白菜中19种农药残留检测能力验证

曾华芳

摘 要：目的：参加福建省农业农村厅组织的2022年度农药残留检测能力验证项目，评价实验室白菜中农药残留定量检测能力，提高实验室检验人员检测水平。方法：根据作业指导书，参照国家标准GB 23200.121—2021中基本操作步骤，采用液相色谱-质谱联用法对考核样进行检测，外标定量法。结果：样品空白未检出农药残留；样品白菜中吡唑醚菌酯检测值为0.17 mg·kg-1。一个月后考核结果为合格，通过能力验证。结论：参加该次能力验证活动，发现并解决了检验人员在实验过程中存在的问题，提升了检验人员的检测能力。

关键词：白菜；农药残留；检测能力验证

Abstract： Objective： To participate in the 2022 pesticide residue detection capacity verification project organized by Fujian Provincial Department of Agriculture and Rural Affairs， to evaluate the laboratorys ability to quantitatively detect pesticide residues in Chinese cabbage， and to improve the testing level of laboratory inspectors. Method： According to the operation guide， referring to the basic operation steps in the national standard GB 23200.121—2021， liquid chromatography-mass spectrometry was used to test the assessment samples with external standard quantitative method. Result： No pesticide residues were detected in the sample blank; the detection value of pyraclostrobin in the sample Chinese cabbage was 0.17 mg·kg-1. The result of the assessment after one month was qualified and passed the proficiency testing. Conclusion： Participating in this detection capacity verification project has identified and solved the problems of the inspectors in the experimental process， and improved the detection capacity of the inspectors.

Keywords： Chinese cabbage; pesticide residues; detection capacity verification

随着现代农业的高质量发展，农产品生产对农药、抗生素和激素等外源物质依赖日益加深。农药在农产品生产过程中使用量较大、农药不规范使用以及农药本身质量问题等都是农产品中农药残留超标的原因。因此农产品农药残留检测是把控农产品质量和安全的第一道关口，关乎着人们的食品安全、农业产业的发展和社会稳定[1]。本文依托于参加福建省农业农村厅开展的2022年农药残留检测能力验证项目，介绍了白菜中的农药残留量测定能力验证的整个流程[2]，并总结了能力验证需要注意的几点关键事项，目的在于加强交流学习，促进县级检测中心农产品农药残留检测技术和管理水平的提升。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

能力验证实验的盲样由福建省农产品质量安全检验检测中心统一制备发放，本次盲样的基质为白菜，样品处于冷冻匀浆状態，样品包括1份约为200 g的考核样和1份约为200 g的空白样。

19种农药标准品（吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、噻嗪酮、噻菌灵、克百威、嘧菌酯、烯酰吗啉、噻螨酮、咪鲜胺、吡唑醚菌酯、茚虫威、灭多威、3-羟基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和莠灭净），质量浓度为100 ?g·mL-1，坛墨质检标准物质中心；乙腈（HPLC）、甲醇（色谱纯）、冰乙酸（AR）和甲酸（HPLC），赛默飞有限公司。

1.2 仪器与设备

LX50-QSight110液相色谱质谱联用仪（美国珀金埃尔默公司）、电子天平（福州志华科学仪器有限公司）、振荡器（江苏省金坛市江南仪器厂）和漩涡仪等。

1.3 方法

1.3.1 验证项目和方法

本次参加能力验证的项目共19种，包括吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、噻菌灵、克百威、嘧菌酯、烯酰吗啉、咪鲜胺、吡唑醚菌酯、茚虫威、灭多威、3-羟基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、噻嗪酮、噻螨酮、莠灭净[3]，根据本实验室资质认定证书附表中的承检范围确定。

根据实验室的实际条件，能力验证选择的方法是《食品安全国家标准 植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法》（GB 23200.121—2021）[4]。样品用有机溶剂乙腈进行提取，所得提取液经净化进行液质联用仪上机检测，外标法定量。

1.3.2 实验条件

（1）液相色谱条件。色谱柱：C18柱（100 mm×2.1 mm，2.7 μm）；柱温：35 ℃；流动相：A为2 mmol·L-1甲酸铵-甲酸水溶液，B为2 mmol·L-1甲酸铵-甲酸甲醇溶液；进样量：2.0 μL；流速：0.25 mL·min-1；流动相梯度洗脱见表1。

（2）质谱条件。离子源类型：ESI电喷雾离子源；正离子扫描方式；多反应监测（MRM）；电喷雾电压：5 000 V；雾化器温度：180 ℃；离子源温度：250 ℃。19种农药及其代谢物的质谱参数见表2。

1.4 能力验证测定

1.4.1 样品领取

样品的领取是能力验证较重要的步骤之一。样品是省厅检测中心直接用顺丰冷链速运，检测人员应随时跟踪快递信息，确保及时收到样品，收到样品时应检查样品是否存在破裂撒漏等现象，若出现上述现象应立即与省厅检测中心联系。

1.4.2 样品的提取

分别称取解冻至室温的样品白菜和样品空白各10 g于50 mL离心管中，各3个平行，另外取空离心管做试剂空白。分别加入10 mL乙腈、1颗陶瓷均质子，剧烈振荡1 min；加入提取盐包（内含4 g无水硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠二水合物、0.5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物），剧烈振荡1 min，4 200 r·min-1离心5 min。

1.4.3 样品的净化

从每个离心管吸取上层乙腈溶液5.00 mL，分别加入净化盐管（内含除水剂和净化材料），再经混匀用涡旋仪涡旋1 min，4 200 r·min-1离心5 min，吸取上清液经过滤膜，等候测定。

1.4.4 标准曲线的配制

将上述1.1中的19种农药标准品（浓度为100 ?g·mL-1）用乙腈配制成浓度为2 ?g·mL-1的19种农药混标溶液A，再将混标溶液A稀释成浓度梯度分别为0.005 ?g·mL-1、0.010 ?g·mL-1、0.020 ?g·mL-1、0.050 ?g·mL-1和0.100 ?g·mL-1的混合标准工作溶液，上机测定，建立标曲曲线。

1.4.5 结果上报

上机检测完毕后，实验人员应及时打印检测结果并分析数据得到结果，收集色谱图以及做好原始记录的完善，结果数据分析确认无误后，在规定的时间内提交验证结果以及报送图谱与原始记录等，然后针对此次能力验证进行全面梳理，及时进行分析总结与整理归档工作。

2 结果与分析

2.1 定性和定量检测结果

为防止待测液目标未知物衰减，样品处理结束后立即安排上机检测，允许的情况下，每个样品上机重复测定3次以上，减少系统误差。初检结果显示，样品空白未检出农药残留；样品白菜检测出含有吡唑醚菌酯，其余18种农药均未检出，检出结果如表3所示。

2.2 回收率试验

根据初检结果，样品白菜含有的吡唑醚菌酯平均浓度为0.202 mg·kg-1。称取3个空白样品10 g，分別加入1 mL 混标溶液A以及9 mL的乙腈，剩余步骤与1.4.2、1.4.3步骤一致，获得加标待测液，再进行上机测定，计算回收率[回收率=（加标浓度-初检浓度）/质控添加浓度×100%]，结果如表4所示。

2.3 能力验证结果

通过对样品空白、样品白菜以及加标回收质控样进行上机检测分析，质控回收率满足70%～120%这一要求的范围。为使结果更为准确，将样品检出值经质控回收率矫正后上报结果，即考核盲样中检出农药及含量：样品空白为未检出；样品白菜中检出吡唑醚菌酯检测值为0.17 mg·kg-1，结果上报1个月后收到反馈结果为合格，通过此次能力验证。

3 农残检测能力验证的注意事项

3.1 样品保存

收到的样品处于冷冻状态，样品可能存在水和冰晶，此时应重新匀浆再取样检测。

3.2 称量

称量样品时应注意是否具有代表性，尽量用比较大的称量勺，减少样品间的差异性；瓜果类冷冻蔬菜样品，需要在完全解冻后再均匀混合处理进行称量，以保证检测数据的准确性[5]。称量样品时应注意是否过度解冻；称量之前应该充分搅拌；称量时尽量使用开口较大的容器，可以避免样品粘在容器边缘；称量前应规划好样品的用量，防止实验过程中出现过失时需要重新称取样品而样品量不够的情况。

3.3 提取

根据实验标准操作，应注意样品是深绿色时，如青菜椒、菠菜、菜心等，可以在均质前加入石墨粉先将大部分色素去除，再进行提取；样品为汁液时，如桃汁、菠菜汁等，这类样品含水分多且呈酸性，建议在称取之前先将pH调制中性，再进行提取。

3.4 标准品配制

（1）标准品应按说明书要求来存放。浓度为500～1 000 mg·L-1的标准品，一般存放温度在-18 ℃左右，有效期为6个月；浓度为1～10 mg·L-1的标准品，一般存放温度在0～5 ℃，有效期为1个月；浓度为0.5～1.0 mg·L-1的标准品，一般存放温度在0～5 ℃，有效期为2～3周。

（2）实验室管理标准溶液应该做到规范并且可追溯，应建立标准物质管理台账和配制领用台账。每种标准品都能溯源到所购买标准品的标准证书。

（3）标准品在配制时应逐级稀释，做到现配现用，应使用在保质期内且新开封的标准品，避免标准品放置时间过久出现浓度变化的情况。

（4）当标液浓度与样品的浓度相差较大时若使用单点校准，容易导致结果偏差较大，因此本实验采用五点校准。

3.5 检测过程中质量控制

①先做试剂空白，根据空白值高低来判断试剂是否有问题或者是器皿是否被污染。②质量控制加标时尽量使用混标进行添加，避免因添加溶剂体积过大而对结果造成影响。③回收率试验时，可用样品空白进行添加，添加的浓度应尽量与考核样品初步定量一致，以确保数据结果的准确性。

3.6 仪器设备维护

在接到能力验证通知时，检测人员应对仪器设备进行全方位维护[5]，对仪器状态有清晰的把握，及时确定仪器设备的准确度、灵敏度、稳定性等各项关键参数。可将新配制的标准溶液进行上机测定，与之前记录的标准溶液响应值进行比较，响应值一致，则表明仪器设备正常，否则需一一排查是否需要更换色谱柱、更换进样隔垫、清洗离子源等，最终使设备处于最佳运行状态。

3.7 数据处理

（1）在日常实验中，需要加强实验的前处理过程，否则容易出现结果不平行、回收率偏高或偏低等。如若出现两个样品结果不平行的情况，首先要排除仪器问题，再排查前处理环节问题。

（2）原始记录应及时填写，不能补记；所填写的信息应该完整并且可追溯；填写有效数字的数位要正确，并且使用国家规定的法定计量单位；有效数字计算应符合有效数字运算规定；数值修约应符合GB/T 8170—2008标准的规定；农药残留和农药污染物检测的计算结果一般保留2位有效数字，若含量超过1 mg·L-1时，保留3位有效数字。

4 结论

农药残留能力验证结果是否合格直接反映了实验室是否具备农药残留检测能力。要想顺利通过能力验证，检验人员应夯实基本功，规范各项操作规程，不断分析总结，提升检测水平，最终为农产品质量安全以及人们的身体健康提供保障。本文以福建省农业农村厅组织的农产品农药残留能力验证为例，分享整个实践过程中应注意的各项关键点，旨在于加强交流学习，为农产品农药残留检测机构提高能力验证水平提供参考和借鉴。

参考文献

[1]郭华.草萘胺对土壤环境的影响以及农药多残留分析方法研究[D].南京：南京农业大学，2007.

[2]张文静.西葫芦中3种有机磷农药残留检测能力验证实践[J].农业科技与信息，2022（22）：90-94.

[3]鲍小明，胡涛，胡春.浅析宁夏农产品检测技术能力验证工作[J].宁夏农林科技，2020，61（11）：23-24.

[4]国家卫生健康委员会，农业农村部，国家市场监督管理总局.食品安全国家标准 植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法：GB 23200.121—2021[S].北京：中国标准出版社，2021.

[5]陈世武.农产品农药残留检测能力验证存在的问题及关键控制点[J].农业工程技术，2023，43（2）：79-80.