血清MMP-2、NF-κB水平对进展期胃癌患者新辅助化疗效果的影响及评估价值▲

冯晓洁 雷 霏 刘宏伟 晋 颖 汪 湃

(北京市和平里医院消化内科,北京市 100013)

新辅助化疗可缩小进展期胃癌肿瘤大小,提高根治性切除率,但受多种因素的影响,部分胃癌患者的新辅助化疗效果欠佳,预后不良[1]。寻找评估新辅助化疗效果的有效指标,对于调整患者治疗方案和改善预后有重要意义。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2参与调节肿瘤周围基质、基底膜Ⅳ型胶原降解、促进肿瘤血管生成,在肿瘤生长、转移中发挥重要作用[2]。基底膜和周围屏障的损伤是肿瘤细胞增殖、外周浸润和远处转移的主要途径,因此MMP2与进展期胃癌的转移密切相关[3]。核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)是一种多向性的核转录因子,能够促进促细胞存活因子的表达,持续激活生长信号,同时抑制促凋亡因子的表达,促进肿瘤细胞增殖[4]。有学者发现,NF-κB与进展期胃癌的病理分型、分化程度密切相关[5]。基于MMP2、NF-κB的作用机制,推测二者可能与进展期胃癌患者的新辅助化疗效果有关。本研究探讨血清MMP2、NF-κB水平与进展期胃癌患者新辅助化疗效果的关系,并分析其预测新辅助化疗效果的价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2018年1月至2021年1月在北京市和平里医院接受新辅助化疗的102例进展期胃癌患者为研究对象。纳入标准:(1)符合《实用胃肠恶性肿瘤诊疗学(上卷)》[6]中进展期胃癌的诊断标准;(2)经胃镜活检组织病理证实为胃腺癌,患者临床分期为ⅡA期、ⅡB期、Ⅲ期[7]并且愿意接受新辅助化疗;(3)入组前未接受手术治疗,预计生存期>6个月;(4)Karnofsky功能状态(Karnofsky Performance Status,KPS)[8]评分≥60分。排除标准:(1)合并免疫系统疾病、血液系统疾病、严重感染性疾病、肝肾功能障碍;(2)合并其他恶性肿瘤;(3)既往接受过化疗;(4)既往有精神病史;(5)不配合治疗。本研究经北京市和平里医院医学伦理委员会批准。所有患者均对本研究知情并签署知情同意书。

1.2 新辅助化疗方法 所有患者均接受XELOX新辅助化疗方案。化疗第1天,给予患者奥沙利铂注射液(南京制药厂有限公司,国药准字H20000686)持续静脉滴注,将130 g/m2奥沙利铂注射液加入500 mL5%葡萄糖,2 h滴完。化疗第1～14天,给予患者口服卡培他滨片(正大天晴药业集团股份有限公司,国药准字H20143044),1 000 mg/m2,2次/d。上述治疗结束后休息7 d再继续下一周期的治疗,21 d为1个化疗周期,所有患者完成3个化疗周期,化疗结束1个月后评估疗效。

1.3 观察指标

1.3.1 一般资料:收集患者的性别、年龄、最大肿瘤直径、临床分期、肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移情况。

1.3.2 疗效判定:治疗结束后随访1个月,评估患者的疗效[9]。完全缓解指肿瘤完全消失;部分缓解指肿瘤最大直径及最大垂直直径(以下简称两径)的乘积缩小超过50%,其他病灶无增大,持续1个月;稳定指肿瘤两径乘积缩小不超过50%,增大不超过25%,持续1个月;进展指肿瘤两径乘积增大超过25%。将完全缓解、部分缓解的患者纳入化疗有效组,其余患者纳入化疗无效组。化疗有效率=(完全缓解+部分缓解)例数/总例数×100%。

1.3.3 血清学指标:新辅助化疗前,采集患者空腹静脉血3 mL,以3 000 r/min离心10 min,离心半径为15 cm,分离上层血清,置于-70 ℃保存待测。采用化学发光法检测糖类抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)、癌胚抗原水平,检测试剂盒均购自Abbott公司(批号:40877FP00、38197FNoo),检测仪器为Abbott公司I2000型化学发光免疫分析仪。采用ELISA检测MMP2、NF-κB水平,检测试剂盒购自R&D Systems公司(批号:MM-0069H1、XG-K11041),检测仪器为Bio-Rad公司生产的550型酶标仪。

1.4 统计学分析 采用SPSS 23.0软件进行统计学分析。计数资料以例数和百分比表示,组间比较采用χ2检验;正态分布的计量资料以(x±s)表示,组间比较采用两独立样本t检验;等级资料比较采用秩和检验;采用Logistic回归模型分析进展期胃癌患者新辅助化疗效果的影响因素;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清MMP2、NF-κB水平评估进展期胃癌患者新辅助化疗效果的价值。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 疗效及分组结果 新辅助化疗结束后1个月,102例进展期胃癌患者中,完全缓解18例,部分缓解39例,稳定33例,进展12例,化疗有效率为55.88%(57/102)。最终纳入化疗无效组45例(44.12%),化疗有效组57例(55.88%)。

2.2 单因素分析结果 化疗无效组患者血清CA19-9、癌胚抗原、MMP2、NF-κB水平均高于化疗有效组(均P<0.05),但两组患者的年龄、性别、肿瘤最大直径、临床分期、肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。见表1。

表1 单因素分析结果

2.3 多因素分析结果 将疗效作为因变量(1=无效,0=有效),将血清癌胚抗原、CA19-9、MMP2、NF-κB水平作为自变量(均为连续变量),进行多因素Logistic回归分析。结果显示,新辅助化疗前血清癌胚抗原、CA19-9、MMP2、NF-κB水平是影响进展期胃癌患者化疗效果的因素(均P<0.05)。见表2。

表2 多因素分析结果

2.4 血清MMP2、NF-κB水平评估进展期胃癌患者新辅助化疗效果的价值 ROC曲线分析结果显示,新辅助化疗前血清MMP2水平取最佳截断值4.560 ng/mL、血清NF-κB水平取最佳截断值52.465 mmol/L时二者单独及联合评估进展期胃癌患者化疗无效的曲线下面积均>0.70,且联合评估效能更佳。见表3、图1。

图1 新辅助化疗前血清MMP2、NF-κB水平评估进展期胃癌患者化疗无效的ROC曲线图

表3 新辅助化疗前血清MMP2、NF-κB水平评估进展期胃癌患者化疗无效的价值

3 讨 论

2020年全球胃癌数据提示中国胃癌发病率约占全球50%[10]。2019年我国癌症报告提示消化系肿瘤中胃癌发病率位居第一,死亡率位居第二[11]。由于胃癌早期无明显特征,大多数患者就诊时已处于进展期,错失了行根治性手术治疗的机会,5年生存率不足30%[11]。新辅助化疗是进展期胃癌多学科综合治疗的重要手段之一,可通过缩小肿瘤体积来提高手术切除率,但仍有部分进展期胃癌患者经新辅助化疗方案治疗后效果不佳,远期预后受到影响[12]。潘国烽[13]对35例进展期胃癌患者进行研究,结果显示新辅助化疗有效率为42.86%。而本研究结果显示,102例进展期胃癌患者经新辅助化疗3个周期后,化疗有效率为55.88%,略高于上述研究结果。但总体来说,进展期胃癌患者经新辅助化疗后无效的风险仍较高。因此,寻找评估进展期胃癌患者新辅助化疗效果的指标十分必要。

肿瘤的侵袭、转移情况是决定进展期胃癌患者预后的关键,而细胞外基质降解是肿瘤侵袭、转移的重要环节,在肿瘤转移、血管生成的起始和终末阶段均有重要作用[14]。MMP是一类与肿瘤侵袭、转移关系密切的蛋白质水解酶,其中MMP2是其重要成员,以酶原的形式分泌,MMP2一方面可通过新生血管形成来促进肿瘤的转移、侵袭,另一方面可通过降解肿瘤细胞表面的基底膜,促进肿瘤细胞浸润[15]。研究发现,胃癌患者的血清MMP2水平与肿瘤浸润深度、远处转移、临床分期等密切相关[16]。NF-κB为多向性、多功能的核转录因子,能够调节与细胞凋亡和增殖有关的基因,参与癌变过程[17]。NF-κB活化能够促进肿瘤细胞转化和肿瘤进展,还能够使肿瘤细胞逃避免疫检测并对治疗产生耐受性[18]。由此推测,血清MMP2、NF-κB的异常表达或与进展期胃癌患者的新辅助化疗效果有关。本研究结果显示,化疗无效组患者的血清MMP2、NF-κB水平高于化疗有效组,且新辅助化疗前血清MMP2、NF-κB水平是影响进展期胃癌患者化疗效果的因素(均P<0.05)。提示新辅助化疗前血清MMP2、NFκB水平升高者化疗效果欠佳,原因可能是作为肿瘤血管生成及Ⅳ型胶原降解的关键酶,血清MMP2可通过改建细胞外基质,促进肿瘤血管生成,影响新辅助化疗的效果[19]。被激活的NF-κB可使微血管的纤溶系统紊乱,为肿瘤发生血行转移提供了血液动力学基础[18,20]。同时,血清NF-κB过表达可上调促细胞存活基因的表达,促进肿瘤细胞增殖,抑制促凋亡因子表达等,从而影响新辅助化疗的效果,增加患者预后不良的风险[21]。但本研究发现不同肿瘤临床分期、分化程度、淋巴结转移情况的患者新辅助化疗的效果差异无统计学意义(均P>0.05),原因可能为本研究观察时间较短,观察指标不够全面,今后需延长随访时间,纳入更多指标以更全面地观察疗效。

既往研究还发现血清癌胚抗原、CA19-9水平与胃癌患者的预后密切相关[22]。本研究结果显示,化疗无效组患者的血清癌胚抗原、CA19-9水平高于化疗有效组(均P<0.05),与上述研究结果相似,且新辅助化疗前血清癌胚抗原、CA19-9水平是影响进展期胃癌患者化疗效果的因素(均P<0.05),提示血清癌胚抗原、CA19-9过表达可能是进展期胃癌患者化疗无效的风险因子,但具体机制仍需进一步研究。

ROC曲线分析结果显示,新辅助化疗前血清MMP2水平、NF-κB水平单独及联合评估进展期胃癌患者化疗无效的曲线下面积均>0.70,且二者联合评估效能更佳。提示血清MMP2、NF-κB水平对进展期胃癌患者的新辅助化疗效果有一定的预测价值。建议在行新辅助化疗期间监测进展期胃癌患者的血清MMP2、NF-κB水平,根据其表达水平的变化调整治疗方案,以改善患者的治疗效果。

综上所述,新辅助化疗前血清癌胚抗原、CA19-9、MMP2、NF-κB水平升高是进展期胃癌患者化疗效果不佳的危险因素,其中血清MMP2、NF-κB水平可用于新辅助化疗效果的评估,且二者联合评估的效能更佳。