小儿消化性溃疡与Treg/Th17免疫平衡的关系

罗冲,张向东,刘晓政,夏永欣

(南阳市中心医院 消化内科,河南 南阳 473000)

消化性溃疡是一种临床上常见的胃肠道疾病,好发于小儿,以恶心、呕血、腹痛、便血等临床症状较为常见,严重影响儿童的正常身体发育[1]。目前,药物治疗仍然是小儿消化性溃疡的首选治疗方案,奥美拉唑三联疗法可改善小儿消化性溃疡的临床症状,但仍然存在部分患儿停药复发等现象,目前临床上尚缺乏有效的特异性指标预测小儿消化性溃疡治疗后复发[2-3]。报道显示,消化性溃疡发生、发展与机体的免疫失衡密切相关,调节性T淋巴细胞(regulatory T cell,Treg)是机体细胞免疫的重要组成部分,能够与辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)共同作用来维持机体的免疫平衡[4]。相关研究指出,幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)能够激活Th17细胞的免疫应答,使得CD4+T淋巴细胞向Th17细胞分化,会造成Th17细胞的增加,从而破坏机体内Treg/Th17的免疫平衡[5]。目前,国内有关小儿消化性溃疡与Treg/Th17免疫平衡的关系的研究尚少,鉴于此,本研究选取南阳市中心医院收治的125例小儿消化性溃疡患者为研究对象,期望为临床诊治提供指导。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2018年5月至2020年4月南阳市中心医院收治的125例小儿消化性溃疡为研究组,另选择同时间段来医院的59例健康体检儿童为对照组。其中对照组中男42例,女17例;年龄3～16岁,平均(9.27±3.34)岁;研究组中男89例,女36例;年龄3～15岁,平均(9.14±3.25)岁。两组性别、年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(1)纳入标准:①参照《小儿慢性胃炎、消化性溃疡胃镜诊断标准》[6],患儿符合消化性溃疡的诊断标准,且经胃镜证实;②HP感染阳性(经Giemsa试验、14C-尿素呼气试验等确诊)[7];③患儿家属签署知情同意书。(2)排除标准:①既往有消化道手术史;②合并恶性肿瘤;③临床怀疑为癌前病变;④伴有穿孔、出血等并发症;⑤对本研究治疗药物过敏;⑥肝肾等器官功能不全;⑦合并甲状腺功能亢进。该研究已获得南阳市中心医院医学伦理委员会批准。

1.2 研究方法

1.2.1治疗方法

所有患儿均接受奥美拉唑三联疗法,口服阿司匹林胶囊(国药准字H11022562,北京曙光药业有限责任公司),50 mg·(kg·d)-1;口服克拉霉素胶囊(国药准字H20010664,北京顺鑫祥云药业有限责任公司),10 mg·(kg·d)-1;口服奥美拉唑肠溶胶囊(国药准字H20113502,上海美优制药有限公司),0.8 mg·(kg·d)-1,所有患儿均持续治疗2周后观察效果,治疗期间患儿均接受常规流质食物。

1.2.2Treg/Th17的检测方法

体检当天采集对照组儿童3 mL空腹静脉血,治疗前、治疗2周后分别采集研究组患儿3 mL空腹静脉血,通过乙二胺四乙酸钠进行抗凝,采用密度梯度离心法分离两组外周血单核细胞,采用流式细胞仪CyFlow Cube6流式细胞仪(广州吉源生物)检测两组Treg细胞与Th17细胞,并计算Treg/Th17,抗体及试剂盒均购自上海圻明生物科技有限公司。

1.2.3随访及收集资料

治疗2周后,采用电话或门诊复查方式进行随访,随访治疗2周后HP根除者,随访1 a,每月复查1次,以Giemsa试验、14C-尿素呼气试验等[8]确诊为幽门螺杆菌感染阳性为复发,否则记为未复发。采集可能引起患儿治疗后复发的临床资料,包括性别、年龄、病程、抗生素滥用史(不经医生指导更换抗生素种类、延长抗生素疗程或不经医院检查患儿家属随机给患儿服用抗生素)和治疗前、治疗2周后实验室指标,包括γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白蛋白、血红蛋白、总蛋白、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Treg/Th17。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 Treg/Th17

治疗前,研究组Treg/Th17高于对照组(P<0.05);治疗2周后,研究组Treg/Th17低于治疗前(P<0.05),且高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 对照组、研究组Treg/Th17比较

2.2 小儿消化性溃疡HP根除率与复发情况

125例患儿中,HP根除119例,HP根除率为95.20%,随访119例HP根除者1 a,失访2例,117例小儿消化性溃疡中复发26例,复发率为22.22%,未复发者91例。

2.3 复发者与未复发者的临床资料

复发者年龄低于未复发者(P<0.05),复发者有抗生素滥用史例数占比、治疗2周后IFN-γ、Treg/Th17高于未复发者(P<0.05),见表2。

表2 复发者与未复发者的临床资料比较

2.4 小儿消化性溃疡治疗后1 a内复发的logistic回归分析

以小儿消化性溃疡治疗后1 a内是否复发为因变量(是=1,否=0),以年龄、是否有抗生素滥用史、治疗2周后IFN-γ、Treg/Th17为自变量进行logistic回归分析(有抗生素滥用史=1,无抗生素滥用史=0;其余均为连续变量),结果显示,有抗生素滥用史、年龄、治疗2周后Treg/Th17均为小儿消化性溃疡治疗后1 a内复发的危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 小儿消化性溃疡治疗后1年内复发的logistic回归分析

2.5 治疗2周后Treg/Th17对小儿消化性溃疡治疗后1 a内复发的预测价值

ROC曲线结果显示,治疗2周后Treg/Th17预测小儿消化性溃疡治疗后1 a内复发的AUC值为0.786(P<0.05),见表4。

表4 治疗2周后Treg/Th17对小儿消化性溃疡治疗后1 a内复发的预测价值

3 讨论

目前,消化性溃疡的发病机制尚不明确,有研究指出,其发生可能与内分泌失常、饮食不当、HP感染、神经功能失调等因素有关[9-10]。临床治疗小儿消化性溃疡多以药物治疗为主,旨在降低疾病复发风险,促进溃疡愈合[11]。有研究表明,当HP侵袭机体时,会引起机体的免疫细胞未能及时活化或活化功能减弱,自身抵御HP感染的难度较大,加之小儿免疫功能低下,易引起HP感染[12]。有报道指出,寻求消化性溃疡患儿治疗后复发的危险因素有助于临床拟定治疗方案,改善预后[13]。既往研究指出,Treg/Th17在维持机体免疫平衡及内环境稳定中具有重要作用[14]。为探讨小儿消化性溃疡与Treg/Th17免疫平衡的关系,本研究采取前瞻性研究反复进行分析,旨在为临床拟定治疗方案提供指导依据。

相关研究表明,小儿消化性溃疡免疫功能失衡,Treg细胞作为T细胞亚群的重要组成部分,可发挥较强的免疫抑制作用,可在趋化因子的作用下,迁移至机体免疫应答局部,从而抑制靶细胞表面的白细胞介素-2受体α链抗体,从而对靶细胞的活化与增殖产生抑制;Treg可分泌白细胞介素-10等诸多抑制性细胞因子,从而发挥免疫抑制作用,在呼吸道感染等多种免疫疾病中存在结构与功能的改变[15]。相关研究指出,Treg与Th17既相互联系,又相互抑制,在正常生理状态下保持动态平衡,能够维持机体免疫平衡与内环境稳定[16-17]。国内有研究证实Th17细胞介导的免疫应答在HP相关性疾病中发挥着重要作用[18]。本研究结果显示,治疗前研究组Treg/Th17占比高于对照组,提示相比于健康儿童,小儿消化性溃疡Treg/Th17异常,应引起临床的重视。本研究结果显示,治疗后研究组Treg/Th17低于治疗前,提示采用奥美拉唑三联疗法治疗小儿消化性溃疡,可调节Treg/Th17免疫平衡。本研究logistic回归分析结果显示,有抗生素滥用史、年龄、治疗2周后Treg/Th17均为小儿消化性溃疡治疗后1 a内复发的危险因素。本研究中,治疗2周后Treg/Th17预测消化性溃疡患儿治疗后1 a内复发的最佳截断点为0.64,灵敏度、特异度、约登指数及AUC(95% CI)分别为76.92%、75.82%、0.527及0.786(0.694～0.877),提示治疗2周后Treg/Th17预测消化性溃疡患儿治疗后1 a内复发效能较高,值得推广使用。

4 结论

小儿消化性溃疡Treg/Th17异常升高,治疗2周后Treg/Th17与预后复发相关,且可作为小儿消化性溃疡治疗后1 a内复发的敏感指标。然而,本研究随访年限及样本选取有限,后续仍需要扩大样本量、延长随访时间来深入探讨小儿消化性溃疡与Treg/Th17免疫平衡的关系。