壮族输血依赖型地中海贫血患者红细胞免疫抗体检出情况及输血有效性调查

何著刚, 胡秀娟, 黄 金

崇左市人民医院 1.输血科;2.内分泌科,广西 崇左 532200;3.广西壮族自治区江滨医院输血科,广西 南宁 530000

地中海贫血是临床常见遗传性溶血性血液系统疾病,由构成红血球基因失常导致,严重者需要长期输血治疗[1]。但在输血过程中,受血者与献血者红细胞抗原不同,很有可能发生红细胞同种免疫,即受血者接受献血者红细胞时,机体免疫系统会识别外来抗原产生针对外来抗原的抗体,如果受血者血液中存在红细胞同种抗体,再次输入表达相应抗原的异体红细胞,机体将发生补体作用,发生溶血性输血反应,引起受血者休克、急性肾功能衰竭,甚至死亡[2]。为保证输血安全性和有效性,有必要在输血前对患者进行红细胞免疫抗体筛查,如果检测到同种抗体,就要进行交叉配血试验,避免输血不良反应。广西壮族自治区是遗传性疾病地中海贫血的高发区,输血依赖型患者较多,长期多次输血引发的红细胞免疫应答会导致自身免疫同种抗体和自身抗体出现,给患者急救、输血、配血带来极大压力[3]。目前,国内外对壮族人群红细胞免疫抗体检出率及检出类型报道较少。本研究旨在调查研究壮族输血依赖型地中海贫血患者的红细胞免疫抗体检出情况及输血有效性。现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取自2021年1月至2022年12月从崇左、南宁、百色、河池等地合作医院随机抽取的3代以上均是壮族血统的因地中海贫血输血至少两次的300例患者为研究对象。纳入标准:年龄≥18岁;3代以上均是壮族血统;输血次数两次(含两次)以上。排除标准:合并骨髓衰竭性疾病及其他影响输血的疾病;合并严重肝肾疾病。根据是否检出红细胞免疫抗体将患者分为检出组(n=33)和非检出组(n=267);再根据红细胞免疫抗体检出类型将检出组患者分为同种抗体组(n=21)和自身抗体组(n=12)。患者及其家属均签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 研究方法

1.2.1 输血前检测 输血前进行血常规检查,重点检测血红蛋白,根据新型三级甲等医院输血条款要求[4]进行输血过程的观察、记录等,输血不良反应按照规范要求填报。

1.2.2 血液成分 患者输注的红细胞成分均为去白悬浮红细胞(离心去除血浆和白膜层),输注的细胞为保存约10 d的血液成分,保养液为ACD红细胞保存液,血液分别来源于当地中心血站。

1.2.3 交叉配血、抗体筛查及鉴定 采用微柱凝胶卡检测,执行厂家操作要求,抗体筛选细胞、抗体鉴定细胞使用REAGEN公司生产的产品。抗原包括D、C、c、E、e、JKa、JKb、Lua、Lub、Fya、Fyb、Lea、Leb、K、k、M、N、S、s、Mur、P1、Dia。血清与所有筛选细胞和鉴定试剂红细胞发生凝聚反应且红细胞直接抗人球蛋白实验阳性者视为自身抗体阳性。

1.2.4 输血后检测 输血后进行血常规检查,按照设计的输血效果评价表(包括编号、一般人口学资料、疾病诊断、既往红细胞输入量、妊娠次数、输血后血红蛋白值、血制品贮存时间等)收集资料。

1.3 红细胞输注效果判断 按照输血协作组提出的实行标准进行红细胞输注效果判断[5]。输血后血红蛋白升高值未达到预期值的80%为输血无效,达到80%为输血有效。

血红蛋白升高预期值(g/L)=90%×[供者血红蛋白(g/L)×输血量(L)/患者体质量(kg)×0.085(L/kg)]

(输血量是以全血量为标准,各种红细胞制剂折算为对应全血量;患者为儿童时需要将公式中的常数改为0.090 L/kg计;90%为检验误差)

2 结果

2.1 检出组和非检出组临床资料比较 检出组33例,红细胞免疫抗体检出率为11.00%(33/300)。女性、有妊娠史女性的红细胞免疫抗体检出率高于男性、无妊娠史女性,差异有统计学意义(P<0.05)。检出组接受输血总时间和总输血次数高于非检出组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 检出组和非检出组临床资料比较

2.2 同种抗体组和自身抗体组抗体性质鉴定结果比较 检出组33例中:Rh血型红细胞免疫抗体检出占比最高,为45.45%(15/33),红细胞免疫抗体检出率为5.00%(15/300);MNS、Duffy、Lutherran血型红细胞免疫抗体检出各占比6.06%(2/33),红细胞免疫抗体检出率均为0.67%(2/300)。IgG性质抗体(30例)多于IgM性质抗体(3例)。见表2。

表2 同种抗体组和自身抗体组抗体性质鉴定结果比较

2.3 同种抗体组和自身抗体组临床资料比较 同种抗体组男性7例,女性14例;输血总量≤40 U 3例(14.3%),输血总量>40 U 18例(85.6%);总输血次数≤2次2例(9.5%),总输血次数≥3次19例(90.5%)。自身抗体组男性2例,女性10例;输血总量≤40 U 6例(50.0%),输血总量>40 U 6例(50.0%);总输血次数≤2次5例(41.7%),总输血次数≥3次7例(58.3%)。两组输血总量、总输血次数比例比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

2.4 同种抗体组和自身抗体组输血有效性分布比较 同种抗体组和自身抗体组有效率分别为95.24%(20/21)和100.00%(12/12),差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 同种抗体组和自身抗体组输血有效性分布比较

2.5 同种抗体组和自身抗体组输血安全性比较 同种抗体组和自身抗体组不良反应发生率分别为9.52%(2/21)和0(0),差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

3 讨论

红细胞免疫抗体指的是因为受到特定红细胞血型抗原的刺激而使机体免疫系统产生的抗体,可与相应抗原发生特异性结合,破坏血红细胞膜,产生溶血反应,危害输血需求者生命安全。导致出现红细胞免疫抗体的原因包括接受输血治疗、妊娠、静脉注射治疗等。输血依赖型地中海贫血患者需要长期接受输血治疗,反复输血易引起同种免疫[6]。妊娠患者因母婴血型不合产生的免疫性IgG抗体可导致新生儿溶血病的发生。因此,红细胞输注前对输血依赖型地中海贫血患者进行免疫抗体筛查有助于预防溶血反应的发生。不同地区及种族人群的红细胞血型抗原表型存在差异,红细胞免疫抗体特异性及检出率也不同。地中海地区摩洛哥(2009～2018年)输血依赖型β-地中海贫血患者的红细胞同种免疫抗体检出率为8.75%[7];埃及输血依赖型地中海贫血患者的同种免疫抗体检出率为28.40%,自身免疫抗体检出率为1.10%[8];中东阿拉伯海湾地区重症地中海贫血人群的同种抗体阳性率为30.00%,自身抗体检出率为11.00%[9]。针对2000年1月至2021年5月中国输血依赖型地中海贫血患者红细胞同种免疫调查的荟萃分析显示,红细胞免疫抗体总体检出率为11.4%(95%可信区间7.2%～16.3%)[10]。有调查报告显示,香港地中海贫血患者红细胞免疫同种抗体检出率为5.2%～23.5%[11-12]。还有调查报告显示,台湾地区(2006年)输血依赖型地中海贫血患者同种免疫检出率为37.0%[13],(2013年)重型地中海贫血患者同种免疫检出率为9.4%[14]。本研究结果显示,广西壮族输血依赖型地中海贫血患者红细胞免疫抗体检出率为11.00%(33/300),其中,同种抗体占7.00%(21/300),远低于台湾地区(2006年)的37.00%和云南省壮族地中海贫血儿童的35.71%[15]。

本研究结果显示:女性、有妊娠史女性的红细胞免疫抗体检出率高于男性、无妊娠史女性,差异有统计学意义(P<0.05);检出组接受输血总时间和总输血次数高于非检出组,差异有统计学意义(P<0.05)。这表明,输血依赖型地中海贫血患者红细胞免疫抗体检出受性别、妊娠史及输血时间、次数影响。推测其原因在于,输血依赖型地中海贫血女性患者除了自身长期输血需求以外,还会受到自身妊娠、流产等影响,增加输血次数和免疫刺激风险[16],因此,机体免疫抗体产生概率高于男性患者。临床上对壮族输血依赖型地中海贫血女性患者,尤其是有妊娠史的患者,应当注意红细胞血型免疫抗体的筛查和鉴定,以保障患者输血安全及妊娠安全。

Rh血型抗体是引起免疫性溶血性输血反应和新生儿溶血症最常见的不规则抗体之一。本研究中,Rh血型抗体是在红细胞免疫抗体中占比最高的血型系统,且以抗-E比例最高、抗-D其次。这提示,抗-E是目前广西地区壮族输血依赖型地中海贫血患者最常见的抗体。可能原因在于,E抗原在我国人群分布率约为43.55%～52.58%,RhE抗原阴性受血者接受RhE抗原阳性血概率更高,机体产生红细胞Rh抗-E频率更高[17]。有调查报告显示,广西壮族人群RhD阴性率约为0.10%～3.86%[18-19]。MNS、Duffy、Lutherran血型在本次调查中也有一定占比,与莫秋红等[20]关于(2011年)广西地区壮族人群稀有血型Mur+频率(11.29%)、Lub-表型频率(1.26%)高于国内其他地区的结果一致。广西地区壮族(2014年)稀有血型Fy(a-)表型频率为0.10%[21],略低于广西侗族(2013年)人群表型分布频率的0.21%[22]。抗-Lub、抗-Fy、抗-Mur多为免疫产生抗体,能够减弱红细胞输注效果,引起溶血性输血反应。有研究报道,广西地区部分接受输血患者发生抗-Mur漏检,导致溶血性输血反应情况[23]。因此,除了红细胞输注前筛查,通过多重聚合酶链反应筛选并建立少数民族稀有血型库可为临床配合性输血提供帮助。

本研究结果显示:同种抗体组和自身抗体组输血总量、总输血次数比例比较,差异有统计学意义(P<0.05),而有效率、不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。这提示,输血量、输血次数对输血依赖型地中海贫血患者检出红细胞免疫类型存在影响,而输血依赖型地中海贫血患者红细胞免疫抗体类型对输血安全性和有效性却无影响。因为多次异体抗原输注易刺激机体免疫西药,导致同种抗体产生,影响血象维持时间,降低输血效果;而多次输血患者体内有不同血型的同种抗体,导致输血不良反应概率增加[24-25]。还有报道显示,骨髓衰竭性疾病、贫血、急性白血病等需要多次输血患者的红细胞输血效果受到输血次数的影响,且输血无效呈现上升趋势[26-27]。

综上所述,在广西部分地区壮族输血依赖型地中海贫血患者中,女性及有妊娠史患者的红细胞免疫抗体检出率高于男性,检出血型系统以Rh系统为主,MNS、Duffy、Lutherran血型也占有一定比例,且免疫同种抗体和自身抗体类型受输血量、输血次数影响。因此,对于女性、有妊娠史、输血量较大、输血次数较多的患者,在输血前需要进行不规则抗体筛查和鉴定,同时,建立少数民族稀有血型库,保证少数民族输血依赖型地中海贫血患者的输血及妊娠安全。