闵 文,屈大龙,林发坤,李 航,彭 俊,张前军
(1 贵州大学化学与化工学院,贵州 贵阳 550025;2 贵州省石阡县大沙坝乡任家寨村,贵州 铜仁 555104)
八月瓜是木通科(Lardizabalaceae)木通属三叶木通Akebiatrifoliata(Thunb)Koidz的果实,是一种原生态无污染的绿色水果,主要分布于我国长江流域的大部分地区及山东,山西,河南,河北等省[1]。八月瓜营养价值极为丰富,果实中含有大量的蛋白质氨基酸、可溶性糖、维生素C 等成分,同时还含有丰富的Fe、Zn、Ca、Mg、Mn 等人体必需微量元素;不仅有防癌抗癌,预防和治疗高血压、高血脂等效用[2],还有消炎止痛、除湿利尿、补肾养肝、治疗阳痿、润肠通便等作用[3]。近年来,贵州、湖南等地将其作为扶贫项目进行推广种植,已形成规模。八月瓜籽油是从八月瓜种子里提取出来的植物油,富含不饱和脂肪酸,其含量高达70.1%[4],同时八月瓜具有良好的抗氧化活性[5]。因此本文从八月瓜成分功效原理出发,制备一款八月瓜籽油护肤霜,并对其性能进行测定和评价。
八月瓜籽采,贵州石阡县;乳木果油、甘油、尿囊素、透明质酸钠、月桂酰谷氨酸钠、三乙醇胺、硬脂酸、尼泊尔金丙酯,山东优索化工科技有限公司;橄榄乳化蜡,广州珠峰进出口贸易有限公司;去离子水;乙醇;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH),上海源叶生物科技有限公司);2,2’-联氮双二铵盐(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS),上海吉至生化有限公司。
RBX-916皮肤水分测试仪,国荣电子商务有限公司;GL-2型恒温加热磁力搅拌器,郑州长城科工贸有限公司;SB5200D超声波清洗机,宁波新芝生物科技股份有限公司;101-1AB电热鼓风干燥箱,天津市泰斯特仪器有限公司;RE52-99旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂;pHS-3C pH计,上海仪电科学仪器股份有限公司;UV-2700紫外分光光度计,岛津仪器有限公司。
八月瓜种子——粉碎——石油醚回流提取三次——旋蒸除去石油醚——八月瓜籽油。
表1列出了含八月瓜籽油护肤霜配方,其制备工艺如下:将A组分和B组分加热到75 ℃并维持10 min,将A组分先取出恒温匀质搅拌1 min,再将B组分匀速加入到A组分中,并持续恒温匀质搅拌,加入三乙醇胺继续搅拌5 min,降低搅拌速度至40~45 ℃时可按加入适量香精等成分。
表1 八月瓜籽油护肤霜配方Table 1 The formula of Akebia trifoliata seed oil skin cream
以不含八月瓜籽油,其余相同组分所制备的护肤霜为对照,采用单因素实验考察了不同水油比例以及不同的八月瓜籽油含量对八月瓜籽油护肤霜补水能力的影响。
1.4.1 护肤霜的水油比例对保湿能力的影响
改变护肤霜的水油比例,其余组分不变(表2),通过测定八月瓜护肤霜保湿效果以确定制备护肤霜的水油比。
表2 护肤霜的不同水油比例(乳木果油∶八月瓜籽油=1∶1)Table 2 The skin creams of different water-oil ratio (shea butter∶Akebia trifoliata seed oil=1∶1)
由图1测定结果发现,改变水油比,护肤霜的保湿效果有明显的区别,5号样品(水油比为4∶6)的保湿效果最差,3号样品水油比为6∶4的水分保持率可达46%,且持久,保湿效果最佳。
图1 不同八月瓜籽油含量对皮肤保湿性的影响Fig.1 Effect of different Akebia trifoliata seed oil content on skin moisturizing properties
1.4.2 油相中八月瓜籽油含量对保湿能力的影响
选择水油比为6∶4,通过改变油相中八月瓜籽油含量,其余组分不变(见表3)制备护肤霜,测定护肤霜的保湿效果以确定籽油最佳含量。
表3 护肤霜中八月瓜籽油的含量(水油比=6∶4)Table 3 Content of Akebia trifoliata seed oil in skin care cream (water/oil ratio=6∶4)
由图2测定的结果发现,随着时间的延长,涂抹八月瓜籽油护肤霜及对照产品的水分率均先提高后缓慢降低,相对于对照品八月瓜籽油护肤霜有较明显的保湿效果,这是由于八月瓜籽油中富含各种氨基酸和不饱和脂肪酸,渗透能力强,不仅能迅速突破皮肤屏障渗入皮下组织,同时还能在皮肤表面形成一层膜,降低水分蒸发的速度。通过条件优化,当水油比为6∶4,八月瓜籽油含量约66.7%时产品保湿效果最佳。
图2 不同八月瓜籽油含量对皮肤保湿性的影响Fig.2 Effect of different Akebia trifoliata (Thunb)seed oil content on skin moisturizing
1.5.1 测定方法
(1)DPPH试验
DPPH溶液配置:准确1.972 mg DPPH,乙醇定容于10 mL容量瓶中,配置成浓度为0.5 mmoL/L DPPH溶液,避光保存[6]。
分别取1 mL提取物与0.5 mmoL/L DPPH溶液0.25 mL混合,摇匀后常温下保存20 min,以乙醇为空白组,在524 nm下测定吸光度。根据以下公式计算样品对DPPH自由基的清除率I:I=[(Ao-Ai)/Ao]×100%,式中Ao为未加入样品的吸光值,Ai为加入样品的吸光值[6]。平行操作三次,取平均值。
(2)ABTS试验
ABTS+自由基工作液制备:5 mL 7 mmoL/L ABTS的水溶液与88 μL 140 mmoL/L过二硫酸钾的水溶液混合,黑暗环境下室温放置12 h,用无水乙醇稀释至吸光度为0.68~0.72,此溶液即为ABTS+自由基工作液[6]。
分别取50 μL提取物与1 mL ABTS+自由基工作液混合,摇匀后于30 ℃下保存5 min,以乙醇为空白组,在734 nm下测定吸光度。根据以下公式计算样品对ABTS自由基的清除率I:I=[(Ao-Ai)/Ao]×100%,式中Ao为未加入样品时ABTS+溶液的吸光值,Ai为加入样品时的吸光值[6]。平行操作三次,取平均值。
1.5.2 测定结果及分析
由表4可以看出,八月瓜籽油护肤霜和大宝SOD蜜清除DPPH自由基,ABTS自由基的能力均弱于阳性对照BHT。八月瓜籽油护肤霜具有清除DPPH自由基(IC50=38.50 mg/mL)和ABTS自由基能力(IC50=39.49 mg/mL),其抗氧化活性稍弱于大宝SOD蜜。
表4 八月瓜籽油护肤霜与大宝SOD蜜抗氧化活性Table 4 Akebia trifoliata (Thunb)seed oil skin cream with antioxidant activity
1.6.1 产品感官和理化指标测试
按照行业标准QB/T 1857-2004《润肤霜膏》的规定对试验产品进行检测试验(表5),结果表明八月瓜籽油护肤霜的质量指标较为符合行业标准(QB/T 1857-2004)。
表5 八月瓜籽油护肤霜的质量指标Table 5 Quality indicators ofAkebia trifoliata (Thunb)seed oil skin creams
1.6.2 产品安全性的测定
选择30名皮肤健康,无化妆过敏史的志愿者,取0.2 g八月瓜籽油护肤霜样品用滤纸浸润后放入斑试器内,对照组为对照样品。将八月瓜籽油护肤霜和对照样品贴于受试者前臂曲侧,持续24 h,去除斑贴30 min,待压痕消失后观察皮肤反应。试验后24 h,48 h分别再观察一次。试验结果(表6)表明八月瓜籽油护肤霜和对照样品对人体均无不良反应,说明八月瓜籽油制备护肤霜是安全的。
表6 人体皮肤斑贴试验结果Table 6 The results of human skin patch test
通过单因素方法优化不同水油比例以及不同的八月瓜籽油含量对八月瓜籽油护肤霜保湿性能影响,并按有关标准对八月瓜籽油护肤霜进行了性能测试和评价。在此工艺下八月瓜籽油护肤霜产品性能稳定,对皮肤无刺激,安全性高,具有良好的补水保湿以及抗氧化能力。目前八月瓜种植面积在不断扩大,但其籽油的综合应用还处于起步阶段,相信八月瓜籽油在化妆品中具有广阔的应用前景。