11.4 mL、11.6 mL，计算得到2，6-二氯靛酚钠溶液的滴定度为0.086 7 mg·mL-1。

2.2 不同浓度提取剂对维生素C提取的影响

2.2.1 草酸浓度对维生素C提取的影响

由表1可知，草酸浓度由1%上升至2%时，维生素C提取量随之升高，草酸浓度为2%时，维生素C的提取量最高。草酸浓度由2%上升至10%时，维生素C含量逐渐下降。

2.2.2 盐酸浓度对维生素C提取的影响

由表2可知，盐酸浓度由1%上升至2%时，维生素C提取量随之上升，盐酸浓度为2%时，维生素C的提取量最高。盐酸浓度由2%上升至10%时，维生素C含量逐渐下降。

2.2.3 醋酸浓度对维生素C提取的影响

由表3可知，醋酸浓度由1%上升至2%时，维生素C提取量随之上升，醋酸浓度为2%时，维生素C的提取量最高。醋酸浓度由2%上升至10%时，维生素C含量逐渐下降。

2.3 不同提取剂对维生素C提取的影响

由表1～表3数据可知，草酸、盐酸和醋酸的最佳提取浓度均为2%。2%浓度下，草酸对不同果蔬的维生素C提取量最高，醋酸次之，盐酸最低。由表4可知，蒸馏水对维生素C的提取能力较弱[7]，青椒中维生素C含量最高，上海青油菜、橘子次之，青提中维生素C含量最低，与不同提取剂对维生素C的提取结果一致。

2.4 不同提取温度对维生素C提取的影响

由表5可知，提取温度由15 ℃增至25 ℃时，果蔬中维生素C的提取量迅速上升并达到最大值；提取温度由25 ℃增至35 ℃时，果蔬中维生素C的提取量逐渐下降。提取温度过高时，维生素C易发生化学反应导致其提取量减少。因此，果蔬中维生素C的最佳提取温度为25 ℃。

2.5 维生素C及糖分在果蔬中的占比

根据2.4中提取温度为25 ℃时测得不同果蔬维生素C的含量计算维生素C在各果蔬中的占比，并查阅不同果蔬的含糖量[8-9]。由表6可知，不同果蔬的维生素C含量占比由大到小为青椒＞上海青油菜＞橘子＞青提；查阅不同果蔬的糖分含量占比由大到小为橘子＞青提＞青椒＞上海青油菜。

3 结论

使用2，6-二氯靛酚钠滴定法测定不同果蔬中维生素C的含量，以2%的草酸为提取剂，提取温度为25 ℃时，维生素C的提取效果最好。本实验比较了4种不同果蔬中的维生素C含量，结果显示青椒和上海青油菜的维生素C含量较高，且含糖量较低；橘子和青提的维生素C含量较低、含糖量较高。因此，建议有糖尿病等相关基础疾病的人群选择维生素C含量较高且含糖量较低的青椒、上海青油菜等水果或蔬菜进行维生素C的补充。

参考文献

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